中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
缩略词 | 第9-10页 |
1 绪论 | 第10-18页 |
·引言 | 第10-11页 |
·研究背景及进展 | 第11-15页 |
·致病机制研究 | 第11-12页 |
·致病基因研究进展 | 第12-14页 |
·Mrd1 基因研究进展 | 第14页 |
·RNA 干扰技术应用 | 第14-15页 |
·研究目的 | 第15页 |
·研究内容及技术路线 | 第15-17页 |
·研究内容 | 第15-16页 |
·技术路线 | 第16-17页 |
·本研究创新之处 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-32页 |
·材料 | 第18-20页 |
·供试菌株和昆虫 | 第18页 |
·主要仪器设备 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·主要溶液配制 | 第19-20页 |
·获取MAMRD1 基因CDNA 全长及生物信息学分析 | 第20-22页 |
·引物设计 | 第20-21页 |
·Blast 在线比对 | 第21-22页 |
·一级结构分析 | 第22页 |
·二级结构分析 | 第22页 |
·进化树同源性分析 | 第22页 |
·构建干扰菌株 | 第22-26页 |
·EST 序列的获取 | 第22-23页 |
·酶切干扰载体(PDPB) | 第23页 |
·重组载体构建 | 第23-24页 |
·转化大肠杆菌 | 第24页 |
·转化绿僵菌 | 第24-25页 |
·筛选稳定的转化子及检测 | 第25-26页 |
·体外干扰效率检测 | 第26-28页 |
·分子功能验证 | 第28-29页 |
·生长特征分析 | 第29-30页 |
·菌落形态及菌丝分支模式 | 第29页 |
·体外生物量的测定 | 第29页 |
·产孢量 | 第29-30页 |
·孢子萌发率 | 第30页 |
·毒力分析 | 第30-32页 |
·生物测定 | 第30页 |
·体内菌丝观察 | 第30页 |
·体内菌丝生物量测定 | 第30页 |
·Mamrd1 基因表达量及体内干扰效率的检测 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-46页 |
·CDNA 的获取及生物信息学分析 | 第32-35页 |
·Blast 在线比对cDNA | 第32-33页 |
·一级结构分析 | 第33页 |
·二级结构分析 | 第33-34页 |
·进化树同源分析 | 第34-35页 |
·干扰菌株阳性克隆的筛选及验证 | 第35-37页 |
·EST 序列的获取及载体的双酶切 | 第35-36页 |
·转化子的检测 | 第36-37页 |
·体外干扰效率检测 | 第37-39页 |
·分子功能验证 | 第39-40页 |
·生长特性分析 | 第40-43页 |
·菌落及菌丝形态 | 第40-41页 |
·体外生物量测定 | 第41页 |
·产孢率 | 第41页 |
·孢子萌发率 | 第41-43页 |
·毒力分析 | 第43-46页 |
·生物测定 | 第44页 |
·体内菌丝观测 | 第44页 |
·体内菌丝生物量测定 | 第44-45页 |
·Mamrd1 表达量及体内干扰效率检测 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-51页 |
·RNAI 技术采用 | 第46页 |
·干扰效率的影响因素 | 第46-47页 |
·菌丝分支统计研究 | 第47-48页 |
·MAMRD1 影响生长和产孢的机制 | 第48页 |
·MAMRD1 影响致病的机制 | 第48-49页 |
·MRD1 基因的潜在价值 | 第49-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第57页 |