摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第11-24页 |
1.1 樟芝概述 | 第11-15页 |
1.1.1 樟芝的生物学特性 | 第11-12页 |
1.1.2 樟芝与灵芝的比较 | 第12页 |
1.1.3 樟芝的主要生物活性 | 第12-14页 |
1.1.4 樟芝的人工培养 | 第14-15页 |
1.1.5 樟芝无性孢子的发现及发酵应用 | 第15页 |
1.2 基因组学、转录组学及蛋白质组学概述 | 第15-18页 |
1.2.1 基因组学、转录组学及蛋白质组学简介 | 第15-16页 |
1.2.2 基因组学、转录组学及蛋白质组学相关技术 | 第16页 |
1.2.3 组学技术在丝状真菌中的应用 | 第16-18页 |
1.3 丝状真菌无性产孢的研究 | 第18-21页 |
1.3.1 丝状真菌无性繁殖过程简介 | 第18页 |
1.3.2 丝状真菌无性产孢分子机制研究进展 | 第18-21页 |
1.4 研究意义与主要研究内容 | 第21-24页 |
1.4.1 研究意义 | 第21-22页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第22-24页 |
第二章 无性孢子介导的樟芝高效循环发酵工艺 | 第24-40页 |
2.1 前言 | 第24-25页 |
2.2 实验材料 | 第25-26页 |
2.2.1 菌种 | 第25页 |
2.2.2 主要试剂 | 第25页 |
2.2.3 主要仪器 | 第25页 |
2.2.4 培养基 | 第25-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-29页 |
2.3.1 樟芝种子制备 | 第26页 |
2.3.2 樟芝深层发酵培养 | 第26页 |
2.3.3 孢子萌发率的检测 | 第26页 |
2.3.4 樟芝循环发酵工艺的建立 | 第26-27页 |
2.3.5 残糖含量的检测 | 第27页 |
2.3.6 生物量的检测 | 第27页 |
2.3.7 樟芝胞内多糖含量的检测 | 第27页 |
2.3.8 樟芝总三萜含量的检测 | 第27页 |
2.3.9 樟芝Antrodin A和Antrodin B含量的检测 | 第27页 |
2.3.10 樟芝循环发酵动力学分析 | 第27-28页 |
2.3.11 数据统计学分析 | 第28-29页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第29-38页 |
2.4.1 樟芝循环发酵工艺的建立 | 第29-32页 |
2.4.2 樟芝循环发酵工艺性能分析 | 第32-38页 |
2.5 本章小结 | 第38-40页 |
第三章 樟芝深层发酵无性产孢过程的分子机制研究 | 第40-65页 |
3.1 前言 | 第40页 |
3.2 实验材料 | 第40-42页 |
3.2.1 菌种 | 第40页 |
3.2.2 主要试剂 | 第40-41页 |
3.2.3 主要仪器 | 第41页 |
3.2.4 培养基 | 第41-42页 |
3.3 实验方法 | 第42-48页 |
3.3.1 樟芝种子制备及发酵培养 | 第42页 |
3.3.2 产孢量及生物量的检测 | 第42页 |
3.3.3 樟芝孢子样品的收集 | 第42页 |
3.3.4 樟芝菌丝体样品的收集 | 第42页 |
3.3.5 总蛋白提取及定量 | 第42-43页 |
3.3.6 2DE分析 | 第43-44页 |
3.3.7 MALDI-TOF/TOF质谱鉴定 | 第44-45页 |
3.3.8 总RNA提取及质量控制 | 第45页 |
3.3.9 RNA-seq测序 | 第45-46页 |
3.3.10 生物信息学分析 | 第46-47页 |
3.3.11 RT-qCPR分析 | 第47-48页 |
3.3.12 数据统计学分析 | 第48页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第48-63页 |
3.4.1 樟芝深层发酵产孢过程 | 第48页 |
3.4.2 2DE分析 | 第48-52页 |
3.4.3 RNA-seq分析 | 第52-57页 |
