摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-27页 |
1.1 引言 | 第12-13页 |
1.2 DOP的结构及理化性质表 | 第13-14页 |
1.2.1 DOP的结构 | 第13页 |
1.2.2 DOP的理化性质 | 第13-14页 |
1.3 DOP在环境中的分布 | 第14-16页 |
1.3.1 DOP在水体中的分布 | 第14页 |
1.3.2 DOP在土壤中的分布 | 第14-15页 |
1.3.3 DOP在大气中的分布 | 第15页 |
1.3.4 DOP在生物体中的富集 | 第15-16页 |
1.4 DOP的毒性作用 | 第16-18页 |
1.4.1 DOP的致突变作用 | 第16页 |
1.4.2 DOP对肝脏、肾脏和神经系统的损伤 | 第16-17页 |
1.4.3 DOP对生殖发育和细胞的毒性 | 第17-18页 |
1.5 DOP在自然环境中的降解 | 第18-21页 |
1.5.1 DOP的水解作用 | 第18页 |
1.5.2 DOP的光解作用 | 第18-19页 |
1.5.3 DOP的真菌降解 | 第19页 |
1.5.4 DOP的细菌降解 | 第19-21页 |
1.6 DOP降解的相关基因 | 第21-25页 |
1.6.1 pht基因簇 | 第22页 |
1.6.2 pca基因簇 | 第22-23页 |
1.6.3 peh基因簇 | 第23-24页 |
1.6.4 ABC与MFS转运蛋白 | 第24-25页 |
1.7 本研究的目的与意义 | 第25-27页 |
第二章 实验材料与方法 | 第27-37页 |
2.1 实验材料 | 第27-29页 |
2.1.1 主要试剂 | 第27页 |
2.1.2 主要器材 | 第27-28页 |
2.1.3 菌种与质粒 | 第28页 |
2.1.4 主要培养基 | 第28页 |
2.1.5 常用缓冲液 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-37页 |
2.2.1 基因组的提取 | 第29-30页 |
2.2.2 菌株HS-NH1分子鉴定 | 第30页 |
2.2.3 peh基因簇相关基因的扩增 | 第30-31页 |
2.2.4 peh基因簇的原核表达 | 第31-32页 |
2.2.5 牛血清蛋白和DOP标准曲线的构建 | 第32-33页 |
2.2.6 Peh催化活性的分析方法 | 第33页 |
2.2.7 ABC转运蛋白基因簇顺序的分析 | 第33-34页 |
2.2.8 ABC与MFS转运蛋白的敲除质粒的构建 | 第34-35页 |
2.2.9 电转化与筛选敲除突变株 | 第35-36页 |
2.2.10 缺失突变体△ABC与△MFS对PAE碳源利用能力分析 | 第36-37页 |
第三章 结果与分析 | 第37-52页 |
3.1 戈登氏菌HS-NH1基因组的提取与PEHA/B的克隆 | 第37-42页 |
3.2 重组质粒PET-pehA与PET-pehB原核表达及SDS-PAGE分析 | 第42-43页 |
3.3 蛋白浓度与DOP和PA标准曲线的构建 | 第43-45页 |
3.4 PehA/B粗酶液活性分析 | 第45-46页 |
3.5 ABC转运蛋白基因簇PTR顺序检测及MFS/ABC转运蛋白基因敲除质粒构建 | 第46-51页 |
3.6 HS-NH1-△ABC与HS-NH1-△MFS对PAE碳源利用能力分析 | 第51-52页 |
讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
硕士期间发表论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |