摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 前言 | 第10-13页 |
第2章 实验材料与方法 | 第13-32页 |
2.1 实验材料 | 第13-15页 |
2.1.1 实验细胞系和菌种 | 第13页 |
2.1.2 实验组织样品及生物伦理声明 | 第13页 |
2.1.3 实验质粒构建 | 第13-15页 |
2.2 实验试剂 | 第15-21页 |
2.2.1 细胞培养相关试剂 | 第15-16页 |
2.2.2 质粒提取相关试剂 | 第16-18页 |
2.2.3 Western blotting相关试剂 | 第18-20页 |
2.2.4 RNA提取及RT-PCR相关试剂 | 第20-21页 |
2.3 实验仪器与设备 | 第21-22页 |
2.4 实验方法 | 第22-32页 |
2.4.1 转化 | 第22页 |
2.4.2 小提质粒 | 第22-23页 |
2.4.3 中提质粒 | 第23-24页 |
2.4.4 细胞培养 | 第24页 |
2.4.5 寡核苷酸,siRNA设计和瞬时转染 | 第24-25页 |
2.4.6 CCK-8细胞增殖试验 | 第25-26页 |
2.4.7 EdU(5-乙炔基-2'-脱氧尿苷)细胞标记测定 | 第26-27页 |
2.4.8 测量葡萄糖和乳酸浓度 | 第27页 |
2.4.9 RNA提取和实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第27-29页 |
2.4.10 蛋白质印迹分析(Western Blot) | 第29-31页 |
2.4.11 荧光素酶报告基因测定(Luciferase) | 第31-32页 |
第3章 实验结果 | 第32-51页 |
3.1 ZNRF3-AS1,let-7a,STAT3,hnRNP-A1和PKM2在体内的表达 | 第32页 |
3.2 PKM2促进乳腺癌细胞的有氧糖酵解和增殖 | 第32-36页 |
3.3 HnRNP-A1在乳腺癌细胞中PKM基因的选择性切割中起重要作用 | 第36-38页 |
3.4 STAT3通过调节hnRNP-A1转录进一步调节PKM2表达 | 第38-40页 |
3.5 Let-7a-5p通过调节STAT3的表达来调节乳腺癌细胞中的有氧糖酵解 | 第40-44页 |
3.6 HnRNP-A1抑制let-7a-5p成熟 | 第44-45页 |
3.7 STAT3促进ZNRF3-AS1的转录,ZNRF3-AS1吸附let-7a-5p,进而促进STAT3的表达 | 第45-51页 |
第4章 结论 | 第51-53页 |
第5章 讨论与展望 | 第53-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63-64页 |
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第64页 |