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玉米金属硫蛋白的表达、纯化及其光谱学特性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-13页
第一章 文献综述第13-23页
   ·引言第13页
   ·金属硫蛋白的理化特性第13-15页
   ·植物金属硫蛋白的分类第15-16页
   ·金属硫蛋白的测定第16-19页
     ·金属饱和法第17页
     ·免疫分析法第17页
     ·电化学方法第17-18页
     ·荧光标记法第18页
     ·SH定量法第18-19页
   ·植物金属硫蛋白的生物学作用第19-21页
     ·植物MT参与运输、供给金属离子第20页
     ·植物MT参与重金属的解毒第20-21页
     ·植物MT参与活性氧的清除第21页
   ·研究内容及研究意义第21-23页
     ·研究内容第21-22页
     ·研究意义第22-23页
第二章 重组玉米金属硫蛋白在GST融合系统中表达与纯化第23-39页
   ·引言第23页
   ·材料第23-27页
     ·实验材料第23-24页
     ·主要实验试剂第24-25页
     ·常规试剂的配制第25-27页
     ·主要仪器第27页
   ·实验方法第27-31页
     ·重组表达质粒pGEX-4T1MT1与pGEX-6p1MT1的构建第27页
     ·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1的融合表达第27-28页
     ·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1表达条件的优化第28-29页
     ·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1提取条件的优化第29页
     ·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1的融合表达第29页
     ·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1表达条件的优化第29-30页
     ·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1提取条件的优化第30页
     ·MT1融合蛋白纯化第30页
     ·MT1的分子量质谱分析第30-31页
   ·实验结果第31-37页
     ·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1的融合表达第31页
     ·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1表达条件的优化第31-32页
     ·原核表达载体pGEX-4T-1 中MT1提取条件的优化第32-33页
     ·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1的融合表达第33-34页
     ·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1表达条件的优化第34-35页
     ·原核表达载体pGEX-6p-1 中MT1提取条件的优化第35-36页
     ·MT1的分子量质谱分析第36-37页
   ·讨论第37-38页
     ·玉米金属硫蛋白在GST系统中的可溶性融合表达第37-38页
     ·MT1表达条件的优化第38页
     ·原核表达载体pGEX-6p-1 表达MT1的纯化第38页
   ·本章小结第38-39页
第三章 玉米金属硫蛋白的特性参数第39-41页
   ·引言第39页
   ·金属硫蛋白基因核苷酸序列及其氨基酸序列第39页
   ·金属硫蛋白的一些参数第39-41页
     ·氨基酸组成第39-40页
     ·一些特征参数第40-41页
第四章 玉米金属硫蛋白与金属离子结合的光谱学特性第41-53页
   ·引言第41-42页
   ·材料第42-43页
     ·主要实验试剂第42页
     ·常规试剂配制第42-43页
     ·主要仪器第43页
   ·实验方法第43-44页
     ·MT1的浓度测定第43页
     ·脱金属硫蛋白的制备第43页
     ·紫外光谱法探究玉米金属硫蛋白与不同金属离子的结合性质第43页
     ·紫外光谱法探究玉米金属硫蛋白的pH稳定性第43-44页
   ·实验结果第44-51页
     ·MT1的浓度确定第44-45页
     ·紫外光谱法探究不同金属离子滴定金属硫蛋白第45-48页
     ·紫外光谱法探究金属硫蛋白的pH稳定性第48-51页
   ·本章小结第51-53页
第五章 DTNB氧化MT1速率的理化因素探究第53-63页
   ·引言第53页
   ·材料第53-55页
     ·主要实验试剂第53-54页
     ·常规试剂配制第54-55页
     ·主要仪器第55页
   ·实验方法第55-56页
     ·DTNB氧化MT巯基活性的确定第55页
     ·金属离子浓度对DTNB氧化MT影响的探究实验第55页
     ·不同螯合剂对DTNB氧化MT影响的探究实验第55-56页
     ·缓冲液类型对DTNB氧化MT1影响的探究实验第56页
   ·实验结果第56-61页
     ·紫外光谱法探究金属离子浓度对DTNB氧化MT1的影响第56-58页
     ·紫外光谱法探究不同螯合剂对DTNB氧化MT1的影响第58-60页
     ·紫外光谱法探究缓冲液类型对DTNB氧化MT1影响第60-61页
   ·本章小结第61-63页
第六章 总结与展望第63-65页
   ·总结第63-64页
   ·展望第64-65页
参考文献第65-71页
附录第71-73页
致谢第73-75页
攻读学位期间发表的学术论文第75页

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