摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
·引言 | 第13页 |
·金属硫蛋白的理化特性 | 第13-15页 |
·植物金属硫蛋白的分类 | 第15-16页 |
·金属硫蛋白的测定 | 第16-19页 |
·金属饱和法 | 第17页 |
·免疫分析法 | 第17页 |
·电化学方法 | 第17-18页 |
·荧光标记法 | 第18页 |
·SH定量法 | 第18-19页 |
·植物金属硫蛋白的生物学作用 | 第19-21页 |
·植物MT参与运输、供给金属离子 | 第20页 |
·植物MT参与重金属的解毒 | 第20-21页 |
·植物MT参与活性氧的清除 | 第21页 |
·研究内容及研究意义 | 第21-23页 |
·研究内容 | 第21-22页 |
·研究意义 | 第22-23页 |
第二章 重组玉米金属硫蛋白在GST融合系统中表达与纯化 | 第23-39页 |
·引言 | 第23页 |
·材料 | 第23-27页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·主要实验试剂 | 第24-25页 |
·常规试剂的配制 | 第25-27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-31页 |
·重组表达质粒pGEX-4T1MT1与pGEX-6p1MT1的构建 | 第27页 |
·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1的融合表达 | 第27-28页 |
·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1表达条件的优化 | 第28-29页 |
·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1提取条件的优化 | 第29页 |
·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1的融合表达 | 第29页 |
·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1表达条件的优化 | 第29-30页 |
·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1提取条件的优化 | 第30页 |
·MT1融合蛋白纯化 | 第30页 |
·MT1的分子量质谱分析 | 第30-31页 |
·实验结果 | 第31-37页 |
·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1的融合表达 | 第31页 |
·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1表达条件的优化 | 第31-32页 |
·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1提取条件的优化 | 第32-33页 |
·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1的融合表达 | 第33-34页 |
·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1表达条件的优化 | 第34-35页 |
·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1提取条件的优化 | 第35-36页 |
·MT1的分子量质谱分析 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
·玉米金属硫蛋白在GST系统中的可溶性融合表达 | 第37-38页 |
·MT1表达条件的优化 | 第38页 |
·原核表达载体pGEX-6p-1 表达MT1的纯化 | 第38页 |
·本章小结 | 第38-39页 |
第三章 玉米金属硫蛋白的特性参数 | 第39-41页 |
·引言 | 第39页 |
·金属硫蛋白基因核苷酸序列及其氨基酸序列 | 第39页 |
·金属硫蛋白的一些参数 | 第39-41页 |
·氨基酸组成 | 第39-40页 |
·一些特征参数 | 第40-41页 |
第四章 玉米金属硫蛋白与金属离子结合的光谱学特性 | 第41-53页 |
·引言 | 第41-42页 |
·材料 | 第42-43页 |
·主要实验试剂 | 第42页 |
·常规试剂配制 | 第42-43页 |
·主要仪器 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-44页 |
·MT1的浓度测定 | 第43页 |
·脱金属硫蛋白的制备 | 第43页 |
·紫外光谱法探究玉米金属硫蛋白与不同金属离子的结合性质 | 第43页 |
·紫外光谱法探究玉米金属硫蛋白的pH稳定性 | 第43-44页 |
·实验结果 | 第44-51页 |
·MT1的浓度确定 | 第44-45页 |
·紫外光谱法探究不同金属离子滴定金属硫蛋白 | 第45-48页 |
·紫外光谱法探究金属硫蛋白的pH稳定性 | 第48-51页 |
·本章小结 | 第51-53页 |
第五章 DTNB氧化MT1速率的理化因素探究 | 第53-63页 |
·引言 | 第53页 |
·材料 | 第53-55页 |
·主要实验试剂 | 第53-54页 |
·常规试剂配制 | 第54-55页 |
·主要仪器 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-56页 |
·DTNB氧化MT巯基活性的确定 | 第55页 |
·金属离子浓度对DTNB氧化MT影响的探究实验 | 第55页 |
·不同螯合剂对DTNB氧化MT影响的探究实验 | 第55-56页 |
·缓冲液类型对DTNB氧化MT1影响的探究实验 | 第56页 |
·实验结果 | 第56-61页 |
·紫外光谱法探究金属离子浓度对DTNB氧化MT1的影响 | 第56-58页 |
·紫外光谱法探究不同螯合剂对DTNB氧化MT1的影响 | 第58-60页 |
·紫外光谱法探究缓冲液类型对DTNB氧化MT1影响 | 第60-61页 |
·本章小结 | 第61-63页 |
第六章 总结与展望 | 第63-65页 |
·总结 | 第63-64页 |
·展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第75页 |