| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 缩略词 | 第16-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-34页 |
| ·松江鲈研究进展 | 第18-19页 |
| ·松江鲈生物学简介及分布特征 | 第18-19页 |
| ·松江鲈功能基因的研究 | 第19页 |
| ·免疫系统概述 | 第19-23页 |
| ·固有免疫和适应性免疫 | 第19-20页 |
| ·鱼类的免疫 | 第20-21页 |
| ·抗菌肽 | 第21-23页 |
| ·肌酸激酶的研究进展 | 第23-25页 |
| ·肌酸激酶的结构特点与功能 | 第23-24页 |
| ·肌酸激酶在临床上的应用 | 第24-25页 |
| ·肌酸激酶在鱼类中的研究 | 第25页 |
| ·Hepcidin的研究进展 | 第25-29页 |
| ·Hepcidin的结构特点 | 第26页 |
| ·Hepcidin的功能研究进展 | 第26-28页 |
| ·Hepcidin在鱼类中的研究现状 | 第28-29页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第29-32页 |
| ·研究目的和意义 | 第32-34页 |
| 第二章 松江鲈肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)的原核表达与功能研究 | 第34-60页 |
| ·材料与方法 | 第34-42页 |
| ·实验动物 | 第34-35页 |
| ·菌株和载体 | 第35页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第35页 |
| ·主要试剂的配置 | 第35页 |
| ·总RNA提取和cDNA合成 | 第35-36页 |
| ·松江鲈TfM-CK基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·松江鲈TfM-CK基因的生物信息学分析 | 第37页 |
| ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测TfM-CK基因的组织分布及鳗弧菌刺激后的表达模式变化 | 第37页 |
| ·重组TfM-CK基因原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白的表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备 | 第38-40页 |
| ·松江鲈正常组织蛋白的提取及TfM-CK在正常组织中的分布 | 第40页 |
| ·重组TfM-CK蛋白的酶活性检测 | 第40页 |
| ·重组TfM-CK蛋白的抑菌活性检测 | 第40-41页 |
| ·重组TfM-CK蛋白的糖结合实验 | 第41页 |
| ·重组TfM-CK蛋白的细菌凝集实验 | 第41-42页 |
| ·重组TfM-CK蛋白的糖的抑制凝集实验 | 第42页 |
| ·细菌感染实验 | 第42页 |
| ·实验结果 | 第42-56页 |
| ·TfM-CK基因的测序结果及序列分析 | 第42-45页 |
| ·TfM-CK基因与其他物种基因的同源比对和进化树的构建 | 第45-47页 |
| ·TfM-CK基因mRNA的组织分布 | 第47-48页 |
| ·鳗弧菌刺激后TfM-CK基因在各组织中的表达模式 | 第48-49页 |
| ·TfM-CK重组蛋白的表达与纯化 | 第49-50页 |
| ·TfM-CK蛋白在松江鲈正常组织中的分布 | 第50-51页 |
| ·TfM-CK蛋白的酶的活性 | 第51页 |
| ·TfM-CK蛋白的抑菌活性 | 第51-53页 |
| ·TfM-CK蛋白的糖结合活性 | 第53-54页 |
| ·TfM-CK蛋白的细菌凝集活性 | 第54-55页 |
| ·TfM-CK蛋白的糖的抑制凝集活性 | 第55页 |
| ·细菌感染实验 | 第55-56页 |
| ·小结与讨论 | 第56-60页 |
| 第三章 松江鲈Hepcidin(Tf-Hepcidin)的原核、真核表达与功能研究 | 第60-84页 |
| ·材料和方法 | 第60-65页 |
| ·实验动物 | 第60页 |
| ·菌株和载体 | 第60-61页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第61页 |
| ·主要试剂的配置 | 第61页 |
| ·总RNA提取和cDNA合成 | 第61页 |
| ·松江鲈Tf-Hepcidin基因的克隆 | 第61页 |
| ·松江鲈Tf-Hepcidin基因的生物信息学分析 | 第61-62页 |
| ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Tf-Hepcidin基因的组织分布及LPS和重金属刺激后的表达模式变化 | 第62页 |
| ·重组Tf-Hepcidin基因原核表达载体的构建 | 第62页 |
| ·重组Tf-Hepcidin基因真核表达载体的构建 | 第62-63页 |
| ·重组蛋白的表达、蛋白纯化及多克隆抗体的制备 | 第63-64页 |
| ·重组Tf-Hepcidin蛋白的抑菌活性检测 | 第64页 |
| ·重组Tf-Hepcidin蛋白的糖结合实验 | 第64页 |
| ·重组Tf-Hepcidin蛋白的细菌凝集实验 | 第64页 |
| ·重组Tf-Hepcidin蛋白的糖的抑制凝集实验 | 第64-65页 |
| ·细菌感染实验 | 第65页 |
| ·实验结果 | 第65-78页 |
| ·Tf-Hepcidin基因的测序结果及序列分析 | 第65-66页 |
| ·Tf-Hepcidin基因与其他物种基因的同源比对和进化树的构建 | 第66-68页 |
| ·Tf-Hepcidin基因mRNA的组织分布 | 第68-69页 |
| ·LPS(lipopolysaccharides)和重金属刺激后Tf-Hepcidin基因在各组织中的表达模式 | 第69-72页 |
| ·Tf-Hepcidin重组蛋白的表达与纯化 | 第72-73页 |
| ·Tf-Hepcidin成熟肽蛋白的抑菌活性 | 第73-75页 |
| ·Tf-Hepcidin成熟肽蛋白的糖结合活性 | 第75页 |
| ·Tf-Hepcidin成熟肽蛋白的细菌凝集活性 | 第75-77页 |
| ·Tf-Hepcidin成熟肽蛋白的糖的抑制凝集活性 | 第77页 |
| ·细菌感染实验 | 第77-78页 |
| ·小结与讨论 | 第78-84页 |
| 总结与展望 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-100页 |
| 附录 | 第100-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第106-107页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第107页 |
