| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-33页 |
| 1.1 植物免疫机制研究进展 | 第14-19页 |
| 1.1.1 植物免疫途径 | 第14-15页 |
| 1.1.2 拟南芥免疫机制 | 第15-17页 |
| 1.1.3 小麦抗条锈病研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2 微丝骨架 | 第19-25页 |
| 1.2.1 微丝骨架及肌动蛋白结合蛋白 | 第19-22页 |
| 1.2.2 微丝骨架Actin参与植物免疫过程 | 第22-25页 |
| 1.3 Actin功能研究进展 | 第25-27页 |
| 1.4 CAP功能研究进展 | 第27-28页 |
| 1.5 RIN4参与的植物免疫机制研究 | 第28-30页 |
| 1.6 ADF功能研究进展 | 第30-31页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 第二章 拟南芥ACT7互作蛋白的筛选及鉴定 | 第33-48页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 试验材料与试剂 | 第33-34页 |
| 2.2.1 材料 | 第33-34页 |
| 2.2.2 载体 | 第34页 |
| 2.2.3 试剂 | 第34页 |
| 2.3 试验方法 | 第34-39页 |
| 2.3.1 诱饵ACT7重组质粒构建与酵母菌转化 | 第34-35页 |
| 2.3.2 酵母蛋白提取及ACT7蛋白表达检测 | 第35-36页 |
| 2.3.3 ACT7自激活LexA系统能力检测 | 第36页 |
| 2.3.4 文库cDNA转化酵母及阳性克隆筛选 | 第36-37页 |
| 2.3.5 酵母阳性克隆质粒提取与测序 | 第37页 |
| 2.3.6 感兴趣互作酵母双杂交验证 | 第37页 |
| 2.3.7 免疫共沉淀蛋白互作验证 | 第37-39页 |
| 2.3.8 Western blot蛋白检测 | 第39页 |
| 2.4 结果与分析 | 第39-46页 |
| 2.4.1 酵母蛋白提取及ACT7蛋白表达检测 | 第39-40页 |
| 2.4.2 ACT7自身激活LexA系统能力检测 | 第40-41页 |
| 2.4.3 ACT7互作蛋白初步筛选 | 第41-43页 |
| 2.4.4 ACT7与CAP1相互作用 | 第43-44页 |
| 2.4.5 ACT7与RIN4相互作用 | 第44-45页 |
| 2.4.6 ACT7、CAP1与RIN4蛋白互作 | 第45-46页 |
| 2.5 讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 拟南芥ACT7和CAP1在免疫过程中的功能研究 | 第48-73页 |
| 3.1 引言 | 第48页 |
| 3.2 试验材料与试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第48页 |
| 3.2.2 试验试剂 | 第48-49页 |
| 3.3 试验方法 | 第49-58页 |
| 3.3.1 ACT7和CAP1拟南芥突变体纯合子的筛选与鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3.2 ACT7和CAP1拟南芥突变体纯合子基因沉默效率检测 | 第50-52页 |
| 3.3.3 ACT7和CAP1纯合突变体接种病原细菌及病害表型鉴定 | 第52-53页 |
| 3.3.4 act7-2 和cap1突变体的HR反应 | 第53页 |
| 3.3.5 flg22诱导MAPK积累检测 | 第53-54页 |
| 3.3.6 AvrRpm1诱导RIN4蛋白在act7-2 和cap1突变体中积累检测 | 第54-55页 |
| 3.3.7 AvrRpm1诱导RIN4蛋白在act7-2 和cap1突变体中磷酸化检测 | 第55-57页 |
| 3.3.8 免疫相关基因在act7-2 和cap1突变体中的表达检测 | 第57-58页 |
| 3.4 结果与分析 | 第58-69页 |
| 3.4.1 ACT7和CAP1拟南芥纯合突变体筛选与鉴定 | 第58-59页 |
| 3.4.2 ACT7和CAP1对病原细菌生长的影响 | 第59-61页 |
| 3.4.3 CAP1促进AvrRpm1诱发的拟南芥HR反应 | 第61-63页 |
| 3.4.4 ACT7和CAP1参与flg22诱导的MAPK信号途径 | 第63-65页 |
| 3.4.5 RIN4蛋白在act7-2 和cap1突变体中的积累与磷酸化 | 第65-67页 |
| 3.4.6 ACT7和CAP1参与SA和JA信号传导 | 第67-69页 |
| 3.5 讨论 | 第69-73页 |
| 第四章 小麦ADF4在小麦与条锈菌互作中的作用研究 | 第73-106页 |
| 4.1 引言 | 第73-74页 |
| 4.2 试验材料与试剂 | 第74-75页 |
| 4.2.1 试验菌株及植物材料 | 第74页 |
| 4.2.2 载体 | 第74页 |
| 4.2.3 试剂 | 第74-75页 |
| 4.3 试验方法 | 第75-86页 |
| 4.3.1 TaADFs和TaACT1基因克隆与测序 | 第75-76页 |
| 4.3.2 TaADF4功能结构域，进化关系分析及ADFs蛋白三维结构模型建立 | 第76-77页 |
| 4.3.3 ADFs与actin酵母双杂交实验 | 第77-78页 |
| 4.3.4 ADFs与actin免疫共沉淀实验 | 第78页 |
| 4.3.5 TaADF4与TaACT1荧光标记及微丝骨架激光共聚焦观察 | 第78-79页 |
| 4.3.6 CPK3磷酸化TaADF4实验 | 第79-81页 |
| 4.3.7 TaADF4组织分布及生物胁迫与非生物胁迫诱导表达检测 | 第81-82页 |
| 4.3.8 微丝解聚处理及条锈菌接种 | 第82-83页 |
| 4.3.9 组织学观察 | 第83页 |
| 4.3.10 VIGS诱导的TaADF4基因沉默及病害表型鉴定 | 第83-86页 |
| 4.3.11 液相串联质谱对SA和JA大分子积累检测 | 第86页 |
| 4.4 结果与分析 | 第86-102页 |
| 4.4.1 小麦ADFs基因克隆 | 第86-87页 |
| 4.4.2 TaADF4序列、结构功能域及进化关系分析 | 第87-88页 |
| 4.4.3 ADFs与actins蛋白相互作用 | 第88-90页 |
| 4.4.4 TaADFs与TaACT1特异性互作 | 第90-91页 |
| 4.4.5 TaADF4与TaACT1共定位于微丝骨架 | 第91-94页 |
| 4.4.6 CPK3磷酸化ADF4 | 第94-95页 |
| 4.4.7 TaADF4表达模式及非生物胁迫表达分析 | 第95-96页 |
| 4.4.8 MeJA和条锈菌CYR23诱导TaADF4上调表达 | 第96-97页 |
| 4.4.9 TaADF4积极调控小麦抵抗条锈菌侵染过程 | 第97-99页 |
| 4.4.10 TaADF4促进JA积累 | 第99-100页 |
| 4.4.11 微丝骨架解聚条锈菌侵染的组织学分析 | 第100-102页 |
| 4.5 讨论 | 第102-106页 |
| 第五章 结论与创新点 | 第106-108页 |
| 5.1 结论 | 第106-107页 |
| 5.2 创新点 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-121页 |
| 附录 | 第121-123页 |
| 致谢 | 第123-125页 |
| 个人简介 | 第125-126页 |
