| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| ·人巨细胞病毒 | 第10-16页 |
| ·人巨细胞病毒概述 | 第10-12页 |
| ·人巨细胞病毒危害 | 第12-13页 |
| ·人巨细胞病毒中具有免疫作用的蛋白质 | 第13-16页 |
| ·人体抗人巨细胞病毒感染机制 | 第16-19页 |
| ·细胞免疫 | 第16-18页 |
| ·体液免疫 | 第18-19页 |
| ·抗人巨细胞病毒疫苗 | 第19-22页 |
| ·人巨细胞病毒减毒活疫苗 | 第20页 |
| ·人巨细胞病毒核酸疫苗 | 第20页 |
| ·人巨细胞病毒亚单位疫苗 | 第20-22页 |
| ·本论文的选题依据与研究内容 | 第22-23页 |
| 2 目的基因的获得 | 第23-33页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验试剂 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-30页 |
| ·gB_(607-621)基因的设计与合成 | 第24-25页 |
| ·pp65_(362-504)基因序列的获得 | 第25-30页 |
| ·HCMV pp65_(362-504)-gB_(607-621)融合基因重叠延伸PCR扩增及纯化 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-32页 |
| ·gB_(607-621)基因的设计与合成 | 第30-31页 |
| ·pp65_(362-504)基因PCR扩增 | 第31页 |
| ·HCMV pp65_(362-504)-gB_(607-621)融合基因重叠延伸PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 3 人巨细胞病毒融合抗原表位基因原核表达载体的构建、筛选与转化 | 第33-48页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·实验仪器 | 第33-34页 |
| ·实验试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-42页 |
| ·不可溶性表达载体的构建 | 第34-39页 |
| ·可溶性表达载体的构建 | 第39-42页 |
| ·实验结果 | 第42-46页 |
| ·不可溶性重组表达载体的构建 | 第42-44页 |
| ·可溶性重组表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 4 重组人巨细胞病毒融合蛋白质的表达与纯化 | 第48-69页 |
| ·引言 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·菌株与质粒 | 第48页 |
| ·实验仪器 | 第48-49页 |
| ·实验试剂 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-57页 |
| ·人巨细胞病毒融合蛋白质在大肠杆菌中的表达 | 第49-50页 |
| ·SDS-PAGE检测表达蛋白质 | 第50-52页 |
| ·pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pCW-ori表达目的蛋白质的Western Blot检测 | 第52-53页 |
| ·融合蛋白质纯化前处理 | 第53-54页 |
| ·pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pCW-ori表达目的蛋白质的纯化 | 第54-55页 |
| ·pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pCW-ori表达目的蛋白质纯化后的质谱鉴定 | 第55页 |
| ·pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pMAL-c2X表达目的蛋白质亲和纯化 | 第55-56页 |
| ·考马斯亮蓝比色法测定蛋白质浓度 | 第56页 |
| ·pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pMAL-c2X表达融合蛋白质MBP的切除 | 第56-57页 |
| ·实验结果 | 第57-64页 |
| ·重组人巨细胞病毒融合蛋白质在大肠杆菌中的表达 | 第57-59页 |
| ·pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pCW-ori表达目的蛋白质的Western Blot检测 | 第59-60页 |
| ·pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pCW-ori表达目的蛋白质的纯化 | 第60-62页 |
| ·pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pCW-ori表达目的蛋白质纯化后的质谱鉴定 | 第62-63页 |
| ·pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pMAL-c2X表达目的蛋白质的亲和纯化 | 第63页 |
| ·融合蛋白质定量 | 第63-64页 |
| ·融合蛋白中MBP的切除 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| ·小结 | 第67-69页 |
| 结论与展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 附录A 缩略语表及名称说明 | 第77-79页 |
| 附录B-Ⅰ pTYB11载体质粒 | 第79-80页 |
| 附录B-Ⅱ pET21b(+)载体质粒 | 第80-81页 |
| 附录C pp65_(362-504)-gB_(607-621)-pCW-ori的测序图 | 第81-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
