| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 热应激 | 第12-13页 |
| 1.1.1 热应激的概念 | 第12页 |
| 1.1.2 热应激对畜牧生产的影响 | 第12-13页 |
| 1.2 热应激和卵母细胞 | 第13-15页 |
| 1.2.1 哺乳动物卵母细胞的发育 | 第13-14页 |
| 1.2.2 热应激对卵母细胞的损伤 | 第14-15页 |
| 1.3 热应激和线粒体 | 第15-18页 |
| 1.3.1 线粒体简介 | 第15-16页 |
| 1.3.2 mtDNA在卵母细胞的复制及其调节 | 第16-18页 |
| 1.3.3 线粒体在卵母细胞中的分布 | 第18页 |
| 1.3.4 热应激对卵母细胞中线粒体的影响 | 第18页 |
| 1.4 褪黑素 | 第18-20页 |
| 1.4.1 褪黑素的合成 | 第18-19页 |
| 1.4.2 影响褪黑素合成的因素 | 第19页 |
| 1.4.3 褪黑素的生理作用 | 第19-20页 |
| 1.5 本试验的研究意义 | 第20-22页 |
| 2.材料和方法 | 第22-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-27页 |
| 2.1.1 试验试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要配置溶液 | 第23-25页 |
| 2.1.3 试验仪器及耗材 | 第25-26页 |
| 2.1.4 引物 | 第26-27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-34页 |
| 2.2.1 猪卵母细胞的体外培养及孤雌激活 | 第27页 |
| 2.2.2 卵母细胞线粒体拷贝数的测定 | 第27-32页 |
| 2.2.3 Mitotracker染色 | 第32页 |
| 2.2.4 卵母细胞总RNA的提取，反转录和RT-PCR | 第32-34页 |
| 2.3 试验设计 | 第34-35页 |
| 2.3.1 热应激对猪卵母细胞体外发育的影响 | 第34页 |
| 2.3.2 热应激对猪卵母细胞拷贝数的影响 | 第34页 |
| 2.3.3 热应激对猪卵母细胞线粒体分布的影响 | 第34页 |
| 2.3.4 热应激对猪卵母细胞核编码线粒体基因表达的影响 | 第34页 |
| 2.3.5 热应激对猪卵母细胞线粒体基因表达的影响 | 第34-35页 |
| 2.4 数据分析 | 第35-36页 |
| 3.结果与分析 | 第36-44页 |
| 3.1 热应激对猪卵母细胞体外发育能力影响的分析 | 第36-37页 |
| 3.1.1 热应激对体外成熟猪卵母细胞卵裂率的影响 | 第36页 |
| 3.1.2 热应激对体外成熟猪卵母细胞囊胚率的影响 | 第36-37页 |
| 3.2 热应激对猪卵母细胞中线粒体拷贝数的影响 | 第37-41页 |
| 3.2.1 引物退火温度筛选 | 第37-38页 |
| 3.2.2 ND1基因的扩增 | 第38页 |
| 3.2.3 重组质粒菌体PCR | 第38-39页 |
| 3.2.4 标准曲线 | 第39-40页 |
| 3.2.5 猪卵母细胞线粒体拷贝数RT-PCR结果 | 第40-41页 |
| 3.3 猪MII期卵母细胞Mito-Tracker染色 | 第41-42页 |
| 3.4 核编码线粒体DNA拷贝数相关基因的表达 | 第42页 |
| 3.5 线粒体编码相关基因的表达 | 第42-44页 |
| 4.讨论 | 第44-48页 |
| 4.1 热应激温度的讨论 | 第44页 |
| 4.2 对GV期卵母细胞热应激的理论依据 | 第44-45页 |
| 4.3 褪黑素浓度的依据 | 第45页 |
| 4.4 热应激对猪卵母细胞成熟质量的影响分析 | 第45-46页 |
| 4.5 热应激对猪卵母细胞中线粒体的影响分析 | 第46-48页 |
| 4.5.1 热应激对猪卵母细胞中线粒体拷贝数的影响 | 第46页 |
| 4.5.2 热应激对猪卵母细胞中线粒体分布的影响 | 第46-47页 |
| 4.5.3 热应激对线粒体相关基因表达的影响 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
