| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 研究问题由来 | 第11页 |
| 1.2 褐飞虱及昆虫诱导的植物防御 | 第11-13页 |
| 1.2.1 褐飞虱 | 第11-12页 |
| 1.2.2 褐飞虱的取食特性及危害 | 第12页 |
| 1.2.3 植物对昆虫诱导的防御 | 第12-13页 |
| 1.3 启动子的分类 | 第13-18页 |
| 1.3.1 诱导型启动子 | 第13-15页 |
| 1.3.1.1 物理因素诱导表达启动子 | 第14页 |
| 1.3.1.2 化学因素诱导表达启动子 | 第14-15页 |
| 1.3.1.3 生物因素诱导表达启动子 | 第15页 |
| 1.3.2 组成型启动子 | 第15-16页 |
| 1.3.3 组织特异型启动子 | 第16-17页 |
| 1.3.4 人工合成启动子 | 第17-18页 |
| 1.4 启动子在转基因作物中的研究及应用 | 第18页 |
| 1.5 启动子功能研究的技术与方法 | 第18-20页 |
| 1.5.1 候选目的基因的预测 | 第19页 |
| 1.5.2 诱导型启动子的分离克隆 | 第19页 |
| 1.5.3 启动子的生物信息学分析 | 第19页 |
| 1.5.4 表达谱验证及报告基因表达量检测 | 第19-20页 |
| 1.5.5 启动子顺式作用元件及转录因子的鉴定 | 第20页 |
| 1.5.5.1 启动子的缺失分析 | 第20页 |
| 1.5.5.2 EMSA试验 | 第20页 |
| 1.5.5.3 酵母单杂交技术 | 第20页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-34页 |
| 2.1 菌株材料 | 第21页 |
| 2.2 植物材料 | 第21页 |
| 2.3 实验试剂 | 第21页 |
| 2.4 候选基因的基本信息 | 第21-24页 |
| 2.4.1 P_(TG1)的基因信息 | 第22页 |
| 2.4.2 P_(TG2)的基因信息 | 第22页 |
| 2.4.3 P_(TG3)的基因信息 | 第22页 |
| 2.4.4 P_(TG4)的基因信息 | 第22-23页 |
| 2.4.5 P_(TG5)的基因信息 | 第23页 |
| 2.4.6 P_(RG1)的基因信息 | 第23页 |
| 2.4.7 P_(RG4)的基因信息 | 第23-24页 |
| 2.4.8 P_(RG6)的基因信息 | 第24页 |
| 2.5 验证候选基因的表达模式 | 第24-29页 |
| 2.5.1 RNA的抽提 | 第24页 |
| 2.5.2 RNA质量检测 | 第24-25页 |
| 2.5.3 cDNA的获得 | 第25-28页 |
| 2.5.4 Real-time PCR检测及数据分析 | 第28页 |
| 2.5.5 基因表达水平检测 | 第28-29页 |
| 2.6 启动子的克隆与植物表达载体构建 | 第29-30页 |
| 2.7 水稻的遗传转化 | 第30页 |
| 2.8 转基因植株的阳性检测 | 第30-31页 |
| 2.9 转基因植株的拷贝数检测 | 第31-32页 |
| 2.9.1 转基因植物基因组的获得及检测 | 第31-32页 |
| 2.9.2 地高辛法Sourthem杂交 | 第32页 |
| 2.10 阳性植株GUS活性的组织化学染色 | 第32-33页 |
| 2.11 转基因阳性植株的不同处理 | 第33-34页 |
| 3 结果分析 | 第34-50页 |
| 3.1 褐飞虱接种芯片数据结果 | 第34-35页 |
| 3.2 基因的全生育期表达谱结果 | 第35-38页 |
| 3.3 RNA模板抽提结果 | 第38-39页 |
| 3.4 基因的表达水平检测 | 第39-42页 |
| 3.5 水稻启动子的克隆与植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.6 部分转基因植株的阳性检测 | 第43页 |
| 3.7 检测转基因水稻外源基因拷贝数 | 第43-44页 |
| 3.8 筛选转基因阳性植株 | 第44页 |
| 3.9 转基因阳性植株的褐飞虱接种 | 第44-45页 |
| 3.10 褐飞虱接种及JA处理后GUS基因表达量的定量分析 | 第45-49页 |
| 3.11 转基因阳性植株处理前后GUS活性的组织化学分析 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-55页 |
| 4.1 褐飞虱诱导型启动子分析 | 第50-52页 |
| 4.2 JA诱导结果分析 | 第52页 |
| 4.3 组织化学染色分析 | 第52-53页 |
| 4.4 GUS报告基因 | 第53页 |
| 4.5 总结 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录1 植物表达载体示意图 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
