摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-23页 |
1.1 课题的提出 | 第13-14页 |
1.2 文献综述 | 第14-22页 |
1.2.1 内参基因在qRT-PCR分析中的应用 | 第14-16页 |
1.2.2 生长素与果实发育 | 第16-18页 |
1.2.3 生长素相关家族基因 | 第18-20页 |
1.2.4 植物microRNA对生长素响应因子调控 | 第20-22页 |
1.3 研究目的、意义及内容 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-32页 |
2.1 不同生长条件下西瓜内参基因的筛选 | 第23-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 实验处理 | 第23-24页 |
2.1.3 总RNA提取,cDNA合成,gDNA分离和PCR扩增 | 第24页 |
2.1.4 候选内参基因的选择和引物设计 | 第24-25页 |
2.1.5 qRT-PCR分析 | 第25页 |
2.1.6 数据分析 | 第25页 |
2.1.7 西瓜Catalase家族基因的鉴定与表达分析 | 第25-26页 |
2.2 西瓜果实特异性内参基因的筛选 | 第26-28页 |
2.2.1 植物材料与处理 | 第26页 |
2.2.2 总RNA提取,cDNA合成,gDNA分离和PCR扩增 | 第26页 |
2.2.3 候选内参基因获得及引物设计 | 第26-27页 |
2.2.4 qRT-PCR分析 | 第27页 |
2.2.5 数据分析 | 第27页 |
2.2.6 番茄红素含量测定与ClPSY1的表达模式分析 | 第27-28页 |
2.3 西瓜果实发育的动态分析 | 第28-29页 |
2.3.1 植物材料及取样 | 第28页 |
2.3.2 细胞切片的制作与细胞统计 | 第28页 |
2.3.3 细胞周期的测定 | 第28-29页 |
2.3.4 IAA含量测定 | 第29页 |
2.4 生长素相关家族基因的鉴定及表达分析 | 第29-30页 |
2.4.1 ARF、Aux/IAA和GH3家族基因的鉴定及引物设计 | 第29页 |
2.4.2 系统进化树的构建及其染色体分布 | 第29-30页 |
2.4.3 总RNA提取,cDNA合成及qRT-PCR | 第30页 |
2.4.4 组织特异性表达分析 | 第30页 |
2.5 mircoRNA的表达分析 | 第30-32页 |
2.5.1 microRNA的选择 | 第30页 |
2.5.2 microRNA的提取,cDNA合成及引物设计 | 第30-31页 |
2.5.3 半定量RT-PCR与qRT-PCR | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-72页 |
3.1 不同生长条件下西瓜内参基因的筛选 | 第32-39页 |
3.1.1 候选内参基因的扩增效率与特异性 | 第32-34页 |
3.1.2 候选内参基因的表达 | 第34-35页 |
3.1.3 候选内参基因的表达稳定性分析 | 第35-37页 |
3.1.4 Catalase家族基因的表达分析 | 第37-39页 |
3.2 西瓜果实内参基因的筛选 | 第39-47页 |
3.2.1 候选内参基因的选择及扩增特性分析 | 第39-42页 |
3.2.2 候选内参基因表达谱分析 | 第42页 |
3.2.3 候选内参基因表达稳定性分析 | 第42-46页 |
3.2.4 西瓜果实内参基因的验证 | 第46-47页 |
3.3 西瓜果实发育的动态分析 | 第47-52页 |
3.3.1 西瓜果实发育过程中果实大小的动态分析 | 第47-49页 |
3.3.2 西瓜果实发育不同时期细胞变化 | 第49-50页 |
3.3.3 西瓜果实发育不同时期细胞倍性变化 | 第50-51页 |
3.3.4 西瓜果实发育不同时期IAA含量变化 | 第51-52页 |
3.4 Aux/IAA家族基因对西瓜果实膨大的调控作用分析 | 第52-59页 |
3.4.1 Aux/IAA家族成员在全基因组上的鉴定 | 第52-54页 |
3.4.2 Aux/IAA家族基因系统进化分析 | 第54-55页 |
3.4.3 Aux/IAA家族基因在染色体上的分布 | 第55-56页 |
3.4.4 Aux/IAA家族基因的组织特异性表达分析 | 第56-57页 |
3.4.5 Aux/IAA家族基因在西瓜果实发育过程中的表达分析 | 第57-59页 |
3.5 GH3家族基因对西瓜果实膨大的调控作用分析 | 第59-62页 |
3.5.1 GH3家族成员在全基因组上的鉴定 | 第59页 |
3.5.2 GH3家族基因系统进化分析 | 第59-60页 |
3.5.3 GH3家族基因在染色体上的分布 | 第60-61页 |
3.5.4 GH3家族基因的组织特异性表达分析 | 第61-62页 |
3.5.5 GH3家族基因在西瓜果实发育过程中的表达分析 | 第62页 |
3.6 ARF家族基因对西瓜果实膨大的调控作用分析 | 第62-67页 |
3.6.1 西瓜ARF家族基因的鉴定 | 第62-64页 |
3.6.2 ARF家族基因的系统进化分析 | 第64页 |
3.6.3 ARF家族基因在染色体上的分布 | 第64-66页 |
3.6.4 ARF家族基因的组织特异性表达分析 | 第66页 |
3.6.5 ARF家族基因在西瓜果实发育过程中的表达分析 | 第66-67页 |
3.7 MiR160与miR167在西瓜果实发育过程中的调控作用分析 | 第67-72页 |
3.7.1 MiR160与miR167引物设计及PCR扩增特异性检测 | 第67-69页 |
3.7.2 MiR160和miR167与靶基因ARF在西瓜果实发育中的共表达分析 | 第69-72页 |
4 讨论 | 第72-82页 |
4.1 西瓜内参基因的筛选 | 第72-75页 |
4.2 西瓜果实内参基因的筛选 | 第75-76页 |
4.3 西瓜果实膨大的动态变化 | 第76-77页 |
4.4 Aux/IAA、GH3和ARF家族基因分析 | 第77-80页 |
4.5 MircoRNA与ARF家族基因的互作分析 | 第80-82页 |
5 全文总结 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-95页 |
附录Ⅰ:西瓜内参基因筛选—候选内参基因溶解曲线 | 第95-96页 |
附录Ⅱ:西瓜果实内参基因筛选—候选内参基因溶解曲线 | 第96-97页 |
附录Ⅲ:西瓜果实不同发育期ClAux/IAA23相对表达量分析 | 第97页 |
附录Ⅳ:硕士期间发表论文与专利申请 | 第97-98页 |
致谢 | 第98页 |