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基于多种非线性效应的超分辨成像研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-13页
第一章 绪论第13-47页
   ·超分辨显微镜第13-22页
     ·光学显微镜与光学衍射极限第13-14页
     ·超分辨光学显微技术的发展第14-19页
     ·超分辨光学显微技术的成像第19-21页
     ·超分辨的生物学应用第21-22页
   ·荧光与荧光共振能量转移第22-26页
     ·荧光(Fluorescence)第22-23页
     ·荧光共振能量转移( Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET)第23-24页
     ·FRET 效率的测量方法第24-25页
     ·FRET 在生物学中的应用第25-26页
   ·Nanobody 介绍第26-28页
     ·传统抗体与 nanobody第26-27页
     ·Nanobody 在生物学中的应用第27-28页
   ·总结及本课题的结构第28-29页
 参考文献第29-47页
第二章 STED 搭建以及成像第47-67页
   ·STED 的提出第47-48页
   ·STED 光路的搭建第48-50页
   ·STED 的光路校准第50-51页
     ·金颗粒样品制作第50页
     ·使用金颗粒对光路进行校正第50-51页
   ·荧光小球成像第51-52页
   ·细胞微管成像第52-57页
     ·atto 488 标记的细胞微管样品制作与 STED 成像第52-54页
     ·STED 成像第54-56页
     ·Chromeo 488 标记的细胞微管样品制作与 STED 成像第56-57页
     ·STED 成像第57页
   ·DNA 折纸结构 STED 成像第57-60页
     ·折纸设计第58页
     ·样品制作第58-59页
     ·DNA 折纸结构的 STED 成像第59-60页
   ·溶酶体和网格蛋白的 STED 成像第60-62页
     ·样品制作第60-61页
     ·STED 成像第61-62页
   ·总结第62-63页
 参考文献第63-67页
第三章 FRET-STED 联用超分辨成像第67-81页
   ·荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer, FRET)第67页
   ·FRET-STED 超分辨原理第67-71页
     ·理论第68-70页
     ·STED 对供体荧光影响第70-71页
   ·光路搭建第71-74页
     ·光路校准第72-74页
   ·荧光小球成像第74-78页
     ·样品制作第74-75页
     ·显微镜成像第75-78页
   ·总结第78-79页
 参考文献第79-81页
第四章 基于 FRET 的时间门超分辨显微镜第81-93页
   ·介绍第81-82页
   ·FRET 时间门超分辨显微成像理论第82-85页
   ·时间门用于提升分辨率第85-87页
   ·使用 STED 损耗光提升时间门 FRET 显微镜分辨率第87-90页
   ·结果与讨论第90页
 参考文献第90-93页
第五章 基于 nanobody 的高 FRET 效率荧光蛋白系统第93-109页
   ·引言第93-94页
   ·基于 nanobody 的 FRET 系统第94-95页
   ·实验材料与方法第95-96页
     ·Nanobody 标记第95-96页
   ·nanobody 标记 GFP-纳米金刚石成像第96-98页
     ·样品制作第96-97页
     ·显微镜观测第97-98页
   ·细胞内成像第98-100页
     ·制样步骤第98-99页
     ·显微镜观测第99-100页
   ·受体漂白实验第100-101页
   ·传统抗体对照实验第101-102页
   ·Nanobody FRET 系统应用于不同的荧光蛋白和各种细胞器第102-104页
   ·总结与讨论第104页
 参考文献第104-109页
第六章 荧光漂白超分辨成像第109-137页
   ·荧光漂白超分辨描述第109-110页
   ·光漂白超分辨理论第110-112页
   ·荧光小球样品制作第112-113页
   ·超分辨成像参数探索第113-114页
   ·荧光小球漂白成像第114-118页
     ·Atto 488 成像结果第114-116页
     ·结果分析第116-117页
     ·Alexa 405 荧光小球成像结果第117-118页
     ·成像结果分析第118页
   ·细胞微管成像第118-124页
     ·Alexa405 标记细胞微管样品制作第118-119页
     ·Alexa405 细胞微管成像结果第119-120页
     ·成像结果分析第120-121页
     ·Atto488 标记的细胞微管成像第121-122页
     ·Alexa 555 标记的细胞微管成像第122-123页
     ·Alexa 555 细胞微管成像结果第123-124页
     ·成像结果分析第124页
   ·荧光小球双色标记荧光漂白成像第124-127页
     ·样品制作第124-126页
     ·荧光小球双色荧光漂白成像第126页
     ·成像结果分析第126-127页
   ·细胞微管双色成像第127-130页
     ·样品制作第127-129页
     ·Alexa405 细胞微管成像结果第129页
     ·成像结果分析第129-130页
   ·荧光小球二维荧光漂白超分辨第130-131页
     ·数据处理方法第130-131页
   ·结论第131-133页
 参考文献第133-137页
第七章 总结与展望第137-139页
攻读博士期间发表论文第139-141页
致谢第141-142页

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