| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-12页 |
| 1.1 卤虫生物学 | 第8页 |
| 1.1.1 中国卤虫的特征及价值 | 第8页 |
| 1.1.2 卤虫的滞育 | 第8页 |
| 1.2 LEA蛋白研究概况 | 第8-10页 |
| 1.3 DRRB蛋白研究概况 | 第10-11页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第11-12页 |
| 2. 材料与方法 | 第12-26页 |
| 2.1 材料 | 第12-16页 |
| 2.1.1 中国卤虫样品准备 | 第12页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第12-16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16页 |
| 2.2 方法 | 第16-26页 |
| 2.2.1 总RNA提取 | 第16-17页 |
| 2.2.2 cDNA的制备 | 第17-18页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第18页 |
| 2.2.4 基因克隆 | 第18-20页 |
| 2.2.5 原核表达 | 第20页 |
| 2.2.6 蛋白纯化及包涵体复性 | 第20-22页 |
| 2.2.7 多克隆抗体制备 | 第22-24页 |
| 2.2.8 Western Blot | 第24页 |
| 2.2.9 免疫荧光双标 | 第24-25页 |
| 2.2.10 生物信息学分析工具 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-46页 |
| 3.1 基因全长及生物信息学分析 | 第26-29页 |
| 3.1.1 As-g1lea基因全长 | 第26-27页 |
| 3.1.2 As-g3lea基因全长 | 第27-28页 |
| 3.1.3 As-drrb基因全长 | 第28-29页 |
| 3.2 As-DRRB序列进化分析 | 第29-30页 |
| 3.3 荧光实时定量PCR实验结果 | 第30-34页 |
| 3.3.1 lea基因表达模式 | 第30-32页 |
| 3.3.2 As-drrb基因表达模式 | 第32-34页 |
| 3.4 蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备 | 第34-38页 |
| 3.4.1 As-G1LEA蛋白表达、纯化及ELISA | 第34-35页 |
| 3.4.2 As-G3LEA蛋白表达、纯化及ELISA | 第35-37页 |
| 3.4.3 As-DRRB蛋白表达、纯化、复性及ELISA | 第37-38页 |
| 3.5 WB分析AS-G1LEA、AS-G3LEA和AS-DRRB的蛋白表达模式 | 第38-42页 |
| 3.5.1 As-G1LEA和As-G3LEA在不同发育阶段的蛋白表达模式 | 第38-39页 |
| 3.5.2 As-G1LEA和As-G3LEA在低温胁迫下的蛋白表达模式 | 第39-40页 |
| 3.5.3 As-G1LEA和As-G3LEA在高盐胁迫下的蛋白表达模式 | 第40页 |
| 3.5.4 As-DRRB在不同发育阶段的蛋白表达模式 | 第40-41页 |
| 3.5.5 As-DRRB在低温胁迫下的蛋白表达模式 | 第41-42页 |
| 3.5.6 As-DRRB在高盐胁迫下的蛋白表达模式 | 第42页 |
| 3.6 AS-G1LEA、AS-G3LEA和AS-DRRB的免疫荧光分析 | 第42-46页 |
| 3.6.1 As-G1LEA的免疫荧光分析 | 第42-43页 |
| 3.6.2 As-G3LEA的免疫荧光分析 | 第43-44页 |
| 3.6.3 As-DRRB的免疫荧光分析 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 4.1 As-g1lea、As-g3lea和As-drrb基因全长及生物信息学分析 | 第46页 |
| 4.2 As-g1lea、As-g3lea和As-drrb的表达模式分析 | 第46-48页 |
| 4.3 AS-G1LEA、AS-G3LEA和AS-DRRB的蛋白纯化及多克隆抗体制备分析 | 第48页 |
| 4.4 As-G1LEA、As-G3LEA 和 As-DRRB 的亚细胞定位分析 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
