| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 抗菌肽研究概况 | 第14-25页 |
| 1. 昆虫抗菌肽研究概况 | 第15-18页 |
| ·昆虫抗菌肽的分布及特点 | 第15页 |
| ·昆虫抗菌肽的分类 | 第15-16页 |
| ·蜜蜂及蜂王浆来源的抗菌肽 | 第16-18页 |
| 2. 抗菌肽的特性及分类 | 第18-21页 |
| ·抗菌肽的特性 | 第18页 |
| ·抗菌肽的分类 | 第18-21页 |
| 3. 抗菌肽的作用机理 | 第21-23页 |
| ·孔洞学说 | 第21页 |
| ·形成细胞膜电势依赖性通道(voltage-dependent channel) | 第21页 |
| ·"地毯"模型 | 第21-22页 |
| ·抑制细胞呼吸作用 | 第22页 |
| ·抑制细胞外膜蛋白的合成 | 第22页 |
| ·抑制细胞壁的形成 | 第22-23页 |
| 4. 抗菌肽的应用前景 | 第23-25页 |
| ·抗菌肽在食品行业中的应用 | 第23页 |
| ·抗菌肽在医药行业的应用 | 第23-24页 |
| ·抗菌肽农业及畜牧业中的应用 | 第24-25页 |
| 第二章 本研究的目的、意义及技术路线 | 第25-28页 |
| 1. 本研究目的和意义 | 第25-26页 |
| 2. 研究内容 | 第26页 |
| 3. 技术路线 | 第26-28页 |
| 第三章 AccRoyalisin原核表达及表达产物纯化 | 第28-37页 |
| 1. 材料和试剂 | 第28-30页 |
| 2. 方法 | 第30-32页 |
| ·重组AccRoyalisin的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·重组表达产物AccRoyalisin的纯化 | 第31-32页 |
| ·重组表达产物AccRoyalisin定量测定 | 第32页 |
| 3. 结果 | 第32-35页 |
| ·重组AccRoyalisin的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·AccRoyalisin重组表达产物的纯化 | 第33-34页 |
| ·AccRoyalisin重组表达产物产量测定 | 第34-35页 |
| 4. 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 原核表达产物AccRoyalisin的抑菌活性研究 | 第37-46页 |
| 1. 材料和试剂 | 第37-38页 |
| 2. 方法 | 第38-40页 |
| ·抑菌谱检测 | 第38页 |
| ·热稳定性分析 | 第38-39页 |
| ·酶标仪法检测最低抑制浓度(MIC) | 第39页 |
| ·透射电镜观察样品制备 | 第39-40页 |
| 3. 结果 | 第40-44页 |
| ·抑菌谱分析 | 第40页 |
| ·抑菌活性分析 | 第40-42页 |
| ·热稳定性 | 第42页 |
| ·最低抑制浓度MIC测定 | 第42-43页 |
| ·抑菌机理研究 | 第43-44页 |
| 4. 讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 原核表达产物多克隆抗体制备 | 第46-52页 |
| 1. 研究材料 | 第46-47页 |
| 2. 方法 | 第47-49页 |
| ·抗原准备 | 第47-48页 |
| ·多克隆抗体制备 | 第48页 |
| ·多克隆抗体效价测定 | 第48-49页 |
| ·蜂王浆中抗菌肽的定性测定 | 第49页 |
| 3. 结果 | 第49-51页 |
| ·多克隆抗体效价测定 | 第49-50页 |
| ·蜂王浆中抗菌肽定性测定 | 第50-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-52页 |
| 第六章 AccRoyalisin真核表达系统构建 | 第52-62页 |
| 1 材料和试剂 | 第52-53页 |
| 2. 方法 | 第53-58页 |
| ·引物设计及PCR扩增目的片段 | 第53-55页 |
| ·重组表达质粒pPIC9k的构建 | 第55-58页 |
| 3. 结果 | 第58-60页 |
| ·目的片段的获得 | 第58-59页 |
| ·目的片段序列测定 | 第59-60页 |
| ·重组表达质粒pPIC9k的构建及阳性酵母重组子的鉴定 | 第60页 |
| 4. 讨论 | 第60-62页 |
| 第七章 AccRoyalisin真核表达及产物抑菌活性 | 第62-70页 |
| 1. 材料和试剂 | 第62-63页 |
| 2. 方法 | 第63-65页 |
| ·阳性克隆诱导表达 | 第63-64页 |
| ·重组表达产物AccRoyalisin的纯化 | 第64页 |
| ·重组表达产物AccRoyalisin Western blot分析 | 第64-65页 |
| ·抑菌谱研究 | 第65页 |
| ·酶标仪法测最低抑制浓度(MIC) | 第65页 |
| 3. 结果 | 第65-68页 |
| ·表达产物SDS-PAGE分析 | 第65-66页 |
| ·重组表达产物AccRoyalisin的纯化及SDS-PAGE分析 | 第66-67页 |
| ·重组表达产物AccRoyalisin的Western blot分析 | 第67页 |
| ·抑菌谱研究 | 第67页 |
| ·最低抑制(MIC)浓度测定 | 第67-68页 |
| 4. 讨论 | 第68-70页 |
| 第八章 主要结论及展望 | 第70-72页 |
| 1. 主要创新点 | 第70页 |
| 2. 本研究的主要结果 | 第70页 |
| 3. 今后研究方向 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读硕士学位期间论文及专利发表情况 | 第79页 |
