| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-29页 |
| ·时钟蛋白DEC1概述 | 第13-21页 |
| ·DEC1的基本结构 | 第13-14页 |
| ·DEC1参与的信号通路 | 第14-18页 |
| ·DEC1与时钟周期 | 第18-21页 |
| ·SUMO与SUMO化修饰 | 第21-27页 |
| ·SUMO蛋白家族 | 第21-22页 |
| ·SUMO化修饰的分子机制 | 第22-24页 |
| ·SUMO化修饰的功能 | 第24-27页 |
| ·本论文的选题依据和研究内容 | 第27-29页 |
| ·选题依据 | 第27页 |
| ·研究内容 | 第27-29页 |
| 2 细胞内DEC1的SUMO化修饰 | 第29-39页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·仪器与试剂 | 第29-32页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| ·试剂 | 第30-32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·细胞培养 | 第32页 |
| ·质粒表达载体的细胞转染 | 第32-33页 |
| ·Western blotting(WB)实验 | 第33-34页 |
| ·免疫共沉淀(IP)实验 | 第34-35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-38页 |
| ·COS-7细胞中外源转染DEC1的SUMO化修饰 | 第35-37页 |
| ·MCF-7细胞中内源DEC1的SUMO化修饰 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-39页 |
| 3 K159和K279是DEC1的主要SUMO化位点 | 第39-47页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·仪器与试剂 | 第39-41页 |
| ·仪器 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39-41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·DEC1定点突变体的构建 | 第41-42页 |
| ·突变体的质粒转化 | 第42页 |
| ·质粒提取 | 第42页 |
| ·细胞培养 | 第42-43页 |
| ·质粒表达载体的细胞转染 | 第43页 |
| ·Western blotting实验 | 第43页 |
| ·蛋白质定量实验(考马斯亮蓝法) | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-46页 |
| ·DEC1的定点突变体在COS-7细胞中的表达 | 第43-44页 |
| ·K159和K279是DEC1的主要SUMO化位点 | 第44-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 4 SUMO化修饰对时钟蛋白DEC1功能的调控 | 第47-56页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·仪器与试剂 | 第47-48页 |
| ·仪器 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| ·细胞培养 | 第48页 |
| ·质粒表达载体的细胞转染 | 第48页 |
| ·免疫荧光实验 | 第48-49页 |
| ·核质分离实验 | 第49-50页 |
| ·Western blotting实验 | 第50页 |
| ·IP实验 | 第50页 |
| ·荧光素酶报告基因实验 | 第50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-55页 |
| ·SUMO化修饰促进了DEC1的细胞核定位 | 第50-52页 |
| ·DEC1的SUMO化抑制CLOCK/BMAL1介导的转录 | 第52-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
