| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 1 序言 | 第8-24页 |
| 1.1 颅面发育和遗传缺陷 | 第8-14页 |
| 1.1.1 神经嵴发育 | 第8-10页 |
| 1.1.2 面部的生长和模式形成 | 第10-12页 |
| 1.1.3 颅面骨骼的诱导和分化 | 第12-13页 |
| 1.1.4 骨缝生长和颅缝早闭 | 第13-14页 |
| 1.2 性别决定、卵巢和卵泡发育 | 第14-19页 |
| 1.2.1 哺乳动物性别决定机制 | 第14-16页 |
| 1.2.2 卵巢和卵泡发育 | 第16-19页 |
| 1.3 基因组中的长距离调控元件 | 第19-24页 |
| 1.3.1 长距离调控元件的主要类型 | 第19页 |
| 1.3.2 长距离调控元件的作用机制 | 第19-20页 |
| 1.3.3 长距离调控元件的基本特征和研究方法 | 第20-22页 |
| 1.3.4 长距离调控元件和人类疾病 | 第22-24页 |
| 2 Foxl2在小鼠面部和卵巢发育中的功能研究 | 第24-43页 |
| 2.1 背景知识 | 第24-31页 |
| 2.1.1 睑裂狭小综合症及其临床特征 | 第24页 |
| 2.1.2 FOXL2基因突变导致睑裂狭小综合症 | 第24-25页 |
| 2.1.3 Foxl2的基因结构、进化和表达 | 第25-26页 |
| 2.1.4 Foxl2的发育生物学功能 | 第26-28页 |
| 2.1.5 Foxl2的细胞生物学功能和作用机制 | 第28-30页 |
| 2.1.6 选题的目的和意义 | 第30-31页 |
| 2.2 结果与分析 | 第31-41页 |
| 2.2.1 PB插入纯合突变小鼠面部发育缺陷 | 第31-33页 |
| 2.2.2 PB插入突变的定位和鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.3 PB插入破坏了AK087804的表达 | 第34-35页 |
| 2.2.4 转基因表达AK08704不能拯救突变小鼠面部缺陷 | 第35-36页 |
| 2.2.5 PB插入造成Foxl2部分失活 | 第36-38页 |
| 2.2.6 面部发育相关标记基因表达检测 | 第38-40页 |
| 2.2.7 纯合雌鼠卵巢功能下降 | 第40-41页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第41-43页 |
| 3 Foxl2基因表达长距离调控元件初探 | 第43-53页 |
| 3.1 背景知识 | 第43-44页 |
| 3.1.1 PIS缺失突变导致FoxL2表达下调 | 第43页 |
| 3.1.2 导致BPES的FOXL2基因外突变 | 第43-44页 |
| 3.1.3 位于FOXL2上游的远距离调控元件 | 第44页 |
| 3.1.4 选题的目的和意义 | 第44页 |
| 3.2 结果与分析 | 第44-52页 |
| 3.2.1 确定PB插入位点附近候选调控区段 | 第45-46页 |
| 3.2.2 PB插入位点两侧存在进化保守区域 | 第46页 |
| 3.2.3 ECR1可以促进报告基因转录 | 第46-48页 |
| 3.2.4 ECR1含有DNase I超敏感位点 | 第48-49页 |
| 3.2.5 ECR1与Foxl2启动子区域相互作用 | 第49-50页 |
| 3.2.6 ECR1单独作用不能控制Foxl2基因正常表达 | 第50-52页 |
| 3.3 小结与讨论 | 第52-53页 |
| 4 材料与方法 | 第53-66页 |
| 4.1 小鼠品系 | 第53-54页 |
| 4.1.1 PB和PBase小鼠品系 | 第53页 |
| 4.1.2 BAC转基因小鼠培育 | 第53-54页 |
| 4.2 表型分析 | 第54-55页 |
| 4.2.1 茜素红-阿辛蓝染色 | 第54-55页 |
| 4.2.2 micro-CT扫描成像 | 第55页 |
| 4.3 组织学 | 第55页 |
| 4.3.1 组织切片 | 第55页 |
| 4.3.2 苏木精-伊红染色 | 第55页 |
| 4.4 分子生物学 | 第55-64页 |
| 4.4.1 GT-PCR | 第56页 |
| 4.4.2 质粒构建 | 第56-59页 |
| 4.4.3 RNA实验 | 第59-60页 |
| 4.4.4 蛋白实验 | 第60页 |
| 4.4.5 小鼠全胚原位杂交 | 第60-61页 |
| 4.4.6 DNase I超敏感位点作图 | 第61-62页 |
| 4.4.7 染色质构象捕获实验 | 第62-64页 |
| 4.5 细胞生物学 | 第64页 |
| 4.5.1 细胞转染 | 第64页 |
| 4.5.2 β-半乳糖苷酶试验和荧光素酶试验 | 第64页 |
| 4.6 生物信息学 | 第64-65页 |
| 4.6.1 Blast和序列比对 | 第65页 |
| 4.6.2 人-小鼠进化保守区域分析 | 第65页 |
| 4.7 统计学 | 第65-66页 |
| 总结和展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
