| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 罗非鱼链球菌病的概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 链球菌病病原学 | 第12页 |
| 1.1.2 罗非鱼链球菌病的流行 | 第12-13页 |
| 1.1.3 罗非鱼链球菌病的症状和病理变化 | 第13页 |
| 1.1.4 罗非鱼链球菌病的致病机制 | 第13页 |
| 1.1.5 罗非鱼链球菌病的防治 | 第13-14页 |
| 1.2 鱼类免疫系统 | 第14-15页 |
| 1.2.1 鱼类的免疫器官 | 第14页 |
| 1.2.2 鱼类的免疫细胞 | 第14页 |
| 1.2.3 鱼类的免疫球蛋白 | 第14-15页 |
| 1.2.4 鱼类的细胞因子 | 第15页 |
| 1.3 影响免疫效果的因素 | 第15-16页 |
| 1.4 鱼类疫苗的免疫途径 | 第16页 |
| 1.5 灭活疫苗 | 第16-17页 |
| 1.6 荧光定量技术 | 第17-19页 |
| 1.6.1 荧光定量技术的方法 | 第17-18页 |
| 1.6.2 实时荧光定量PCR （qPCR）的定量方法 | 第18-19页 |
| 1.6.3 荧光定量技术的应用 | 第19页 |
| 1.6.4 实时荧光定量技术的优点 | 第19页 |
| 1.7 本研究目的与意义 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-34页 |
| 2.1 材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
| 2.1.4 实验所用溶液及其配制 | 第21-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-28页 |
| 2.2.1 菌种的活化及培养 | 第23-24页 |
| 2.2.2 革兰氏染色步骤 | 第24页 |
| 2.2.3 链球菌 16S rRNA的鉴定 | 第24-26页 |
| 2.2.4 生化鉴定 | 第26页 |
| 2.2.5 半数致死量(LD50)测定 | 第26页 |
| 2.2.6 盐析法提取免疫球蛋白和定量 | 第26-27页 |
| 2.2.7 疫苗的制备 | 第27页 |
| 2.2.8 疫苗的质量检测 | 第27页 |
| 2.2.9 抗血清的制备 | 第27页 |
| 2.2.10 免疫及抗血清的收集 | 第27-28页 |
| 2.3 酶联免疫吸附试验（ELISA） | 第28页 |
| 2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及蛋白质印迹法（Western blot） | 第28-30页 |
| 2.5 酶活的测定 | 第30-31页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR（qPCR） | 第31-33页 |
| 2.7 免疫保护实验 | 第33页 |
| 2.8 数据分析 | 第33-34页 |
| 3 结果 | 第34-55页 |
| 3.1 链球菌的培养和鉴定结果 | 第34-35页 |
| 3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹法（Western blot）结果 | 第35-37页 |
| 3.3 半数致死量测定结果 | 第37页 |
| 3.4 疫苗质量检测结果 | 第37页 |
| 3.4.1 无菌检测 | 第37页 |
| 3.4.2 安全性检测 | 第37页 |
| 3.5 抗体水平结果 | 第37-39页 |
| 3.6 酶活的测定结果 | 第39-44页 |
| 3.6.1 免疫对血清中酸性磷酸酶(ACP)含量的影响 | 第39-40页 |
| 3.6.2 免疫对血清中碱性磷酸酶(AKP)含量的影响 | 第40-41页 |
| 3.6.3 免疫对血清中超氧化物歧化酶（SOD）含量的影响 | 第41页 |
| 3.6.4 免疫对血清中溶菌酶（LZM）含量的影响 | 第41-44页 |
| 3.7 实时荧光定量PCR（qPCR）结果 | 第44-53页 |
| 3.7.1 免疫对IL-1 在头肾、后肾和脾脏中相对表达量的影响 | 第44-45页 |
| 3.7.2 免疫对Caspase 3 在头肾、后肾和脾脏中相对表达量的影响 | 第45-47页 |
| 3.7.3 免疫对TNF在头肾、后肾和脾脏中相对表达量的影响 | 第47-48页 |
| 3.7.4 免疫对IFN在头肾、后肾和脾脏中相对表达量的影响 | 第48-53页 |
| 3.8 疫苗的免疫保护试验结果 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 4.1 疫苗免疫对罗非鱼抗体水平的影响 | 第55页 |
| 4.2 疫苗免疫对罗非鱼血清中几种酶活力的影响 | 第55-56页 |
| 4.3 疫苗免疫对罗非鱼免疫相关细胞因子的影响 | 第56-57页 |
| 4.4 疫苗免疫对罗非鱼的免疫保护率 | 第57-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 研究生期间发表论文 | 第66页 |
