| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 第1章 前言 | 第14-21页 |
| 1.1 国内外研究现状分析与评价 | 第14-19页 |
| 1.1.1 血管新生背景介绍 | 第14-15页 |
| 1.1.2 血管新生与VEGF通路 | 第15页 |
| 1.1.3 血管新生与NOTCH通路 | 第15-18页 |
| 1.1.4 转录因子SOX2研究进展 | 第18-19页 |
| 1.1.5 SOX2与VEGF及NOTCH通路相关研究 | 第19页 |
| 1.2 前期工作基础 | 第19-21页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第21-34页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第21-23页 |
| 2.1.1 材料来源 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器及耗材 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-34页 |
| 2.2.1 HUVEC细胞培养 | 第23页 |
| 2.2.2 质粒的扩增和提取 | 第23-24页 |
| 2.2.3 脂质体转染构建高表达SOX2的HUVEC | 第24页 |
| 2.2.4 慢病毒包装及感染目的细胞 | 第24-25页 |
| 2.2.5 RNA提取 | 第25页 |
| 2.2.6 qRT-PCR分析 | 第25-27页 |
| 2.2.7 蛋白提取以及Western Blot分析 | 第27-29页 |
| 2.2.8 生物信息学预测启动子结合位点 | 第29页 |
| 2.2.9 染色质免疫共沉淀 | 第29-31页 |
| 2.2.10 CCK8检测细胞增殖 | 第31-32页 |
| 2.2.11 EdU法检测细胞增殖 | 第32页 |
| 2.2.12 流式细胞术检测细胞周期 | 第32-33页 |
| 2.2.13 统计学分析 | 第33-34页 |
| 第3章 实验结果 | 第34-45页 |
| 3.1 稳定SOX2~+ HUVEC系构建及鉴定 | 第34-36页 |
| 3.1.1 G418药物筛选浓度确定 | 第34页 |
| 3.1.2 稳定SOX2~+ HUVEC系构建 | 第34-35页 |
| 3.1.3 稳定SOX2~+ HUVEC系鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2 SOX2~+ HUVEC中VEGF、NOTCH通路相关基因的表达 | 第36-38页 |
| 3.3 SOX2对靶基因的直接结合性 | 第38-40页 |
| 3.3.1 在线网站预测 | 第38-39页 |
| 3.3.2 Ch IP-qPCR检验SOX2对基因启动子区的结合 | 第39-40页 |
| 3.4 SOX2靶基因JAGGED1沉默及鉴定 | 第40-41页 |
| 3.4.1 慢病毒感染沉默JAGGED1基因 | 第40页 |
| 3.4.2 JAGGED1沉默效果鉴定 | 第40-41页 |
| 3.5 JAGGED1对细胞增殖能力的影响 | 第41-45页 |
| 3.5.1 CCK8实验检测细胞增殖能力 | 第41-42页 |
| 3.5.2 EdU检测细胞增殖能力 | 第42-43页 |
| 3.5.3 流式细胞术检测细胞周期 | 第43-45页 |
| 第4章 讨论 | 第45-48页 |
| 第5章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 作者简介及攻读硕士期间的研究成果 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