3.4.4 生物信息学分析 | 第57-61页 |
3.4.5 樟芝深层发酵无性产孢过程信号通路模型图 | 第61-62页 |
3.4.6 RT-qPCR分析 | 第62-63页 |
3.5 本章小结 | 第63-65页 |
第四章 营养限制诱导樟芝无性产孢的分子机制研究 | 第65-84页 |
4.1 前言 | 第65页 |
4.2 实验材料 | 第65-66页 |
4.2.1 菌种 | 第65页 |
4.2.2 主要试剂 | 第65-66页 |
4.2.3 主要仪器 | 第66页 |
4.2.4 培养基 | 第66页 |
4.3 实验方法 | 第66-68页 |
4.3.1 樟芝种子制备及发酵培养 | 第66页 |
4.3.2 检测方法 | 第66-67页 |
4.3.3 不同营养条件对樟芝无性产孢的影响 | 第67页 |
4.3.4 樟芝菌丝体样品的收集 | 第67页 |
4.3.5 总RNA提取及质量控制 | 第67页 |
4.3.6 RNA-seq测序 | 第67页 |
4.3.7 生物信息学分析 | 第67-68页 |
4.3.8 RT-qPCR分析 | 第68页 |
4.3.9 数据统计学分析 | 第68页 |
4.4 实验结果与讨论 | 第68-83页 |
4.4.1 发酵液主要成分的检测 | 第68-69页 |
4.4.2 不同营养条件对樟芝无性产孢的影响 | 第69-70页 |
4.4.3 RNA-seq测序分析 | 第70-79页 |
4.4.4 生物信息学分析 | 第79-81页 |
4.4.5 RT-qPCR分析 | 第81-82页 |
4.4.6 营养限制诱导樟芝无性产孢信号通路模型图 | 第82-83页 |
4.5 本章小结 | 第83-84页 |
第五章 Ca~(2+)诱导樟芝无性产孢的分子机制研究 | 第84-92页 |
5.1 前言 | 第84页 |
5.2 实验材料 | 第84-85页 |
5.2.1 菌种 | 第84页 |
5.2.2 主要试剂 | 第84页 |
5.2.3 主要仪器 | 第84页 |
5.2.4 培养基 | 第84-85页 |
5.3 实验方法 | 第85-86页 |
5.3.1 樟芝种子制备及发酵培养 | 第85页 |
5.3.2 产孢量及生物量的检测 | 第85页 |
5.3.3 不同浓度Ca~(2+)对樟芝无性产孢的影响 | 第85页 |
5.3.4 樟芝菌丝体样品的收集 | 第85页 |
5.3.5 总蛋白提取及定量 | 第85页 |
5.3.6 2DE分析 | 第85页 |
5.3.7 MALDI-TOF/TOF质谱鉴定 | 第85页 |
5.3.8 生物信息学分析 | 第85页 |
5.3.9 总RNA提取及质量控制 | 第85页 |
5.3.10 RT-qPCR分析 | 第85-86页 |
5.3.11 数据统计学分析 | 第86页 |
5.4 实验结果与讨论 | 第86-91页 |
5.4.1 樟芝深层发酵菌体生长及产孢过程 | 第86-87页 |
5.4.2 不同浓度Ca~(2+)对樟芝深层发酵无性产孢的影响 | 第87页 |
5.4.3 2DE分析及蛋白鉴定 | 第87-88页 |
5.4.4 生物信息学分析 | 第88页 |
5.4.5 RT-qPCR分析 | 第88-90页 |
5.4.6 Ca~(2+)诱导樟芝无性产信号通路模型图 | 第90-91页 |
5.5 本章小结 | 第91-92页 |
主要结论与展望 | 第92-95页 |
主要结论 | 第92-93页 |
课题展望 | 第93-95页 |
论文创新点 | 第95-97页 |
致谢 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-107页 |
附录1: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第107-108页 |
附录2: 2DE蛋白鉴定结果(104个点) | 第108-111页 |
附录3: 差异表达蛋白点在2DE样品中的表达量(104个) | 第111-114页 |
附录4: RNA-seq分析所得樟芝无性产孢相关基因 | 第114-116页 |
附录5: 樟芝无性产孢相关基因在RNA-Seq样品中的表达量 | 第116-118页 |
附录6: 2DE蛋白鉴定结果(28个点) | 第118页 |