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Dordonia sp.菌属peh基因簇亚克隆表达及转运蛋白分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 文献综述第12-27页
    1.1 引言第12-13页
    1.2 DOP的结构及理化性质表第13-14页
        1.2.1 DOP的结构第13页
        1.2.2 DOP的理化性质第13-14页
    1.3 DOP在环境中的分布第14-16页
        1.3.1 DOP在水体中的分布第14页
        1.3.2 DOP在土壤中的分布第14-15页
        1.3.3 DOP在大气中的分布第15页
        1.3.4 DOP在生物体中的富集第15-16页
    1.4 DOP的毒性作用第16-18页
        1.4.1 DOP的致突变作用第16页
        1.4.2 DOP对肝脏、肾脏和神经系统的损伤第16-17页
        1.4.3 DOP对生殖发育和细胞的毒性第17-18页
    1.5 DOP在自然环境中的降解第18-21页
        1.5.1 DOP的水解作用第18页
        1.5.2 DOP的光解作用第18-19页
        1.5.3 DOP的真菌降解第19页
        1.5.4 DOP的细菌降解第19-21页
    1.6 DOP降解的相关基因第21-25页
        1.6.1 pht基因簇第22页
        1.6.2 pca基因簇第22-23页
        1.6.3 peh基因簇第23-24页
        1.6.4 ABC与MFS转运蛋白第24-25页
    1.7 本研究的目的与意义第25-27页
第二章 实验材料与方法第27-37页
    2.1 实验材料第27-29页
        2.1.1 主要试剂第27页
        2.1.2 主要器材第27-28页
        2.1.3 菌种与质粒第28页
        2.1.4 主要培养基第28页
        2.1.5 常用缓冲液第28-29页
    2.2 实验方法第29-37页
        2.2.1 基因组的提取第29-30页
        2.2.2 菌株HS-NH1分子鉴定第30页
        2.2.3 peh基因簇相关基因的扩增第30-31页
        2.2.4 peh基因簇的原核表达第31-32页
        2.2.5 牛血清蛋白和DOP标准曲线的构建第32-33页
        2.2.6 Peh催化活性的分析方法第33页
        2.2.7 ABC转运蛋白基因簇顺序的分析第33-34页
        2.2.8 ABC与MFS转运蛋白的敲除质粒的构建第34-35页
        2.2.9 电转化与筛选敲除突变株第35-36页
        2.2.10 缺失突变体△ABC与△MFS对PAE碳源利用能力分析第36-37页
第三章 结果与分析第37-52页
    3.1 戈登氏菌HS-NH1基因组的提取与PEHA/B的克隆第37-42页
    3.2 重组质粒PET-pehA与PET-pehB原核表达及SDS-PAGE分析第42-43页
    3.3 蛋白浓度与DOP和PA标准曲线的构建第43-45页
    3.4 PehA/B粗酶液活性分析第45-46页
    3.5 ABC转运蛋白基因簇PTR顺序检测及MFS/ABC转运蛋白基因敲除质粒构建第46-51页
    3.6 HS-NH1-△ABC与HS-NH1-△MFS对PAE碳源利用能力分析第51-52页
讨论第52-54页
参考文献第54-60页
硕士期间发表论文第60-61页
致谢第61页

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