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小尾寒羊CSRP2、CSRP3和FSTL1基因克隆、结构特征及组织表达分析

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
1 前言第12-22页
   ·小尾寒羊第12-13页
     ·小尾寒羊种质特征第12页
     ·小尾寒羊mRNA转录组研究现状第12-13页
   ·富含半胱氨酸蛋白家族研究进展第13-18页
     ·CSRP1第13-14页
     ·CSRP2第14-16页
     ·CSRP3第16-18页
   ·卵泡抑素样蛋白1基因研究进展第18-20页
     ·FSTL1发现及分布第18页
     ·FSTL1基因结构特征第18-19页
     ·FSTL1蛋白结构特征第19页
     ·FSTL1生物学功能第19-20页
     ·FSTL1在骨骼肌和脂肪方向研究现状第20页
   ·本研究目的意义第20-22页
2 材料与方法第22-41页
   ·试验材料第22-25页
     ·试验动物及样品采集第22页
     ·菌株和载体第22页
     ·试验仪器设备第22-23页
     ·试验试剂第23-24页
     ·常用试剂的配制第24-25页
   ·试验方法第25-41页
     ·引物设计第25-26页
     ·绵羊组织总RNA提取及cDNA合成第26-28页
     ·小尾寒羊CSRP2、CSRP3和FSTL1基因克隆测序第28-35页
     ·CSRP2、CSRP3和FSTL1基因及编码蛋白序列特征分析第35-37页
     ·CSRP2、CSRP3和FSTL1基因的荧光定量PCR分析第37页
     ·CRP3免疫印迹分析第37-39页
     ·数据统计第39-41页
3 结果与分析第41-63页
   ·CSRP2、CSRP3和FSTL1基因全长cDNA克隆测序第41-43页
     ·保守区序列克隆第41页
     ·5′ 端序列克隆第41-42页
     ·3′ 端序列克隆第42页
     ·基因序列拼接及全长验证第42-43页
   ·CSRP2、CSRP3和FSTL1基因序列分析第43-57页
     ·cDNA序列的基本特征第43-45页
     ·氨基酸序列结构和功能分析第45-57页
   ·小尾寒羊和杜泊羊CSRP2、CSRP3和FSTL1基因mRNA组织表达第57-60页
     ·标准曲线建立第57页
     ·实时荧光定量PCR检测第57-60页
   ·小尾寒羊和杜泊羊CRP3蛋白组织表达第60-63页
     ·总蛋白的提取与浓度测定第60-61页
     ·CRP3蛋白组织差异表达第61-63页
4 讨论第63-67页
   ·CRP2、CRP3和FSTL1结构与功能关系第63-64页
   ·CRP2、CRP3和FSTL1氨基酸序列进化分析第64-65页
   ·CSRP2、CSRP3和FSTL1基因mRNA表达及功能分析第65页
   ·CRP3(不同亚型)蛋白表达及功能分析第65-67页
5 结论第67-68页
参考文献第68-76页
附录第76-77页
致谢第77-78页
攻读学位期间发表论文情况第78页

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