| 摘要 | 第1-8页 |
| 文献综述 | 第8-17页 |
| 1 PRRS概述 | 第8-12页 |
| ·PRRSV的感染机制 | 第8-10页 |
| ·宿主细胞受体 | 第10-12页 |
| ·清道夫受体(CD163) | 第11页 |
| ·波形蛋白(Vimentin) | 第11-12页 |
| 2 茶皂素的概述 | 第12-14页 |
| ·茶皂素的分布 | 第12页 |
| ·茶皂素的组成 | 第12页 |
| ·茶皂素的性质 | 第12-13页 |
| ·茶皂素的应用 | 第13-14页 |
| 3 细胞凋亡简介 | 第14-17页 |
| ·细胞凋亡外源性信号通路 | 第15页 |
| ·细胞凋亡内源性信号通路 | 第15-16页 |
| ·病毒感染与细胞凋亡 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 试验部分 | 第18-38页 |
| 1 试验材料 | 第18-21页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·试剂配制 | 第18-20页 |
| ·主要实验仪器 | 第20页 |
| ·试验药品 | 第20-21页 |
| 2 实验方法 | 第21-28页 |
| ·Marc-145细胞 | 第21页 |
| ·Marc-145来源 | 第21页 |
| ·Marc-145细胞复苏 | 第21页 |
| ·Marc-145细胞传代 | 第21页 |
| ·Marc-145细胞冻存 | 第21页 |
| ·PRRSV | 第21-22页 |
| ·PRRSV的来源 | 第21页 |
| ·PRRSV的扩增 | 第21-22页 |
| ·PRRSV的收获 | 第22页 |
| ·PRRSV的毒力测定 | 第22页 |
| ·CD163和Vimentin蛋白及RNA样品的制备 | 第22页 |
| ·Caspase-9蛋白样品的制备 | 第22-23页 |
| ·qRT-PCR检测CD163和Vimentin mRNA的表达量 | 第23-25页 |
| ·引物设计 | 第23页 |
| ·细胞总RNA的抽提 | 第23页 |
| ·合成cDNA | 第23-24页 |
| ·优化PCR反应体系 | 第24-25页 |
| ·qRT-PCR反应检测CD163和Vimentin基因的拷贝数 | 第25页 |
| ·Western blot检测CD163、Vimentin以及caspase-9蛋白的表达 | 第25-27页 |
| ·细胞总蛋白的提取及浓度测定 | 第25-26页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第26页 |
| ·转膜 | 第26-27页 |
| ·封闭 | 第27页 |
| ·一抗孵育 | 第27页 |
| ·二抗孵育 | 第27页 |
| ·蛋白检测 | 第27页 |
| ·数据分析 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-34页 |
| ·PRRSV毒力测定结果 | 第28页 |
| ·CD163和Vimentin mRNA的表达量测定结果 | 第28-32页 |
| ·细胞总RNA的提取及检测结果 | 第28-29页 |
| ·优化PCR反应体系结果 | 第29-30页 |
| ·基因特异性验证结果 | 第30页 |
| ·CD163和Vimentin mRNA表达量qRT-PCR测定结果 | 第30-32页 |
| ·CD163和Vimentin蛋白合成的Western Blot测定结果 | 第32-33页 |
| ·Western blot检测caspase-9活化结果 | 第33-34页 |
| 4 分析与讨论 | 第34-37页 |
| ·茶皂素抑制感染PRRSV的Marc-145细胞受体表达作用 | 第35-36页 |
| ·细胞凋亡途径抗病毒作用 | 第36-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| Abstract | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45页 |
