| 摘要 | 第1-8页 |
| 文献综述 | 第8-13页 |
| 1 Musclin基因的研究历程与现状 | 第8-11页 |
| ·Musclin基因的概述 | 第8-9页 |
| ·Musclin基因与机体代谢关系的研究 | 第9页 |
| ·Musclin基因转录与表达调控的研究 | 第9-11页 |
| 2 顺式作用元件对基因转录调控的作用 | 第11-13页 |
| 本研究的立项依据与研究意义 | 第13-14页 |
| 试验一 绵羊Musclin基因5’调控区几种元件突变载体的构建 | 第14-36页 |
| ·材料与方法 | 第14-26页 |
| ·试验用菌株及质粒载体 | 第14页 |
| ·试验用试剂 | 第14页 |
| ·引物合成、序列分析以及数据统计 | 第14页 |
| ·主要仪器与设备 | 第14-15页 |
| ·试剂及缓冲液的配制 | 第15页 |
| ·试验基本方法 | 第15-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-33页 |
| ·野生型绵羊Musclin基因启动子MUSCLINpro~W-EGFP真核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·绵羊Musclin基因启动子GA-box,MEF2,FoxO元件突变体MUSCLINpro~(XM)-EGFP真核表达载体的构建 | 第27-29页 |
| ·绵羊Musclin基因启动子E-box突变体MUSCLINpro~(EM)-EGFP真核表达载体的构建 | 第29-32页 |
| ·绵羊Musclin基因启动子HMTB、VTBP、MEF3和SMAD突变体MUSCLINpro~(XM)-EGFP真核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-36页 |
| ·关于载体的构建 | 第33-34页 |
| ·基因突变方法的选择 | 第34-36页 |
| 试验二 几种元件突变对绵羊MUSCLIN基因启动子转录调控活性的影响 | 第36-48页 |
| ·材料与方法 | 第36-41页 |
| ·试验用细胞与载体 | 第36页 |
| ·试验耗材 | 第36页 |
| ·引物设计与序列分析软件 | 第36页 |
| ·仪器与设备 | 第36页 |
| ·试验用试剂的配制 | 第36-37页 |
| ·试验方法 | 第37-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-44页 |
| ·几种元件突变载体转染小鼠C2C12成肌细胞后的RNA提取结果 | 第41-42页 |
| ·EGFP及GAPDH基因的PCR扩增与溶解曲线 | 第42页 |
| ·几种元件突变对EGFP报告基因mRNA表达的影响 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-48页 |
| ·荧光定量PCR的条件改良 | 第44页 |
| ·转染方法的选择与优化 | 第44-45页 |
| ·几种元件在绵羊Musclin基因转录调控中的作用 | 第45-48页 |
| 试验三 几种调控元件与核蛋白作用的EMSA检测 | 第48-58页 |
| ·材料与方法 | 第48-53页 |
| ·动物材料 | 第48页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第48页 |
| ·主要仪器与设备 | 第48页 |
| ·探针设计 | 第48-49页 |
| ·基本实验方法 | 第49-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-54页 |
| ·几种调控元件的EMSA鉴定结果 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-58页 |
| ·EMSA实验的条件优化 | 第54-55页 |
| ·几种元件通过与反式作用因子结合对Musclin基因转录的调控机制 | 第55-58页 |
| 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| Abstract | 第65-67页 |
| 附录 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
