| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-21页 |
| 1.1 小麦赤霉病研究概况 | 第10-11页 |
| 1.1.1 镰刀菌研究概述 | 第10页 |
| 1.1.2 小麦赤霉病 | 第10-11页 |
| 1.2 启动子概述 | 第11-14页 |
| 1.2.1 组成型启动子 | 第12-13页 |
| 1.2.2 组织特异型启动子 | 第13-14页 |
| 1.3 RNAi技术概述 | 第14-18页 |
| 1.3.1 RNAi技术特点 | 第14页 |
| 1.3.2 RNAi技术作用机制 | 第14-15页 |
| 1.3.3 RNAi技术的发展 | 第15-16页 |
| 1.3.4 RNAi技术在植物中的应用 | 第16-18页 |
| 1.4 本研究中所涉及的的基因 | 第18-20页 |
| 1.4.1 几丁质合成酶 | 第18-19页 |
| 1.4.2 蛋白激酶C | 第19页 |
| 1.4.3 葡聚糖合成酶 | 第19-20页 |
| 1.4.4 去甲基化酶 | 第20页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 实验材料和方法 | 第21-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 酶试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 基本培养基及试剂 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-30页 |
| 2.2.1 PCR扩增 | 第22-24页 |
| 2.2.1.1 Easy Taq酶扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.1.2 KOD-Plus高保真酶扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.1.3 农杆菌菌体PCR扩增 | 第24页 |
| 2.2.1.4 SOE-PCR扩增 | 第24页 |
| 2.2.2 T4 DNA连接酶连接目的片段和载体 | 第24页 |
| 2.2.3 粘性末端片段的补平反应 | 第24-25页 |
| 2.2.3.1 Klenow Fragment补平片段粘端 | 第24-25页 |
| 2.2.3.2 T4 DNA聚合酶补平片段粘端 | 第25页 |
| 2.2.4 Alealine Phosphatase（CIAP）的去磷酸反应 | 第25-26页 |
| 2.2.5 质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.2.5.1 试剂盒提取质粒DNA | 第26页 |
| 2.2.5.2 碱裂解法提取质粒DNA | 第26-27页 |
| 2.2.6 试剂盒回收DNA片段 | 第27页 |
| 2.2.7 感受态细胞制备及转化 | 第27-30页 |
| 2.2.7.1 大肠杆菌DH5α 热击感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.7.2 大肠杆菌DH5α 的热击转化 | 第28页 |
| 2.2.7.3 大肠杆菌XL1-Blue电转化感受态细胞的制备 | 第28页 |
| 2.2.7.4 大肠杆菌XL1-Blue感受态细胞的电击转化 | 第28-29页 |
| 2.2.7.5 根癌农杆菌GV3101 感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 2.2.7.6 根癌农杆菌GV3101 感受态细胞电击转化 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-46页 |
| 3.1 单启动子单终止子RNAi载体的构建 | 第30-32页 |
| 3.2 双启动子双终止子RNAi载体的构建 | 第32-42页 |
| 3.2.1 拟南芥农杆菌RNAi载体的构建 | 第32-34页 |
| 3.2.2 小麦农杆菌RNAi载体的构建 | 第34-42页 |
| 3.2.2.1 单、双RNAi片段双边界农杆菌RNAi载体的构建 | 第34-38页 |
| 3.2.2.2 多RNAi片段双边界农杆菌RNAi载体的构建 | 第38-40页 |
| 3.2.2.3 单边界农杆菌RNAi基础载体的构建 | 第40-42页 |
| 3.3 抗赤霉病菌RNAi载体转化根癌农杆菌GV3101 及鉴定 | 第42-44页 |
| 3.4 抗赤霉病菌RNAi载体总结 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 附录 | 第59页 |
