| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| 1.1 哺乳动物胚胎干细胞的培养液研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 小鼠胚胎干细胞培养液的发展 | 第12-13页 |
| 1.1.2 人胚胎干细胞培养液的发展 | 第13页 |
| 1.1.3 大鼠及NOD鼠胚胎干细胞的培养液发展 | 第13-14页 |
| 1.1.4 两种状态的胚胎干细胞转化中培养液的应用 | 第14页 |
| 1.2 猪多能性干细胞的培养液 | 第14-17页 |
| 1.2.1 猪胚胎干细胞培养液的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.2 猪诱导多能性干细胞培养液的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 我们所获得的猪胚胎干细胞培养液。 | 第17-18页 |
| 1.3.1 MXV培养液的产生 | 第17页 |
| 1.3.2 MXV培养液的应用 | 第17页 |
| 1.3.3 MXV培养液的不足 | 第17-18页 |
| 1.4 2i的作用机制和在胚胎干细胞中的应用 | 第18页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-28页 |
| 2.1 材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 实验动物和材料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要的仪器与设备 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第20页 |
| 2.1.4 常用试剂及配制 | 第20-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第23-24页 |
| 2.3 胚胎收集和细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.3.1 卵母细胞体外成熟培养 | 第24-25页 |
| 2.3.2 卵母细胞体外受精及胚胎培养 | 第25页 |
| 2.3.3 囊胚接种 | 第25页 |
| 2.3.4 猪类胚胎干细胞分离与培养 | 第25页 |
| 2.4 多能性鉴定 | 第25-26页 |
| 2.4.1 碱性磷酸酶染色 | 第25页 |
| 2.4.2 核型分析 | 第25-26页 |
| 2.4.3 免疫荧光鉴定 | 第26页 |
| 2.5 其它主要实验方法 | 第26-28页 |
| 2.5.1 单克隆形成率检测 | 第26页 |
| 2.5.2 反转录PCR和荧光定量PCR | 第26页 |
| 2.5.3 猪类胚胎干细胞转基因操作 | 第26页 |
| 2.5.4 数据统计 | 第26-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-37页 |
| 3.1 优化MXV培养液 | 第28-31页 |
| 3.1.1 MXV培养液中主要成分的简化 | 第28-30页 |
| 3.1.2 多能性检测 | 第30-31页 |
| 3.2 优化MXV培养液和小分子抑制剂对猪类胚胎干细胞建系效率的影响 | 第31-37页 |
| 3.2.1.优化培养液对猪类胚胎干细胞建系效率的影响 | 第31-32页 |
| 3.2.2 小分子抑制剂对猪类胚胎干细胞建系效率的影响 | 第32-33页 |
| 3.2.3 猪类胚胎干细胞系的形态特征 | 第33页 |
| 3.2.4 猪类胚胎干细胞系碱性磷酸酶检测和核型分析结果 | 第33-34页 |
| 3.2.5 猪类胚胎干细胞系多能性基因表达分析 | 第34-35页 |
| 3.2.6 猪类胚胎干细胞系的生长特性 | 第35-36页 |
| 3.2.7 猪类胚胎干细胞系所依赖的信号通路检测结果 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 4.1 优化MXV培养液主要成分 | 第37页 |
| 4.2 优化MXV培养液的基础培养液 | 第37-38页 |
| 4.3 优化培养液对猪类胚胎干细胞建系效率的影响 | 第38页 |
| 4.4 小分子对猪胚胎干细胞建系的影响 | 第38-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第47页 |
