| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| ·肺癌的失巢凋亡与基因治疗 | 第11-15页 |
| ·肺癌 | 第11-12页 |
| ·失巢凋亡 | 第12-13页 |
| ·基因治疗 | 第13-15页 |
| ·14-3-3 家族蛋白 | 第15-18页 |
| ·14-3-3 家族概况 | 第15-16页 |
| ·14-3-3 家族蛋白与肿瘤的研究进展 | 第16页 |
| ·14-3-3ζ 与肿瘤 | 第16-18页 |
| ·RNAi 技术与腺相关病毒载体 | 第18-21页 |
| ·RNAi 技术的应用 | 第18页 |
| ·腺相关病毒的研究进展 | 第18-19页 |
| ·rAAV 在基因治疗中的应用 | 第19-20页 |
| ·AAV Helper free 系统 | 第20-21页 |
| ·本论文的研究意义及技术路线 | 第21-25页 |
| ·本论文的研究意义 | 第21-23页 |
| ·本论文的技术路线 | 第23-25页 |
| 第二章 靶向14-3-3ζ基因siRNA 的设计以及psiRNA-14-3-3ζ的构建 | 第25-43页 |
| ·靶向14-3-3ζ基因siRNA 的设计 | 第25-31页 |
| ·14-3-3ζ 基因序列的选定 | 第25-27页 |
| ·siRNA 寡聚核苷酸的设计 | 第27-31页 |
| ·siRNA 寡聚核苷酸的合成 | 第31页 |
| ·psiRNA-14-3-3ζ的构建 | 第31-42页 |
| ·实验材料 | 第31-36页 |
| ·实验方法 | 第36-40页 |
| ·实验结果 | 第40-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第三章 siRNA 表达质粒对A549 细胞内14-3-3ζ抑制效果检测 | 第43-53页 |
| ·实验材料 | 第43-49页 |
| ·质粒和细胞系 | 第43页 |
| ·主要药品与试剂 | 第43-45页 |
| ·主要设备与仪器 | 第45页 |
| ·溶液配制 | 第45-49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·细胞的培养 | 第49-50页 |
| ·Western blot 检测病毒介导的外源基因表达 | 第50-51页 |
| ·实验结果 | 第51-52页 |
| ·细胞培养 | 第51-52页 |
| ·Western blot 实验结果 | 第52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第四章 抑制14-3-3ζ表达的siRNA 重组腺相关病毒载体的构建 | 第53-59页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·质粒和细胞 | 第53页 |
| ·主要药品和试剂 | 第53页 |
| ·溶液配制 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-57页 |
| ·pAAV-H1-14-3-3ζ1-EGFP，pAAV-H1-14-3-3ζ2-EGFP 的构建 | 第53-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-58页 |
| ·pAAV-EGFP 的酶切鉴定 | 第57页 |
| ·pAAV-H1-14-3-3ζ-EGFP 的电泳鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组腺相关病毒载体的测序结果 | 第58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第五章 重组腺相关病毒的组装与病毒介导的siRNA 抑制效果检测 | 第59-69页 |
| ·实验材料 | 第59-60页 |
| ·质粒和细胞 | 第59页 |
| ·主要药品和试剂 | 第59页 |
| ·溶液配制 | 第59-60页 |
| ·主要设备与仪器 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-64页 |
| ·病毒的组装 | 第60-62页 |
| ·重组病毒的滴度测定 | 第62-63页 |
| ·Western blot 检测病毒介导的siRNA 抑制效果 | 第63-64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-67页 |
| ·质粒大量提取的鉴定 | 第64-65页 |
| ·重组病毒的组装结果 | 第65页 |
| ·荧光显微镜检测外源基因在宿主细胞里的表达 | 第65-66页 |
| ·重组腺相关病毒的滴度检测 | 第66-67页 |
| ·Western blot 检测蛋白质表达 | 第67页 |
| ·小结 | 第67-69页 |
| 结论与展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 附录 | 第74-76页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 附件 | 第78页 |
