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罗非鱼组织蛋白酶D和基质金属蛋白酶2基因的克隆鉴定及其功能分析

中文摘要第1-10页
Abstract第10-13页
1 引言第13-26页
   ·罗非鱼及其养殖现状第13-14页
   ·鱼类的免疫系统第14-16页
     ·免疫器官和组织第14-15页
     ·免疫细胞第15-16页
     ·体液免疫因子第16页
   ·组织蛋白酶D(cathepsin D)基因第16-19页
     ·组织蛋白酶D的合成第16-17页
     ·cathepsin D基因的功能第17-18页
     ·cathepsin D基因在鱼类的免疫学作用第18-19页
   ·基质金属蛋白酶 2(matrix metalloproteinase 2)基因第19-24页
     ·基质金属蛋白酶的概述第19页
     ·基质金属蛋白酶的分类第19-21页
     ·金属蛋白酶2的结构第21-22页
     ·基质金属蛋白酶2前体的激活第22-23页
     ·基质金属蛋白酶2的功能第23-24页
     ·基质金属蛋白酶2在水产上的研究第24页
   ·本研究的目的与意义第24-26页
2 材料与方法第26-36页
   ·实验材料第26-28页
     ·试验动物第26页
     ·嗜水气单胞菌第26页
     ·主要仪器设备第26-27页
     ·主要试剂第27页
     ·常用溶液配制第27-28页
   ·试验方法第28-36页
     ·引物合成第28-29页
     ·总RNA的提取(TRIZO L法)与质量检测第29-30页
     ·反转录合成cDNA与检测第30页
     ·罗非鱼基因组DNA的提取与检测第30-32页
     ·RAC E扩增目的基因全长cDN A序列第32-33页
     ·罗非鱼cathepsin D基因组序列扩增第33页
     ·PCR产物片段回收第33-34页
     ·PCR产物与载体的连接第34页
     ·大肠杆菌的转化及测序第34-35页
     ·生物信息学分析第35页
     ·细菌攻毒罗非鱼试验第35页
     ·荧光定量PCR第35-36页
3 结果与分析第36-50页
   ·实时荧光定量PCR第36-38页
   ·罗非鱼cathepsin D基因实验结果第38-44页
     ·罗非鱼cathepsin D基因的克隆与氨基酸序列分析第38-42页
     ·罗非鱼cathepsin D同源性分析第42-43页
     ·罗非鱼cathepsin D基因mRNA表达水平分析第43-44页
   ·罗非鱼MMP2基因实验结果第44-50页
     ·罗非鱼MMP2基因的克隆与序列的结构和功能分析第44-47页
     ·罗非鱼MMP2基因同源性分析第47-48页
     ·罗非鱼组织中MMP2基因mRNA表达水平分析第48-50页
4 讨论第50-55页
   ·罗非鱼cathepsin D基因第50-52页
     ·罗非鱼cathepsin D基因结构与功能分析第50-51页
     ·罗非鱼cathepsin D基因mRNA的组织表达分析第51-52页
   ·罗非鱼MMP2基因第52-55页
     ·罗非鱼MMP2基因编码区的结构与功能分析第52-53页
     ·罗非鱼MMP2基因mRNA的组织表达分析第53-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-69页
致谢第69页

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