| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第一章 综述 | 第18-26页 |
| 1.1 糖尿病 | 第18页 |
| 1.2 PTPs概述 | 第18-19页 |
| 1.3 PTP1B及其与Ⅱ型糖尿病的关系 | 第19-21页 |
| 1.3.1 PTP1B的结构特征 | 第19-21页 |
| 1.3.2 PTP1B与Ⅱ型糖尿病的关系 | 第21页 |
| 1.4 金属配合物抑制PTP1B活性 | 第21-23页 |
| 1.4.1 钒配合物抑制PTP1B活性 | 第21-22页 |
| 1.4.2 锌配合物抑制PTP1B活性 | 第22-23页 |
| 1.5 本论文的设计思路 | 第23-26页 |
| 1.5.1 设计思路 | 第23-24页 |
| 1.5.1.1 钒配合物选择性抑制PTP1B及其细胞效应研究 | 第23-24页 |
| 1.5.1.2 锌配合物选择性抑制PTP1B活性的研究 | 第24页 |
| 1.5.2 本论文的创新点 | 第24-26页 |
| 第二章 钒配合物选择性抑制细胞内PTP1B活性的研究 | 第26-40页 |
| 2.1 实验原理 | 第26-27页 |
| 2.2 实验试剂及仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第28页 |
| 2.3 实验内容 | 第28-34页 |
| 2.3.1 溶液配制 | 第28-30页 |
| 2.3.2 培养细胞提取蛋白 | 第30-32页 |
| 2.3.2.1 培养细胞 | 第30页 |
| 2.3.2.2 加药 | 第30-31页 |
| 2.3.2.3 收集细胞并裂解 | 第31页 |
| 2.3.2.4 BCA法测定蛋白浓度 | 第31-32页 |
| 2.3.3 蛋白免疫印迹 | 第32-34页 |
| 2.3.3.1 电泳 | 第32-33页 |
| 2.3.3.2 转膜 | 第33页 |
| 2.3.3.3 丽春红染色 | 第33页 |
| 2.3.3.4 封闭 | 第33页 |
| 2.3.3.5 抗体孵育 | 第33页 |
| 2.3.3.6 ECL化学发光法显影曝光 | 第33-34页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第34-38页 |
| 2.4.1 钒配合物1和3选择性抑制MCF7细胞内PTP1B活性的研究 | 第34-36页 |
| 2.4.2 钒配合物1和3选择性抑制HepG2细胞内PTP1B活性的研究 | 第36-38页 |
| 2.5 小结 | 第38-40页 |
| 第三章 钒配合物的细胞效应研究 | 第40-50页 |
| 3.1 实验原理 | 第40-41页 |
| 3.1.1 细胞活力检测法 | 第40页 |
| 3.1.2 细胞凋亡分析法 | 第40-41页 |
| 3.1.3 ICP-MS分析法 | 第41页 |
| 3.2 实验试剂及仪器 | 第41页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第41页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第41页 |
| 3.3 实验内容 | 第41-43页 |
| 3.3.1 溶液配制 | 第41-42页 |
| 3.3.2 细胞培养 | 第42页 |
| 3.3.3 钒配合物对细胞活力的研究 | 第42页 |
| 3.3.3.1 MTT比色法研究钒配合物对细胞活力的影响 | 第42页 |
| 3.3.3.2 细胞形态观察法研究钒配合物对细胞活力的影响 | 第42页 |
| 3.3.4 钒配合物对细胞凋亡的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.5 ICP-MS测定细胞中钒的含量 | 第43页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第43-48页 |
| 3.4.1 钒配合物对细胞活力的影响 | 第43-46页 |
| 3.4.2 钒配合物对MCF7细胞凋亡的影响 | 第46-48页 |
| 3.4.3 细胞中钒配合物的摄入量 | 第48页 |
| 3.5 小结 | 第48-50页 |
| 第四章 钒配合物影响细胞中蛋白酶体活性的研究 | 第50-54页 |
| 4.1 实验原理 | 第50页 |
| 4.2 实验试剂及仪器 | 第50-51页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第50页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第50-51页 |
| 4.3 实验内容 | 第51-52页 |
| 4.3.1 溶液配制 | 第51页 |
| 4.3.2 蛋白提取 | 第51页 |
| 4.3.3 细胞内蛋白酶体活性的测定 | 第51-52页 |
| 4.3.3.1 细胞内钒配合物对蛋白酶体活性影响的测定 | 第51页 |
| 4.3.3.2 钒配合物对细胞抽提物蛋白酶体活性的直接影响的测定 | 第51-52页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第52-53页 |
| 4.4.1 细胞中钒配合物对蛋白酶体活性影响的测定 | 第52-53页 |
| 4.4.2 钒配合物对细胞抽提物蛋白酶体活性的直接影响的测定 | 第53页 |
| 4.5 小结 | 第53-54页 |
| 第五章 锌配合物选择性抑制PTP1B活性的研究 | 第54-64页 |
| 5.1 实验试剂与仪器 | 第54页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第54页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第54页 |
| 5.2 实验内容 | 第54-57页 |
| 5.2.1 溶液配制 | 第54-55页 |
| 5.2.2 锌配合物的合成 | 第55页 |
| 5.2.3 酶的表达与纯化 | 第55-56页 |
| 5.2.4 锌配合物选择性抑制重组PTP1B活性的研究 | 第56-57页 |
| 5.2.4.1 IC_(50)的测定 | 第56页 |
| 5.2.4.2 酶促反应动力学研究抑制类型及抑制常数 | 第56页 |
| 5.2.4.3 荧光光谱法测定配合物与PTP1B和TCPTP的结合作用 | 第56-57页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第57-62页 |
| 5.3.1 锌配合物的表征 | 第57-58页 |
| 5.3.2 锌配合物选择性抑制重组PTP1B活性的研究 | 第58-60页 |
| 5.3.3 锌配合物7和9对PTP1B和TCPTP抑制类型研究 | 第60-61页 |
| 5.3.4 锌配合物7和9与PTP1B和TCPTP的结合作用 | 第61-62页 |
| 5.4 小结 | 第62-64页 |
| 第六章 总结与展望 | 第64-66页 |
| 6.1 总结 | 第64-65页 |
| 6.2 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简况及联系方式 | 第76-78页 |
