摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-23页 |
1.1 研究目的与意义 | 第12页 |
1.2 国内外研究进展 | 第12-22页 |
1.2.1 高等植物成花调控途径 | 第12-13页 |
1.2.2 成花调控途径 | 第13-17页 |
1.2.3 FT基因国内外研究进展 | 第17-20页 |
1.2.4 RNAi研究的回顾 | 第20页 |
1.2.5 RNAi的应用 | 第20-22页 |
1.3 技术路线 | 第22-23页 |
2 材料和方法 | 第23-38页 |
2.1 材料 | 第23-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第23页 |
2.1.2 细菌菌株和质粒载体 | 第23页 |
2.1.3 主要试剂和试剂盒 | 第23页 |
2.1.4 试验器材 | 第23-24页 |
2.1.5 引物合成 | 第24-25页 |
2.2 试验方法 | 第25-38页 |
2.2.1 构建植物表达载体应用的方法 | 第25-30页 |
2.2.2 植物表达载体的构建 | 第30-32页 |
2.2.3 重组质粒的农杆菌转化 | 第32-33页 |
2.2.4 建立遗传转化体系 | 第33-34页 |
2.2.5 抗性植株的筛选 | 第34页 |
2.2.6 抗性植株的鉴定 | 第34-35页 |
2.2.7 荧光定量PCR表达分析 | 第35-37页 |
2.2.8 转基因植株拟南芥的表型分析 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-56页 |
3.1 植物表达载体的构建与鉴定 | 第38-44页 |
3.1.1 Ac FT1、Ac LFT的克隆与鉴定 | 第38-39页 |
3.1.2 Ac FT1植物表达载体的鉴定 | 第39-42页 |
3.1.3 Ac LFT植物表达载体的鉴定 | 第42-44页 |
3.2 植物表达载体的农杆菌转化 | 第44-45页 |
3.3 洋葱Ac FT1及Ac LFT基因对拟南芥的遗传转化 | 第45-49页 |
3.3.1 转基因植株拟南芥T0代种子的获得 | 第45-46页 |
3.3.2 T1代转基因植株拟南芥的筛选 | 第46-47页 |
3.3.3 转基因植株的分子检测 | 第47-49页 |
3.4 荧光定量PCR检测转基因拟南芥Ac FT1及Ac LFT的表达水平 | 第49-50页 |
3.5 转基因植株拟南芥的表型分析及功能验证 | 第50-56页 |
3.5.1 转Ac FT1基因拟南芥植株的表型分析及功能验证 | 第50-52页 |
3.5.2 Ac LFT转基因植株拟南芥的表型分析及功能验证 | 第52-56页 |
4 讨论 | 第56-59页 |
4.1 AcFT1基因与Ac LFT1基因的功能分析 | 第56-57页 |
4.2 正义、反义及RNAi表达载体的构建 | 第57页 |
4.3 荧光定量PCR表达分析 | 第57-58页 |
4.4 下一步工作设想 | 第58-59页 |
5 结论 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
附录 | 第70-78页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第78页 |