中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
英文缩略词表 | 第9-10页 |
第1章 绪论 | 第10-16页 |
1.1 SAMHD1蛋白的研究背景 | 第10-12页 |
1.1.1 SAMHD1蛋白的结构 | 第10页 |
1.1.2 SAMHD1与AGS疾病 | 第10-11页 |
1.1.3 天然抗病毒因子SAMHD1及其作用机制 | 第11-12页 |
1.2 转座子LINE-1 的研究背景 | 第12-14页 |
1.3 SAMHD1具有抑制LINE-1 转座活性的能力 | 第14-16页 |
第2章 材料与方法 | 第16-23页 |
2.1 试剂、材料和仪器 | 第16-19页 |
2.1.1 酶和抗体 | 第16页 |
2.1.2 主要试剂与材料 | 第16-17页 |
2.1.3 引物合成与测序 | 第17页 |
2.1.4 质粒与细胞 | 第17-18页 |
2.1.5 主要仪器 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 目的基因的PCR体系及反应条件 | 第19页 |
2.2.2 HEK293T细胞的复苏与培养 | 第19页 |
2.2.3 HEK293T细胞的传代 | 第19-20页 |
2.2.4 转染12孔板的HEK293T细胞 | 第20页 |
2.2.5 细胞荧光成像 | 第20-21页 |
2.2.6 HEK293T细胞的核质分离实验 | 第21页 |
2.2.7 Western blot | 第21页 |
2.2.8 流式细胞实验检测SAMHD1对LINE-1 转座活性的抑制作用 | 第21-23页 |
第3章 结果与讨论 | 第23-34页 |
3.1 不同SAMHD1的dNTP酶活性点突变抑制LINE-1 的能力有差异 | 第23-24页 |
3.2 SAMHD1对LINE-1 的抑制作用与核质分布有关 | 第24-26页 |
3.3 SAMHD1的AGS点突变核质分离实验 | 第26-27页 |
3.4 SAMHD1的结构域截短突变核质分离实验 | 第27-28页 |
3.5 构建SAMHD1的NLS突变表达质粒 | 第28-29页 |
3.6 SAMHD1的NLS突变增强了对LINE-1 的抑制作用 | 第29-31页 |
3.7 讨论 | 第31-33页 |
3.8 结论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-39页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第39-40页 |
致谢 | 第40页 |