摘要 | 第7-9页 |
前言 | 第9-10页 |
文献综述 | 第10-24页 |
1 黑色素细胞的研究概述 | 第10-16页 |
1.1 黑色素细胞的起源 | 第10-13页 |
1.2 黑色素细胞的分类 | 第13-16页 |
2 黑色素的研究概述 | 第16-19页 |
2.1 黑色素的分类 | 第16-17页 |
2.2 黑色素的合成 | 第17-19页 |
3 G蛋白偶联信号系统的基本结构 | 第19-20页 |
4 MC1R/Gαs信号通路的结构及功能 | 第20-21页 |
4.1 MC1R基因结构 | 第20页 |
4.2 MC1R/Gαs信号通路的功能 | 第20-21页 |
5 内皮素/Gαq信号通路的结构及功能 | 第21-24页 |
5.1 内皮素的基本结构 | 第21-22页 |
5.2 内皮素/Gαq信号通路的功能 | 第22-24页 |
材料与方法 | 第24-35页 |
1 试验材料 | 第24-27页 |
1.1 试验动物及取材 | 第24页 |
1.2 主要仪器 | 第24页 |
1.3 主要试剂 | 第24-25页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第25-27页 |
2 试验方法 | 第27-35页 |
2.1 Gnα11和Gnαs基因部分序列的克隆及分析 | 第27-29页 |
2.1.1 皮肤组织总RNA的提取及反转录合成cDNA | 第27页 |
2.1.2 PCR引物的设计与合成 | 第27-28页 |
2.1.3 PCR产物的扩增 | 第28-29页 |
2.2 QRT-PCR反应 | 第29-30页 |
2.2.1 QRT-PCR引物的设计 | 第29-30页 |
2.2.2 QRT-PCR反应体系的建立 | 第30页 |
2.2.3 QRT-PCR数据分析 | 第30页 |
2.3 Western blotting | 第30-32页 |
2.3.1 绵羊皮肤组织总蛋白的提取 | 第30页 |
2.3.2 蛋白含量的测定 | 第30页 |
2.3.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30-31页 |
2.3.4 转膜 | 第31-32页 |
2.3.5 杂交 | 第32页 |
2.3.6 显色 | 第32页 |
2.3.7 Western blotting图像分析及数据处理 | 第32页 |
2.4 Gnα11和Gnαs蛋白的定位 | 第32-35页 |
2.4.1 石蜡切片的制备 | 第32-33页 |
2.4.2 免疫组织化学 | 第33-34页 |
2.4.3 免疫荧光技术 | 第34-35页 |
结果与分析 | 第35-44页 |
1 绵羊Gnα11和Gnαs基因部分序列的克隆及分析结果 | 第35-37页 |
1.1 总RNA的检测结果 | 第35页 |
1.2 RT-PCR的扩增产物电泳结果 | 第35-36页 |
1.3 RT-PCR扩增产物的测序结果 | 第36-37页 |
2 Gnα11和Gnαs在不同毛色绵羊皮肤组织中的基因表达结果 | 第37-39页 |
2.1 Gnα11和Gnαs基因的扩增动力学曲线和溶解曲线 | 第37-39页 |
2.2 Gnα11和Gnαs基因在不同毛色绵羊皮肤中的表达结果 | 第39页 |
3 Gnα11和Gnαs在不同毛色绵羊皮肤组织中的蛋白表达结果 | 第39-41页 |
4 Gnα11和Gnαs在不同毛色绵羊皮肤组织中的蛋白定位结果 | 第41-44页 |
4.1 免疫组织化学定位结果 | 第41-43页 |
4.2 免疫荧光技术定位结果 | 第43-44页 |
讨论 | 第44-47页 |
1 Gnα11在不同毛色绵羊皮肤组织中的表达差异 | 第44-45页 |
2 Gnαs在不同毛色绵羊皮肤组织中的表达差异 | 第45-46页 |
3 Gnα11和Gnαs在绵羊皮肤组织中的表达定位 | 第46-47页 |
全文总结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
ABSTRACT | 第55-56页 |
致谢 | 第57页 |