摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-26页 |
·水稻黑条矮缩病毒的研究进展 | 第8-15页 |
·水稻黑条矮缩病毒的流行分布 | 第8页 |
·RBSDV的寄主范围和发病症状 | 第8-9页 |
·RBSDV的传播介体和侵染循环 | 第9-10页 |
·影响RBSDV流行的因素 | 第10页 |
·RBSDV分类属性及粒子形态 | 第10-12页 |
·RBSDV基因组及其编码的蛋白 | 第12-15页 |
·南方水稻黑条矮缩病毒研究进展 | 第15-20页 |
·SRBSDV寄主范围和发病症状 | 第16-17页 |
·SRBSDV的传播介体和流行规律 | 第17-19页 |
·SRBSDV流行特点及影响因素 | 第19页 |
·SRBSDV基因组及其编码蛋白 | 第19-20页 |
·水稻黑条矮缩病病原的检测 | 第20-24页 |
·生物学检测方法 | 第20-21页 |
·电镜技术 | 第21页 |
·血清学方法 | 第21-22页 |
·其它分子生物学检测方法 | 第22页 |
·荧光定量PCR技术 | 第22-24页 |
·本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
第二章 应用P8蛋白多克隆抗体检测RBSDV/SRBSDV | 第26-39页 |
·材料与试剂 | 第26页 |
·实验材料 | 第26页 |
·实验试剂 | 第26页 |
·实验仪器 | 第26页 |
·相关试剂和培养基配制 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-30页 |
·P8抗体制备 | 第27-28页 |
·引物设计 | 第27页 |
·PB蛋白的诱导表达和检测 | 第27页 |
·抗原溶液制备及动物免疫 | 第27-28页 |
·采集血清 | 第28页 |
·Western blot检测抗体 | 第28-29页 |
·间接ELISA检测方法 | 第29-30页 |
·Dot-blot检测RBSDV方法的建立 | 第30页 |
·结果与分析 | 第30-38页 |
·P8蛋白表达载体的构建 | 第30-31页 |
·P8蛋白的诱导表达和纯化 | 第31-32页 |
·P8多克隆抗体纯化及特异性分析 | 第32-33页 |
·P8多克隆抗体特异性及灵敏度分析 | 第33-35页 |
·P8多克隆抗体的稀释倍数和—抗反应时间 | 第35页 |
·最佳显色时间 | 第35-36页 |
·应用P8抗体检测病株和昆虫样品 | 第36-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第三章 高分辨率溶解曲线(HRM)方法同步检测RBSDV/SRBSDV | 第39-55页 |
·材料与方法 | 第41-44页 |
·材料 | 第41页 |
·试剂与仪器 | 第41页 |
·试剂 | 第41页 |
·仪器 | 第41页 |
·试验方法 | 第41-44页 |
·样品总RNA提取 | 第41页 |
·RT-PCR | 第41-42页 |
·HRM方法设计引物 | 第42页 |
·HRM方法反应体系及程序 | 第42-43页 |
·HRM分型方法的重复性分析 | 第43页 |
·HRM检测方法的准确性分析 | 第43-44页 |
·结果与分析 | 第44-53页 |
·RNA提取结果 | 第44页 |
·病株标准样品的确定 | 第44-45页 |
·引物设计及其有效性分析 | 第45-47页 |
·检测方法的建立 | 第47-48页 |
·HRM方法的反应体积 | 第48-49页 |
·重复性评估 | 第49页 |
·准确性评估 | 第49-51页 |
·HRM方法的应用 | 第51-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
附录 | 第60-64页 |
致谢 | 第64页 |