摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
第一章 重编程细胞与其基因组稳定性的研究进展 | 第9-16页 |
1 iPS细胞基因组的稳定性 | 第10-13页 |
1.1 造成iPSC基因组不稳定性的原因 | 第11-13页 |
1.1.1 来自重编程因子的复制压力的影响 | 第11-12页 |
1.1.2 源于体细胞的遗传损伤 | 第12页 |
1.1.3 重编程因子与诱导条件的影响 | 第12-13页 |
2 iPS细胞基因组的稳定性维持 | 第13-14页 |
2.1 DNA双链断裂的修复 | 第13-14页 |
2.2 P53维持iPS细胞基因组完整性 | 第14页 |
3 iPSC未来展望 | 第14-16页 |
第二章 ATM基因在体细胞重编程过程中的作用及机制研究 | 第16-41页 |
1 引言 | 第16-19页 |
2 材料与方法 | 第19-27页 |
2.1 材料 | 第19-21页 |
2.1.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.2 实验设备 | 第19页 |
2.1.3 实验试剂与培养液 | 第19-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-27页 |
2.2.1 小鼠胚胎成纤维细胞获取与培养 | 第21页 |
2.2.2 饲养层制备 | 第21页 |
2.2.3 病毒包装、储存、感染与滴度检测 | 第21-22页 |
2.2.4 目的基因敲减与重编程细胞诱导 | 第22页 |
2.2.5 Western检测蛋白表达 | 第22-23页 |
2.2.6 细胞免疫荧光染色 | 第23页 |
2.2.7 定量PCR分析基因表达量 | 第23-24页 |
2.2.8 流式细胞仪分析、分选细胞 | 第24-25页 |
2.2.9 诱导多能性干细胞的三胚层分化 | 第25-27页 |
3 研究结果 | 第27-39页 |
3.1 筛选敲减后对重编程效率有影响的基因 | 第27-31页 |
3.2 敲减ATM后产生的iPS细胞克隆多能性及表观基因的表达检测 | 第31-34页 |
3.3 ATM敲减后会通过下调P53和γH2AX来提高重编程效率 | 第34-39页 |
4 讨论 | 第39-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
致谢 | 第47页 |