| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-14页 |
| 第一部分 组蛋白去乙酰化酶-2 (HDAC2)在慢性应激所致的C57BL/6J小鼠认知损伤中的作用机制探讨 | 第14-94页 |
| (一) HDAC2介导应激素Corticosteroid诱发的Neuro-2a细胞的功能损伤 | 第15-46页 |
| 材料和方法 | 第15-29页 |
| 一、材料 | 第15-22页 |
| 1. 实验细胞 | 第15页 |
| 2. 主要试剂及耗材 | 第15-17页 |
| 3. 主要抗体来源及浓度 | 第17-18页 |
| 4. 主要试剂配制方法 | 第18-21页 |
| 5. 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 二、方法 | 第22-28页 |
| 1. 细胞培养 | 第22页 |
| 2.药物配制 | 第22-23页 |
| 3. MTT方法选取最佳药物干预浓度 | 第23页 |
| 4. N2a 细胞 HDAC2-shRNA 沉默 | 第23-25页 |
| 5. N2a细胞药物干预 | 第25页 |
| 6. N2a细胞总蛋白提取 | 第25-26页 |
| 7. BCA~（Tm） Protein Assay Kit 测总蛋白浓度 | 第26页 |
| 8. SDS-PAGE 凝胶电泳及 Western Blot | 第26-28页 |
| 9. 细胞免疫荧光 | 第28页 |
| 三、统计学方法 | 第28-29页 |
| 结果 | 第29-43页 |
| 1. Corticosteroid 损伤 N2a 细胞活性 | 第29-30页 |
| 2. Corticosteroid损伤N2a细胞的形态 | 第30-31页 |
| 3. Corticosteroid损伤N2a细施的功能 | 第31-32页 |
| 4. Corticosteroid干预后上调了 HDAC2蛋白水平，同时下调了组蛋白H3K9的乙酰化水平 | 第32-35页 |
| 5. LV-shRJVA-mHdac2 有效性检测 | 第35-38页 |
| 6. HDAC2沉默改善N2a细胞病理学损伤 | 第38-39页 |
| 7. HDAC2沉默改善了 N2a细胞功能的机制探讨 | 第39-43页 |
| 讨论 | 第43-45页 |
| 小结 | 第45-46页 |
| (二) 组蛋白去乙酰化酶-2（HDAC2）参与到慢性束缚性应激所致的老年C57BL/6J小鼠的认知损伤中 | 第46-79页 |
| 材料和方法 | 第46-61页 |
| 一、材料 | 第46-53页 |
| 1.实验动物 | 第46页 |
| 2.主要试剂及耗材 | 第46-48页 |
| 3.主要抗体来源及浓度 | 第48-49页 |
| 4.主要设计配制方法 | 第49-52页 |
| 5. 主要仪器设备 | 第52-53页 |
| 二、方法 | 第53-60页 |
| 1. 实验动物 | 第53页 |
| 2. 慢性束缚性应激 | 第53-54页 |
| 3. 行为学实验 | 第54-57页 |
| 4.化组织蛋白提取 | 第57页 |
| 5. BCA~(TM) Pro化in Assay Kit测总蛋芭浓度 | 第57-58页 |
| 6. SDS-PAGE 凝胶电泳及 Western Blot | 第58-59页 |
| 7.血清 corticosteroid 水平检测 | 第59-60页 |
| 8.免疫荧光染色 | 第60页 |
| 三、统计学方法 | 第60-61页 |
| 结果 | 第61-76页 |
| 一. 慢性束缚性应激对小鼠行为学的影响 | 第61-67页 |
| 二. 慢性束缚性应激后小鼠的形态学改变 | 第67-68页 |
| 三、慢性束缚性应激后小鼠的血皮质酮升高 | 第68-69页 |
| 四、慢性应激上调海马HDAC2蛋白水平 | 第69-72页 |
| 五、慢性应激下调海马组蛋白乙酰化水平 | 第72页 |
| 六、慢性应激下海马区影响突触可塑性的相关分子蛋自表达改变 | 第72-74页 |
| 七、慢性应激下海马区立早基因水平的改变 | 第74页 |
| 八、下调的神经营养因子BDNF | 第74-76页 |
| 讨论 | 第76-78页 |
| 小结 | 第78-79页 |
| (三) C57BL/6J小鼠海马区HDAC2沉默后认知功能的改变 | 第79-94页 |
| 材料和方法 | 第79-83页 |
| 一、材料 | 第79-80页 |
| 1.实验动物 | 第79页 |
| 2.主要试剂及耗材 | 第79页 |
| 3.主要抗体来源及浓度 | 第79-80页 |
| 4.主要试剂及配置方法见（二）部分 | 第80页 |
| 5.主要仪器设备 | 第80页 |
| 二、方法 | 第80-81页 |
| 1. 实验动物 | 第80页 |
| 2. 海马区shRNA注射 | 第80-81页 |
| 3. 慢性束缚性应激 | 第81页 |
| 4. 行为学实验 | 第81页 |
| 5. 脑组织蛋白提取，详见（二）部分 | 第81页 |
| 6. BCA~（TM） Protein Assay Kit测总蛋白浓度，详见（二）部分 | 第81页 |
| 7. SDS-PAGE凝胶电泳及Western Blot,详见（二）部分 | 第81页 |
| 8.免疫荧光染色详见（二）部分 | 第81页 |
| 三、统计学方法 | 第81-83页 |
| 结果 | 第83-91页 |
| —、海马HDAC2-shRNA干预后可显著降低海马HDAC2的蛋白水平 | 第83-84页 |
| 二、HDAC2-shRNA干预后可部分改善小鼠的行为表现 | 第84-87页 |
| 三. 相关分子改变机制 | 第87-89页 |
| 四、HDAC2-shRNA海马区注射并未显著改善应激后小鼠的认知功能 | 第89-91页 |
| 讨论 | 第91-93页 |
| 小结 | 第93-94页 |
| 第二部分 HDAC2加速慢性应激下APP/PS1双转AD模型小鼠的认知功能损伤 | 第94-105页 |
| 材料和方法 | 第95-99页 |
| 结果 | 第99-103页 |
| 一. APP/PS1的鉴定 | 第99页 |
| 二、免疫组化染色显示APP/PSl小鼠脑郁老年斑形成 | 第99-100页 |
| 三、Morris水谜宮行为学改变 | 第100-101页 |
| 四. 海马区HDAC2蛋白水平的改变 | 第101-103页 |
| 讨论 | 第103-104页 |
| 小结 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-121页 |
| 综述 | 第121-131页 |
| 参考文献 | 第127-131页 |
| 结论和创新点 | 第131-132页 |
| 缩略词表 | 第132-133页 |
| 个人简介 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
