缩略词表 | 第1-11页 |
中文摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
1 前言 | 第15-33页 |
·SUMO化结构及SUMO化过程 | 第15-18页 |
·翻译后修饰简介 | 第15页 |
·SUMO蛋白的发现 | 第15-16页 |
·SUMO蛋白的结构 | 第16页 |
·SUMO化过程简介 | 第16-17页 |
·参与SUMO化过程的酶 | 第17-18页 |
·SUMO化在植物中的功能 | 第18-21页 |
·SUMO化在逆境胁迫中的功能 | 第18-20页 |
·SUMO化在ABA信号途径中的功能 | 第20页 |
·SUMO化在植物生长和发育中的功能 | 第20-21页 |
·SUMO化在开花途径中的功能 | 第21页 |
·SUMO化在植物抗病方面的功能 | 第21页 |
·SUMO化在氮素同化中的功能 | 第21页 |
·植物中SIZ1的研究 | 第21-23页 |
·植物SIZ1的基本结构 | 第21-22页 |
·SIZ1的基本功能 | 第22-23页 |
·SIZ1在其他植物中的研究 | 第23页 |
·磷同化吸收 | 第23-24页 |
·植物应对低磷的应答机制 | 第24页 |
·缺磷响应基因的研究 | 第24-25页 |
·缺磷响应功能基因的研究 | 第24页 |
·缺磷响应的转录因子的研究 | 第24-25页 |
·SUMO E3连接酶SIZ1响应缺磷的研究 | 第25页 |
·苹果的缺磷症状及防治 | 第25-26页 |
·花青苷的合成 | 第26-27页 |
·环境因子对花青苷的影响 | 第27-29页 |
·外部因素对花青苷的影响 | 第27-28页 |
·内部因素对花青苷的影响 | 第28-29页 |
·WBM蛋白复合体 | 第29-31页 |
·MYB转录因子 | 第29页 |
·bHLH转录因子 | 第29-30页 |
·WD40转录因子 | 第30页 |
·WBM蛋白复合体调控花青苷的合成 | 第30-31页 |
·WBM蛋白复合体中的翻译后修饰 | 第31页 |
·研究目的及意义 | 第31-33页 |
2 材料和方法 | 第33-59页 |
·实验材料 | 第33-35页 |
·菌株 | 第33页 |
·载体 | 第33页 |
·植物材料 | 第33页 |
·酶、抗生素、各种化学药品及生化试剂 | 第33-34页 |
·仪器与设备 | 第34页 |
·培养基 | 第34页 |
·抗生素 | 第34页 |
·溶液和缓冲液 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-59页 |
·植物组织总RNA提取 | 第35-36页 |
·植物RNA的纯化(除DNA)方法 | 第36-37页 |
·反转录cDNA第一链的合成 | 第37页 |
·荧光定量PCR(RT-PCR) | 第37-38页 |
·基因扩增 | 第38页 |
·PCR产物的回收 | 第38-39页 |
·连接反应 | 第39页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第39-40页 |
·测序 | 第40页 |
·质粒DNA的提取 | 第40-41页 |
·质粒DNA的酶切 | 第41页 |
·表达载体的构建 | 第41-43页 |
·根癌农杆菌LBA4404和GV3101感受态细胞的制备与转化 | 第43页 |
·植物转化方法 | 第43-45页 |
·植物基因组DNA的提取及纯化 | 第45-46页 |
·植物体花青苷的测定 | 第46-47页 |
·酵母双杂转化方法 | 第47-49页 |
·蛋白技术 | 第49-57页 |
·瞬时表达注射苹果实验 | 第57-59页 |
3 结果与分析 | 第59-93页 |
·苹果SUMO E3连接酶MdSIZ1功能研究 | 第59-69页 |
·MdSIZ1的进化树分析 | 第59-61页 |
·AtSUMO1抗体可以检测苹果中的SUMO结合 | 第61-62页 |
·在逆境胁迫下SUMO结合水平明显提高 | 第62页 |
·逆境胁迫诱导MdSIZ1的表达 | 第62-63页 |
·MdSIZ1苹果中作为SUMO E3连接酶 | 第63-65页 |
·MdSIZ1恢复siz1-2 在逆境环境下的SUMO结合水平 | 第65-66页 |
·MdSIZ1部分恢复siz1-2 的株高和叶片大小 | 第66-68页 |
·MdSIZ1部分恢复siz1-2 突变体萌发率 | 第68-69页 |
·苹果MdSIZ1调控缺磷胁迫 | 第69-75页 |
·在苹果中缺磷条件诱导MdSIZ1基因的表达 | 第69-70页 |
·在苹果中缺磷条件下诱导SUMO化 | 第70-71页 |
·MdPHR1被SUMO蛋白修饰 | 第71-72页 |
·MdSIZ1部分恢复了siz1-2 的缺磷条件下的存活率 | 第72-73页 |
·MdSIZ1转基因愈伤影响缺磷相关基因的表达量 | 第73-74页 |
·缺磷处理下MdSIZ1转基因愈伤改变SUMO结合水平 | 第74页 |
·过量表达MdSIZ1转基因愈伤提高对缺磷的抗性 | 第74-75页 |
·MdSIZ1调控花青苷积累的机制研究 | 第75-92页 |
·MdSIZ1与MdMYB1蛋白的相互作用 | 第75-78页 |
·MdSIZ1介导MdMYB1的SUMO化修饰 | 第78-81页 |
·MdSIZ1在蛋白水平稳定MdMYB1抑制 26S蛋白酶体的降解 | 第81-85页 |
·在愈伤中MdSIZ1通过依赖MdMYB1的途径促进花青苷的形成 | 第85-88页 |
·在苹果果实中MdSIZ1通过依赖MdMYB1的途径促进花青苷的形成 | 第88-92页 |
·MdSIZ1调控各种生理反应模式图 | 第92-93页 |
4 讨论 | 第93-99页 |
·在苹果中逆境胁迫诱导SUMO化并且诱导在转录水平诱导MdSIZ1 | 第93-94页 |
·苹果中MdSIZ1调控低温胁迫通过MdCIbHLH1 | 第94页 |
·MdPHR1的SUMO化修饰被MdSIZ1介导 | 第94-95页 |
·MdSIZ1提高缺磷的耐受性 | 第95-96页 |
·MdSIZ1与MdMYB1互作 | 第96-97页 |
·MdSIZ1调控MdMYB1的稳定性 | 第97页 |
·MdSIZ1调控花青苷的积累 | 第97-98页 |
·展望 | 第98-99页 |
5 结论 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-113页 |
6 附录 | 第113-118页 |
·本文中使用的引物 | 第113-114页 |
·载体示意图 | 第114-118页 |
·克隆载体PMD18-T | 第114-115页 |
·酵母双杂载体pGAD424 | 第115-116页 |
·酵母双杂交载体pGBT9 | 第116页 |
·原核表达载体pGEX-4T-1 | 第116-117页 |
·原核表达载体pEASY | 第117页 |
·IL60BS载体图 | 第117页 |
·反义病毒载体pTRV2 | 第117页 |
·过量或抑制表达载体pCXSN | 第117-118页 |
7 致谢 | 第118-119页 |
8 攻读学位期间发表以及待发表的论文 | 第119页 |