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碱处理超滤法提纯透明质酸钠

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
第一章 前言第10-22页
    1.1 SH概述第10-12页
        1.1.1 SH的结构第10-11页
        1.1.2 影响SH性能的因素第11-12页
        1.1.3 SH的来源第12页
    1.2 SH在医学上的应用第12-16页
        1.2.1 医学美容整形第12-14页
        1.2.2 骨科第14-15页
        1.2.3 腹盘腔外科第15-16页
    1.3 SH的提纯及检验方法第16-20页
        1.3.1 SH的提纯方法第16-17页
            1.3.1.1 碱处理超滤第16页
            1.3.1.2 十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)沉淀法第16页
            1.3.1.3 氯苯酶解法第16页
            1.3.1.4 其他方法第16-17页
        1.3.2 SH的结构与纯度检验方法第17-18页
            1.3.2.1 粘度与分子量第17-18页
            1.3.2.2 葡萄糖醛酸含量第18页
            1.3.2.3 核酸OD值第18页
            1.3.2.4 蛋白质含量第18页
        1.3.3 菌体与病原体检验方法第18-20页
            1.3.3.1 菌体检验方法第18-19页
            1.3.3.2 病原体检验方法第19-20页
    1.4 本课题研究的目的和意义第20页
    1.5 本课题研究的内容和方法第20-21页
        1.5.1 研究内容第20-21页
        1.5.2 研究方法第21页
    1.6 本课题创新点第21-22页
第二章 实验方法第22-35页
    2.1 实验试剂第22-23页
    2.2 实验仪器第23-24页
    2.3 CTAB法提纯SH第24页
    2.4 氯苯酶解法提纯SH第24页
    2.5 碱处理超滤法提纯SH第24-25页
    2.6 纯品结构与热性能表征第25-27页
        2.6.1 傅里叶变换红外光谱第25页
        2.6.2 葡萄糖醛酸含量第25-26页
        2.6.3 粘度及分子量第26-27页
        2.6.4 热重分析第27页
    2.7 纯品纯度指标分析第27-28页
        2.7.1 核酸OD值第27页
        2.7.2 蛋白质含量第27-28页
    2.8 纯品体外HEK293细胞毒性试验第28-29页
        2.8.1 定性评价第28页
        2.8.2 MTT法实验操作过程第28-29页
    2.9 平板菌落计数法对去除菌体前后样品计数第29-30页
    2.10 采用半数组织细胞感染量(TCID50)对去除病原体前后样品计数第30-32页
    2.11 QPCR去除病原体前后样品对照第32-35页
第三章 结果与讨论第35-75页
    3.1 碱处理超滤反应条件对纯品结构及纯度的影响第35-51页
        3.1.1 正交实验影响因素分析第35-39页
        3.1.2 反应温度对产物结构及纯度的影响第39-45页
            3.1.2.1 红外光谱分析第39-41页
            3.1.2.2 热重分析第41-42页
            3.1.2.3 粘度及分子量第42页
            3.1.2.4 葡萄糖醛酸含量第42-43页
            3.1.2.5 核酸OD值第43-44页
            3.1.2.6 蛋白质含量第44页
            3.1.2.7 产率第44-45页
        3.1.3 反应碱溶液质量百分比浓度对纯品结构及纯度的影响第45-48页
            3.1.3.1 粘度及分子量第45页
            3.1.3.2 葡萄糖醛酸含量第45-46页
            3.1.3.3 核酸OD值第46-47页
            3.1.3.4 蛋白质含量第47页
            3.1.3.5 产率第47-48页
        3.1.4 反应时间对纯品结构及纯度的影响第48-51页
            3.1.4.1 粘度及分子量第48-49页
            3.1.4.2 葡萄糖醛酸含量第49页
            3.1.4.3 核酸OD值第49-50页
            3.1.4.4 蛋白质含量第50-51页
            3.1.4.5 产率第51页
    3.2 与传统提纯方法在纯品结构与纯度上的比较第51-61页
        3.2.1 与CTAB提纯方法比较第51-56页
            3.2.1.1 红外光谱分析第51-52页
            3.2.1.2 热重分析第52-53页
            3.2.1.3 葡萄糖醛酸含量第53页
            3.2.1.2 粘度及分子量第53-54页
            3.2.1.5 蛋白质含量第54-55页
            3.2.1.6 核酸OD值第55页
            3.2.1.7 产率第55-56页
        3.2.2 与氯苯酶解提纯方法的比较第56-61页
            3.2.2.1 红外光谱分析第56-57页
            3.2.2.2 热重分析第57页
            3.2.2.3 葡萄糖醛酸含量第57-58页
            3.2.2.4 粘度及分子量第58-59页
            3.2.2.5 蛋白质含量第59页
            3.2.2.6 核酸OD值第59-60页
            3.2.2.7 产率第60-61页
    3.3 体外HEK293细胞毒性实验结果第61-62页
    3.4 碱处理超滤法去除菌体的效果第62-66页
        3.4.1 菌落图第62-64页
        3.4.2 碱处理超滤工艺去除SH粗品中添加的大肠杆菌效果第64页
        3.4.3 碱处理超滤工艺去除SH粗品中添加的金色葡萄球菌效果第64-66页
    3.5 碱处理超滤法去除病原体的效果第66-75页
        3.5.1 两种处理方法下纯品中病原体情况第66-67页
        3.5.2 半数组织细胞感染量(TCID50)分析碱处理超滤法去除病原体第67页
        3.5.3 q PCR分析碱处理超滤法去除病原体效果引物的设计和PCR第67-75页
第四章 结论与建议第75-77页
    4.1 结论第75-76页
    4.2 建议第76-77页
参考文献第77-85页
附录第85-87页
致谢第87-88页
攻读硕士学位期间的研究成果第88页

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