| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-25页 |
| 1.1 猪流行性腹泻概述 | 第14-23页 |
| 1.1.1 PEDV病原学 | 第15页 |
| 1.1.2 PEDV的基因功能 | 第15-17页 |
| 1.1.3 PEDV流行病学 | 第17-18页 |
| 1.1.4 PEDV免疫与防治 | 第18-23页 |
| 1.2 实验目的和意义 | 第23-24页 |
| 1.3 技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 PEDV、TGEV和PRoV多重RT-PCR检测方法的建立及应用 | 第25-38页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 病毒 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-28页 |
| 2.2.1 引物设计与合成 | 第27页 |
| 2.2.3 多重RT-PCR反应条件的优化 | 第27-28页 |
| 2.2.4 多重RT-PCR的特异性、敏感性、重复性试验 | 第28页 |
| 2.2.5 临床应用 | 第28页 |
| 2.3 实验结果 | 第28-35页 |
| 2.3.1 重组质粒的鉴定结果 | 第28-29页 |
| 2.3.2 多重RT-PCR的建立 | 第29-31页 |
| 2.3.3 多重RT-PCR特异性分析 | 第31-32页 |
| 2.3.4 敏感性试验 | 第32-33页 |
| 2.3.5 重复性试验 | 第33-34页 |
| 2.3.6 临床样品检测 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 猪流行性腹泻强毒株和疫苗株多重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 | 第38-51页 |
| 3.1 材料 | 第39页 |
| 3.1.1 试验用病毒株 | 第39页 |
| 3.1.2 试剂及耗材 | 第39页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第39页 |
| 3.2 方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第39-40页 |
| 3.2.2 重组质粒标准品的构建 | 第40页 |
| 3.2.3 多重PCR反应条件的优化 | 第40-41页 |
| 3.2.4 特异性、敏感性和重复性试验 | 第41页 |
| 3.2.5 多重PCR的临床应用 | 第41页 |
| 3.3 结果 | 第41-49页 |
| 3.3.1 重组质粒标准品的构建 | 第41-42页 |
| 3.3.2 最佳退火温度的确定 | 第42-43页 |
| 3.3.3 最佳引物浓度的确定 | 第43-44页 |
| 3.3.4 三重RT-PCR反应条件的确定 | 第44-45页 |
| 3.3.5 特异性分析 | 第45页 |
| 3.3.6 敏感性分析 | 第45-47页 |
| 3.3.7 重复性实验 | 第47页 |
| 3.3.8 临床病料的检测 | 第47-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 附录一 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文情况 | 第62页 |
