| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 前言 | 第9-23页 |
| 1.1 木聚糖概述 | 第9-10页 |
| 1.2 木聚糖酶简介 | 第10-16页 |
| 1.2.1 木聚糖酶的分类 | 第11-15页 |
| 1.2.2 木聚糖酶催化作用 | 第15-16页 |
| 1.3 木聚糖酶的分子结构区域 | 第16-17页 |
| 1.4 木聚糖酶的来源 | 第17-18页 |
| 1.5 木聚糖酶的酶活性 | 第18-19页 |
| 1.6 木聚糖酶分子克隆及基因工程 | 第19-20页 |
| 1.7 木聚糖酶的应用 | 第20-22页 |
| 1.7.1 饲料工业中的应用 | 第20页 |
| 1.7.2 造纸工业中的应用 | 第20-21页 |
| 1.7.3 食品工业中的应用 | 第21页 |
| 1.7.4 能源及环境保护方面的应用 | 第21-22页 |
| 1.8 本研究的内容、目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-33页 |
| 2.1 实验材料及设备 | 第23-25页 |
| 2.1.1 采样 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第23页 |
| 2.1.3 主要化学试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 主要试剂盒及工具酶 | 第23-24页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第24页 |
| 2.1.6 培养基 | 第24页 |
| 2.1.7 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.8 引物 | 第25页 |
| 2.2 土壤微生物宏基因组DNA的提取和纯化 | 第25-26页 |
| 2.3 16S rDNA测序及多样性分析 | 第26-27页 |
| 2.4 GH10、GH11家族木聚糖酶基因片段的测序及系统发育分析 | 第27页 |
| 2.4.1 基因片段的扩增、测序 | 第27页 |
| 2.4.2 基因片段的序列分析 | 第27页 |
| 2.4.3 GH10、GH11木聚糖酶基因系统发育分析 | 第27页 |
| 2.5 GH10、11木聚糖酶的多样性分析 | 第27-28页 |
| 2.6 GH10木聚糖酶基因xynH6的克隆 | 第28-30页 |
| 2.6.1 目标基因序列的选择 | 第28页 |
| 2.6.2 木聚糖酶全长序列的扩增 | 第28-30页 |
| 2.7 xynH6木聚糖酶基因的转化与表达方法 | 第30-33页 |
| 2.7.1 目的基因的扩增 | 第30页 |
| 2.7.2 目的基因的连接转化与鉴定 | 第30-32页 |
| 2.7.3 目的基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第32页 |
| 2.7.4 诱导表达蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第32页 |
| 2.7.5 木聚糖酶酶活检测 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-52页 |
| 3.1 土壤宏基因组DNA | 第33页 |
| 3.2 16S rDNA多样性 | 第33-39页 |
| 3.2.1 原始数据去除嵌合体及靶区域外序列 | 第33-34页 |
| 3.2.2 操作分类单元(OTU)分类 | 第34页 |
| 3.2.3 属水平群落结构分析 | 第34-36页 |
| 3.2.4 Alpha多样性分析 | 第36-39页 |
| 3.3 GH10家族木聚糖酶基因多样性分析 | 第39-43页 |
| 3.3.1 土壤中GH10木聚糖酶的序列分析 | 第39-40页 |
| 3.3.2 大兴安岭土壤环境中GH10木聚糖酶基因片段的系统发育分析 | 第40-42页 |
| 3.3.3 大兴安岭土壤环境中GH10木聚糖酶基因片段的丰度分析 | 第42-43页 |
| 3.4 GH11家族木聚糖酶基因多样性分析 | 第43-49页 |
| 3.4.1 土壤中GH11木聚糖酶的序列分析 | 第43-45页 |
| 3.4.2 大兴安岭土壤环境中GH11木聚糖酶基因片段的系统发育分析 | 第45-48页 |
| 3.4.3 大兴安岭土壤环境中GH11木聚糖酶基因片段的丰度分析 | 第48-49页 |
| 3.5 木聚糖酶基因的异源表达 | 第49-52页 |
| 3.5.1 木聚糖酶基因xynH6的扩增 | 第49-50页 |
| 3.5.2 木聚糖酶基因xynH6的克隆 | 第50页 |
| 3.5.3 木聚糖酶基因xynH6的诱导表达及其活性检测 | 第50-52页 |
| 4 讨论与结论 | 第52-55页 |
| 4.1 讨论 | 第52-53页 |
| 4.1.1 土壤微生物种类多样性 | 第52页 |
| 4.1.2 木聚糖酶基因来源多样性 | 第52-53页 |
| 4.2 结论 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 附录 | 第63-73页 |
| 作者简介 | 第73页 |
