摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1.1 桑椹概述 | 第12页 |
1.2 类黄酮概述 | 第12-14页 |
1.2.1 类黄酮在植物中的分布 | 第12页 |
1.2.2 类黄酮结构 | 第12-13页 |
1.2.3 类黄酮生物学功能 | 第13-14页 |
1.3 植物花青素研究 | 第14页 |
1.4 类黄酮及花青素的测定方法研究进展 | 第14-15页 |
1.4.1 分光光度法 | 第14页 |
1.4.2 高效液相色谱法(HPLC) | 第14-15页 |
1.4.3 毛细管电泳法(CE) | 第15页 |
1.4.4 其它分析方法 | 第15页 |
1.5 类黄酮及花青素的生物合成途径 | 第15-16页 |
1.6 类黄酮 3-O-葡萄糖基转移酶基因(UF3GT)的研究进展 | 第16-17页 |
1.7 植物小分子化合物的糖基化与糖基化修饰 | 第17-20页 |
1.7.1 植物糖基转移酶的分类 | 第17-18页 |
1.7.2 植物次生代谢糖基转移酶的功能分析 | 第18-20页 |
第二章 引言 | 第20-22页 |
2.1 研究背景及意义 | 第20页 |
2.2 研究目的 | 第20页 |
2.3 主要研究内容 | 第20-21页 |
2.3.1 桑树MaUFGT基因组织表达分析 | 第20-21页 |
2.3.2 桑树MaUFGT2基因克隆与MaUFGT基因生物信息学分析 | 第21页 |
2.3.3 桑树MaUFGT2基因原核表达与功能分析 | 第21页 |
2.4 研究技术路线 | 第21-22页 |
第三章 桑树MaUFGT基因表达分析 | 第22-30页 |
3.1 供试材料及试剂 | 第22-23页 |
3.1.1 供试材料 | 第22页 |
3.1.2 主要试剂 | 第22页 |
3.1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
3.2 实验方法 | 第23-26页 |
3.2.1 桑树mRNA的提取及反转录为cDNA | 第23-25页 |
3.2.2 MaUFGT基因的定量PCR分析 | 第25-26页 |
3.3 结果与分析 | 第26-28页 |
3.3.1 MaUFGT基因在不同叶位(从顶芽向下)的表达分析 | 第26-27页 |
3.3.2 MaUFGT基因在不同组织的表达分析 | 第27页 |
3.3.3 MaUFGT基因在不同发育时期果实的表达分析 | 第27-28页 |
3.4 小结与讨论 | 第28-30页 |
第四章 桑树MaUFGT2基因克隆与MaUFGT基因生物信息学分析 | 第30-38页 |
4.1 材料与试剂 | 第30-32页 |
4.1.1 数据 | 第30页 |
4.1.2 实验材料 | 第30页 |
4.1.3 菌株和载体 | 第30页 |
4.1.4 主要软件 | 第30页 |
4.1.5 主要试剂及缓冲液 | 第30-31页 |
4.1.6 实验仪器与设备 | 第31-32页 |
4.2 实验方法 | 第32-34页 |
4.2.1 桑树MaUFGT基因家族成员鉴定 | 第32页 |
4.2.2 RNA的提取与检测 | 第32页 |
4.2.3 反转录合成cDNA第一链 | 第32页 |
4.2.4 桑树MaUFGT2基因的PCR扩增 | 第32页 |
4.2.5 PCR产物的回收、连接、转化与验证 | 第32-33页 |
4.2.6 桑树MaUFGT基因的生物信息学分析 | 第33-34页 |
4.3 结果与分析 | 第34-37页 |
4.3.1 桑树MaUFGT2基因的克隆 | 第34页 |
4.3.2 桑树类黄酮 3-O-葡萄糖基转移酶基因(MaUFGT)的鉴定及信息学分析 | 第34-35页 |
4.3.3 桑树类黄酮 3-O-葡萄糖基转移酶基因(MaUFGT)的进化分析 | 第35-37页 |
4.4 小结与讨论 | 第37-38页 |
第五章 桑树MaUFGT2基因原核表达与功能分析 | 第38-54页 |
5.1 材料和试剂 | 第38-41页 |
5.1.1 材料、菌株和载体 | 第38页 |
5.1.2 试剂和药品 | 第38-39页 |
5.1.3 主要仪器与设备 | 第39页 |
5.1.4 主要培养基与溶液 | 第39-41页 |
5.2 实验方法 | 第41-47页 |
5.2.1 MaUFGT2基因原核表达载体的构建 | 第41-43页 |
5.2.2 目的基因诱导表达 | 第43页 |
5.2.3 目的蛋白的SDS-PAGE分析 | 第43-45页 |
5.2.4 目的蛋白的分离纯化和复性 | 第45页 |
5.2.5 质谱鉴定及Western blot检测 | 第45-46页 |
5.2.6 桑树MaUFGT2蛋白体外酶活性测定 | 第46-47页 |
5.3 结果与分析 | 第47-51页 |
5.3.1 MaUFGT2基因的原核表达分析 | 第47页 |
5.3.2 重组蛋白的诱导表达 | 第47-48页 |
5.3.3 重组蛋白的纯化、质谱鉴定及Western blot检测 | 第48-50页 |
5.3.4 体外酶活反应的检测(HPLC) | 第50-51页 |
5.4 小结与讨论 | 第51-54页 |
第六章 全文总结 | 第54-56页 |
6.1 桑树MaUFGT基因在不同组织中的表达分析 | 第54页 |
6.2 桑树MaUFGT基因生物信息学分析及MaUFGT2基因克隆 | 第54页 |
6.3 桑树MaUFGT2基因原核表达与功能分析 | 第54-56页 |
论文创新点 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
硕士在读期间发表文章及参加课题情况 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |