英文缩略词表 | 第5-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一章 综述 | 第11-22页 |
1.1 人乳头瘤病毒概述 | 第11-16页 |
1.1.1 HPV感染与宫颈癌关系 | 第12-13页 |
1.1.2 HPV基因结构及功能 | 第13-14页 |
1.1.3 HPV早期蛋白E6/E7的功能及其分子机制 | 第14-16页 |
1.2 人乳头瘤病毒检测方法 | 第16-20页 |
1.2.1 病理、细胞学、组化检查 | 第16页 |
1.2.2 分子生物学方法检测HPV | 第16-19页 |
1.2.3 酶联免疫吸附分析技术检测HPV | 第19-20页 |
1.3 研究目的和内容 | 第20-22页 |
1.3.1 人乳头瘤病毒16型、18型E6蛋白重组质粒构建 | 第20页 |
1.3.2 人乳头瘤病毒16型、18型E6蛋白原核表达及纯化 | 第20页 |
1.3.3 人乳头瘤病毒18型E6蛋白单克隆抗体制备及鉴定 | 第20-22页 |
第二章 HPV16型、18型E6蛋白重组质粒构建 | 第22-29页 |
2.1 实验材料及方法 | 第22-26页 |
2.2 实验结果 | 第26-28页 |
2.2.1 PCR扩增HPV 16型、HPV 18型E6蛋白基因 | 第26页 |
2.2.2 阳性克隆的筛选 | 第26-28页 |
2.3 讨论 | 第28-29页 |
第三章 HPV16型、18型E6蛋白原核表达及纯化 | 第29-46页 |
3.1 实验材料及方法 | 第29-35页 |
3.2 实验结果 | 第35-43页 |
3.2.1 PET28a-16E6、PET28a-18E6蛋白表达 | 第35-36页 |
3.2.2 IPTG浓度对PET28a-18E6表达影响 | 第36-37页 |
3.2.3 时间对PET28a-18E6表达影响 | 第37页 |
3.2.4 温度对PET28a-18E6表达影响 | 第37-38页 |
3.2.5 PET28a-16E6蛋白、PET28a-18E6蛋白纯化 | 第38-39页 |
3.2.6 Western blotting分析PET28a-16E6蛋白、PET28a-18E6蛋白表达 | 第39页 |
3.2.7 IPTG浓度对PET32a-18E6表达影响 | 第39-40页 |
3.2.8 时间对PET32a-18E6表达影响 | 第40页 |
3.2.9 温度对PET32a-18E6表达影响 | 第40-41页 |
3.2.10 Western blotting分析PET32a-16E6蛋白、PET32a-18E6蛋白表达 | 第41-42页 |
3.2.11 包涵体蛋白复性 | 第42-43页 |
3.3 讨论 | 第43-46页 |
第四章 HPV16型、18型E6蛋白单克隆抗体制备及鉴定 | 第46-57页 |
4.1 实验材料及方法 | 第47-52页 |
4.2 实验结果 | 第52-56页 |
4.2.1 小鼠血清效价测定 | 第52-53页 |
4.2.2 单克隆筛选及克隆化 | 第53-54页 |
4.2.3 Western blotting鉴定单克隆抗体特异性 | 第54页 |
4.2.4 ELISA验证抗体特异性 | 第54-56页 |
4.3 讨论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录 | 第63-65页 |
攻读硕士期间发表文章和成果 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |