摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第10-22页 |
1.1 SH概述 | 第10-12页 |
1.1.1 SH的结构 | 第10-11页 |
1.1.2 影响SH性能的因素 | 第11-12页 |
1.1.3 SH的来源 | 第12页 |
1.2 SH在医学上的应用 | 第12-16页 |
1.2.1 医学美容整形 | 第12-14页 |
1.2.2 骨科 | 第14-15页 |
1.2.3 腹盘腔外科 | 第15-16页 |
1.3 SH的提纯及检验方法 | 第16-20页 |
1.3.1 SH的提纯方法 | 第16-17页 |
1.3.1.1 碱处理超滤 | 第16页 |
1.3.1.2 十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)沉淀法 | 第16页 |
1.3.1.3 氯苯酶解法 | 第16页 |
1.3.1.4 其他方法 | 第16-17页 |
1.3.2 SH的结构与纯度检验方法 | 第17-18页 |
1.3.2.1 粘度与分子量 | 第17-18页 |
1.3.2.2 葡萄糖醛酸含量 | 第18页 |
1.3.2.3 核酸OD值 | 第18页 |
1.3.2.4 蛋白质含量 | 第18页 |
1.3.3 菌体与病原体检验方法 | 第18-20页 |
1.3.3.1 菌体检验方法 | 第18-19页 |
1.3.3.2 病原体检验方法 | 第19-20页 |
1.4 本课题研究的目的和意义 | 第20页 |
1.5 本课题研究的内容和方法 | 第20-21页 |
1.5.1 研究内容 | 第20-21页 |
1.5.2 研究方法 | 第21页 |
1.6 本课题创新点 | 第21-22页 |
第二章 实验方法 | 第22-35页 |
2.1 实验试剂 | 第22-23页 |
2.2 实验仪器 | 第23-24页 |
2.3 CTAB法提纯SH | 第24页 |
2.4 氯苯酶解法提纯SH | 第24页 |
2.5 碱处理超滤法提纯SH | 第24-25页 |
2.6 纯品结构与热性能表征 | 第25-27页 |
2.6.1 傅里叶变换红外光谱 | 第25页 |
2.6.2 葡萄糖醛酸含量 | 第25-26页 |
2.6.3 粘度及分子量 | 第26-27页 |
2.6.4 热重分析 | 第27页 |
2.7 纯品纯度指标分析 | 第27-28页 |
2.7.1 核酸OD值 | 第27页 |
2.7.2 蛋白质含量 | 第27-28页 |
2.8 纯品体外HEK293细胞毒性试验 | 第28-29页 |
2.8.1 定性评价 | 第28页 |
2.8.2 MTT法实验操作过程 | 第28-29页 |
2.9 平板菌落计数法对去除菌体前后样品计数 | 第29-30页 |
2.10 采用半数组织细胞感染量(TCID50)对去除病原体前后样品计数 | 第30-32页 |
2.11 QPCR去除病原体前后样品对照 | 第32-35页 |
第三章 结果与讨论 | 第35-75页 |
3.1 碱处理超滤反应条件对纯品结构及纯度的影响 | 第35-51页 |
3.1.1 正交实验影响因素分析 | 第35-39页 |
3.1.2 反应温度对产物结构及纯度的影响 | 第39-45页 |
3.1.2.1 红外光谱分析 | 第39-41页 |
3.1.2.2 热重分析 | 第41-42页 |
3.1.2.3 粘度及分子量 | 第42页 |
3.1.2.4 葡萄糖醛酸含量 | 第42-43页 |
3.1.2.5 核酸OD值 | 第43-44页 |
3.1.2.6 蛋白质含量 | 第44页 |
3.1.2.7 产率 | 第44-45页 |
3.1.3 反应碱溶液质量百分比浓度对纯品结构及纯度的影响 | 第45-48页 |
3.1.3.1 粘度及分子量 | 第45页 |
3.1.3.2 葡萄糖醛酸含量 | 第45-46页 |
3.1.3.3 核酸OD值 | 第46-47页 |
3.1.3.4 蛋白质含量 | 第47页 |
3.1.3.5 产率 | 第47-48页 |
3.1.4 反应时间对纯品结构及纯度的影响 | 第48-51页 |
3.1.4.1 粘度及分子量 | 第48-49页 |
3.1.4.2 葡萄糖醛酸含量 | 第49页 |
3.1.4.3 核酸OD值 | 第49-50页 |
3.1.4.4 蛋白质含量 | 第50-51页 |
3.1.4.5 产率 | 第51页 |
3.2 与传统提纯方法在纯品结构与纯度上的比较 | 第51-61页 |
3.2.1 与CTAB提纯方法比较 | 第51-56页 |
3.2.1.1 红外光谱分析 | 第51-52页 |
3.2.1.2 热重分析 | 第52-53页 |
3.2.1.3 葡萄糖醛酸含量 | 第53页 |
3.2.1.2 粘度及分子量 | 第53-54页 |
3.2.1.5 蛋白质含量 | 第54-55页 |
3.2.1.6 核酸OD值 | 第55页 |
3.2.1.7 产率 | 第55-56页 |
3.2.2 与氯苯酶解提纯方法的比较 | 第56-61页 |
3.2.2.1 红外光谱分析 | 第56-57页 |
3.2.2.2 热重分析 | 第57页 |
3.2.2.3 葡萄糖醛酸含量 | 第57-58页 |
3.2.2.4 粘度及分子量 | 第58-59页 |
3.2.2.5 蛋白质含量 | 第59页 |
3.2.2.6 核酸OD值 | 第59-60页 |
3.2.2.7 产率 | 第60-61页 |
3.3 体外HEK293细胞毒性实验结果 | 第61-62页 |
3.4 碱处理超滤法去除菌体的效果 | 第62-66页 |
3.4.1 菌落图 | 第62-64页 |
3.4.2 碱处理超滤工艺去除SH粗品中添加的大肠杆菌效果 | 第64页 |
3.4.3 碱处理超滤工艺去除SH粗品中添加的金色葡萄球菌效果 | 第64-66页 |
3.5 碱处理超滤法去除病原体的效果 | 第66-75页 |
3.5.1 两种处理方法下纯品中病原体情况 | 第66-67页 |
3.5.2 半数组织细胞感染量(TCID50)分析碱处理超滤法去除病原体 | 第67页 |
3.5.3 q PCR分析碱处理超滤法去除病原体效果引物的设计和PCR | 第67-75页 |
第四章 结论与建议 | 第75-77页 |
4.1 结论 | 第75-76页 |
4.2 建议 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
附录 | 第85-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第88页 |