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人细小病毒B19类染色质结构调控基因组复制及RNA加工

致谢第4-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第1章 引言第13-27页
    1.1 人细小病毒B19概述第13页
    1.2 B19V病原学特性第13-21页
        1.2.1 B19V结构和基因组特点第13-15页
        1.2.2 B19V基因编码蛋白的功能第15-16页
            1.2.2.1 非结构蛋白NS1第15页
            1.2.2.2 衣壳蛋白(VP1/VP2)第15-16页
            1.2.2.3 11kDa蛋白和 7.5kDa蛋白第16页
        1.2.3 B19V生物学特性第16-17页
        1.2.4 B19V的流行病学第17页
        1.2.5 B19V的致病机制第17-18页
        1.2.6 B19V感染的临床表现第18-20页
            1.2.6.1 红细胞再生障碍性贫血第18页
            1.2.6.2 传染性红斑第18页
            1.2.6.3 关节病第18-19页
            1.2.6.4 肢端瘀斑综合征第19页
            1.2.6.5 血管性紫癜第19页
            1.2.6.6 孕妇感染B19V第19-20页
            1.2.6.7 其他疾病第20页
        1.2.7 B19V感染的诊断第20页
        1.2.8 治疗第20-21页
    1.3 染色质(体)第21-25页
        1.3.1 染色体与染色质第21-23页
            1.3.1.1 真核生物染色质结构第21-22页
            1.3.1.2 病毒染色质结构第22-23页
        1.3.2 染色质结构的功能第23-25页
            1.3.2.1 染色质结构与病毒感染第23页
            1.3.2.2 染色质结构与基因表达第23-24页
            1.3.2.3 染色质与mRNA可变剪切第24-25页
        1.3.3 细小病毒类染色质结构第25页
    1.4 研究目的和意义第25页
    1.5 本研究的主要内容第25-27页
第2章 材料与方法第27-51页
    2.1 材料第27页
        2.1.1 菌株、细胞系第27页
        2.1.2 质粒、载体第27页
    2.2 主要试剂第27-29页
    2.3 主要工作液的配制第29-37页
    2.4 主要仪器第37-38页
    2.5 主要实验方法第38-51页
        2.5.1 细胞培养第38页
        2.5.2 RNA酶保护实验相关质粒的制备第38-51页
第3章 实验结果第51-77页
    3.1 质粒的构建第51-61页
        3.1.1 核酸酶保护实验探针制备第51-52页
        3.1.2 B19V复制型质粒的构建第52-61页
    3.2 B19V基因组可以在HEK293T细胞内复制和转录第61-62页
        3.2.1 B19V基因组的制备第61页
        3.2.2 B19V感染性克隆可以在HEK293T细胞内复制和转录第61-62页
    3.3 B19V基因组可以在HEK293T细胞内形成类染色质结构第62-63页
    3.4 B19V基因组DNA类染色质结构形成早于复制第63-65页
    3.5 B19V基因组DNA存在甲基化位点第65-66页
    3.6 B19基因组DNA染色质状态调控基因的表达第66-70页
        3.6.1 MTT检测 5-Aza-2’-deoxycytidine(DAC)对细胞的毒性第66-68页
        3.6.2 DAC影响B19V类染色质结构的形成第68-69页
        3.6.3 DAC影响B19V基因组的复制第69-70页
    3.7 B19基因组DNA的复制间接影响(pA)p的使用第70-74页
        3.7.1 B19V复制通过影响内含子的剪切而影响(pA)p的使用第70-72页
        3.7.2 B19V复制间接影响(pA)p的使用第72-74页
    3.8 DAC影响B19V RNA的转录后加工第74-75页
    3.9 DAC影响B19V (pA)p的使用第75-77页
第4章 讨论与展望第77-82页
参考文献第82-97页
附录第97-99页
    附表1 本文所用的引物信息第97-99页
作者简历第99页

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