摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第9-13页 |
第一章 绪论 | 第13-47页 |
·超分辨显微镜 | 第13-22页 |
·光学显微镜与光学衍射极限 | 第13-14页 |
·超分辨光学显微技术的发展 | 第14-19页 |
·超分辨光学显微技术的成像 | 第19-21页 |
·超分辨的生物学应用 | 第21-22页 |
·荧光与荧光共振能量转移 | 第22-26页 |
·荧光(Fluorescence) | 第22-23页 |
·荧光共振能量转移( Fluorescence Resonance Energy Transfer,FRET) | 第23-24页 |
·FRET 效率的测量方法 | 第24-25页 |
·FRET 在生物学中的应用 | 第25-26页 |
·Nanobody 介绍 | 第26-28页 |
·传统抗体与 nanobody | 第26-27页 |
·Nanobody 在生物学中的应用 | 第27-28页 |
·总结及本课题的结构 | 第28-29页 |
参考文献 | 第29-47页 |
第二章 STED 搭建以及成像 | 第47-67页 |
·STED 的提出 | 第47-48页 |
·STED 光路的搭建 | 第48-50页 |
·STED 的光路校准 | 第50-51页 |
·金颗粒样品制作 | 第50页 |
·使用金颗粒对光路进行校正 | 第50-51页 |
·荧光小球成像 | 第51-52页 |
·细胞微管成像 | 第52-57页 |
·atto 488 标记的细胞微管样品制作与 STED 成像 | 第52-54页 |
·STED 成像 | 第54-56页 |
·Chromeo 488 标记的细胞微管样品制作与 STED 成像 | 第56-57页 |
·STED 成像 | 第57页 |
·DNA 折纸结构 STED 成像 | 第57-60页 |
·折纸设计 | 第58页 |
·样品制作 | 第58-59页 |
·DNA 折纸结构的 STED 成像 | 第59-60页 |
·溶酶体和网格蛋白的 STED 成像 | 第60-62页 |
·样品制作 | 第60-61页 |
·STED 成像 | 第61-62页 |
·总结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-67页 |
第三章 FRET-STED 联用超分辨成像 | 第67-81页 |
·荧光共振能量转移(Fluorescence Resonance Energy Transfer, FRET) | 第67页 |
·FRET-STED 超分辨原理 | 第67-71页 |
·理论 | 第68-70页 |
·STED 对供体荧光影响 | 第70-71页 |
·光路搭建 | 第71-74页 |
·光路校准 | 第72-74页 |
·荧光小球成像 | 第74-78页 |
·样品制作 | 第74-75页 |
·显微镜成像 | 第75-78页 |
·总结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-81页 |
第四章 基于 FRET 的时间门超分辨显微镜 | 第81-93页 |
·介绍 | 第81-82页 |
·FRET 时间门超分辨显微成像理论 | 第82-85页 |
·时间门用于提升分辨率 | 第85-87页 |
·使用 STED 损耗光提升时间门 FRET 显微镜分辨率 | 第87-90页 |
·结果与讨论 | 第90页 |
参考文献 | 第90-93页 |
第五章 基于 nanobody 的高 FRET 效率荧光蛋白系统 | 第93-109页 |
·引言 | 第93-94页 |
·基于 nanobody 的 FRET 系统 | 第94-95页 |
·实验材料与方法 | 第95-96页 |
·Nanobody 标记 | 第95-96页 |
·nanobody 标记 GFP-纳米金刚石成像 | 第96-98页 |
·样品制作 | 第96-97页 |
·显微镜观测 | 第97-98页 |
·细胞内成像 | 第98-100页 |
·制样步骤 | 第98-99页 |
·显微镜观测 | 第99-100页 |
·受体漂白实验 | 第100-101页 |
·传统抗体对照实验 | 第101-102页 |
·Nanobody FRET 系统应用于不同的荧光蛋白和各种细胞器 | 第102-104页 |
·总结与讨论 | 第104页 |
参考文献 | 第104-109页 |
第六章 荧光漂白超分辨成像 | 第109-137页 |
·荧光漂白超分辨描述 | 第109-110页 |
·光漂白超分辨理论 | 第110-112页 |
·荧光小球样品制作 | 第112-113页 |
·超分辨成像参数探索 | 第113-114页 |
·荧光小球漂白成像 | 第114-118页 |
·Atto 488 成像结果 | 第114-116页 |
·结果分析 | 第116-117页 |
·Alexa 405 荧光小球成像结果 | 第117-118页 |
·成像结果分析 | 第118页 |
·细胞微管成像 | 第118-124页 |
·Alexa405 标记细胞微管样品制作 | 第118-119页 |
·Alexa405 细胞微管成像结果 | 第119-120页 |
·成像结果分析 | 第120-121页 |
·Atto488 标记的细胞微管成像 | 第121-122页 |
·Alexa 555 标记的细胞微管成像 | 第122-123页 |
·Alexa 555 细胞微管成像结果 | 第123-124页 |
·成像结果分析 | 第124页 |
·荧光小球双色标记荧光漂白成像 | 第124-127页 |
·样品制作 | 第124-126页 |
·荧光小球双色荧光漂白成像 | 第126页 |
·成像结果分析 | 第126-127页 |
·细胞微管双色成像 | 第127-130页 |
·样品制作 | 第127-129页 |
·Alexa405 细胞微管成像结果 | 第129页 |
·成像结果分析 | 第129-130页 |
·荧光小球二维荧光漂白超分辨 | 第130-131页 |
·数据处理方法 | 第130-131页 |
·结论 | 第131-133页 |
参考文献 | 第133-137页 |
第七章 总结与展望 | 第137-139页 |
攻读博士期间发表论文 | 第139-141页 |
致谢 | 第141-142页 |