缩略语表 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-12页 |
英文摘要 | 第12-17页 |
前言 | 第18-21页 |
文献回顾 | 第21-43页 |
第一部分I/R对心肌线粒体功能蛋白Tom70/MICU1表达的影响 | 第43-56页 |
1 材料 | 第44-46页 |
1.1 实验动物 | 第44页 |
1.2 实验流程 | 第44-45页 |
1.3 主要实验仪器简介 | 第45页 |
1.4 主要实验试剂简介 | 第45-46页 |
2 方法 | 第46-50页 |
2.1 制备I/R小鼠心肌损伤模型 | 第46页 |
2.2 检测心肌线粒体的形态 | 第46-47页 |
2.3 检测心肌线粒体的各项功能 | 第47-48页 |
2.4 Western Blot检测心肌线粒体和心肌组织蛋白表达水平 | 第48-49页 |
2.5 统计学分析 | 第49-50页 |
3 结果 | 第50-53页 |
3.1 I/R损伤心肌线粒体形态结构 | 第50页 |
3.2 I/R损伤降低心肌线粒体功能 | 第50-51页 |
3.3 I/R损伤降低心肌线粒体MICU1蛋白表达 | 第51-52页 |
3.4 I/R损伤降低心肌线粒体Tom70蛋白表达 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-56页 |
第二部分 心肌线粒体功能蛋白MICU1对I/R损伤的影响及机制 | 第56-69页 |
1 材料 | 第56-58页 |
1.1 实验动物 | 第56页 |
1.2 实验流程 | 第56-57页 |
1.3 实验主要仪器的介绍 | 第57页 |
1.4 实验主要试剂的介绍 | 第57-58页 |
2 方法 | 第58-63页 |
2.1 建立心肌MICU1表达降低小鼠模型 | 第58页 |
2.2 制备MI/R小鼠模型 | 第58-59页 |
2.3 免疫荧光检测心肌MICU1蛋白表达 | 第59页 |
2.4 Western Blot检测心肌线粒体MICU1蛋白的表达水平 | 第59页 |
2.5 检测心肌组织的梗死面积大小 | 第59-60页 |
2.6 检测心肌组织凋亡水平 | 第60-63页 |
2.7 检测小鼠心脏功能 | 第63页 |
2.8 检测心肌线粒体形态 | 第63页 |
2.9 检测心肌线粒体各功能变化 | 第63页 |
2.10各项统计学分析 | 第63页 |
3 结果 | 第63-68页 |
3.1 成功建立MICU1蛋白表达降低的小鼠模型 | 第63-64页 |
3.2 MICU1表达降低增加I/R小鼠心肌梗死面积 | 第64-65页 |
3.3 MICU1表达降低增加I/R小鼠心脏功能抑制 | 第65-66页 |
3.4 MICU1表达降低增加I/R小鼠心肌凋亡水平 | 第66-67页 |
3.5 MICU1表达降低增加I/R心肌线粒体功能损伤 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-69页 |
第三部分Tom70对MI/R的影响及其与MICU1的关系 | 第69-78页 |
1 材料 | 第69-71页 |
1.1 实验动物 | 第69页 |
1.2 实验流程 | 第69-70页 |
1.3 实验主要试剂来源 | 第70-71页 |
2 方法 | 第71-73页 |
2.1 建立心肌Tom70表达下降小鼠模型 | 第71页 |
2.2 建立心肌Tom70表达增高小鼠模型 | 第71页 |
2.3 测定心肌线粒体Tom70蛋白表达情况 | 第71页 |
2.4 采用免疫组化方法测定心肌Tom70蛋白表达 | 第71-72页 |
2.5 测定心肌线粒体MICU1蛋白表达情况 | 第72页 |
2.6 测定Tom70和MICU1两种蛋白的相互作用 | 第72页 |
2.7 统计学数据分析 | 第72-73页 |
3 结果 | 第73-76页 |
3.1 成功建立Tom70表达降低的小鼠模型 | 第73-74页 |
3.2 成功建立Tom70表达升高的小鼠模型 | 第74页 |
3.3 Tom70表达降低小鼠下调MICU1蛋白表达 | 第74-75页 |
3.4 Tom70表达升高小鼠增加MICU1蛋白表达 | 第75-76页 |
3.5 验证Tom70和MICU1蛋白直接作用 | 第76页 |
4 讨论 | 第76-78页 |
第四部分Tom70是否通过调节线粒体MICU1减轻MI/R损伤 | 第78-90页 |
1 材料 | 第78-80页 |
1.1 实验动物 | 第78-79页 |
1.2 实验流程 | 第79-80页 |
1.3 实验主要试剂来源 | 第80页 |
2 方法 | 第80-81页 |
2.1 构建心肌Tom70表达降低的小鼠模型 | 第80页 |
2.2 构建心肌Tom70表达升高的小鼠模型 | 第80页 |
2.3 构建小鼠Tom70SP+MICU1siRNA模型 | 第80页 |
2.4 构建I/R心肌损伤小鼠模型 | 第80页 |
2.5 检测小鼠心脏功能 | 第80页 |
2.6 测定心肌细胞凋亡水平 | 第80页 |
2.7 测定心肌线粒体的结构形态 | 第80页 |
2.8 检测心肌线粒各项功能 | 第80页 |
2.9 统计学数据分析 | 第80-81页 |
3 结果 | 第81-88页 |
3.1 Tom70表达降低增加I/R小鼠心肌梗死面积 | 第81页 |
3.2 Tom70表达升高减小I/R心肌梗死面积 | 第81-83页 |
3.3 Tom70表达降低增加I/R后小鼠心脏功能抑制 | 第83页 |
3.4 Tom70表达升高改善I/R小鼠心脏功能 | 第83-84页 |
3.5 Tom70表达降低增加I/R小鼠心肌凋亡水平 | 第84-85页 |
3.6 Tom70表达升高降低I/R心肌凋亡水平 | 第85-86页 |
3.7 Tom70表达降低增加I/R心肌线粒体损伤 | 第86-87页 |
3.8 Tom70通过增加MICU1的转位减轻线粒体损伤 | 第87-88页 |
4 讨论 | 第88-90页 |
小结 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-110页 |
个人简历和研究成果 | 第110-112页 |
致谢 | 第112页 |