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海洋球石藻(Emiliania huxleyi)遗传转化系统的建立及初步功能分析

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第1章 引言第14-34页
   ·海洋球石藻第14页
   ·海洋球石藻病毒第14-15页
   ·神经酰胺在应用领域的研究概况第15-21页
     ·神经酰胺简介第15-17页
     ·神经酰胺的应用第17-19页
     ·神经酰胺的市场现状及发展前景第19页
     ·神经酰胺的主要来源第19-20页
     ·神经酰胺常用检测方法第20-21页
   ·球石藻病毒对宿主神经酰胺合成代谢的调控第21-28页
     ·球石藻病毒与宿主间的基因横向转移第21-23页
     ·球石藻病毒基因组特点及其与神经酰胺代谢相关的功能基因第23-26页
     ·球石藻中神经酰胺类物质的累积机理及其特点第26-28页
   ·真核微藻的遗传转化第28-32页
     ·选择标记第28-29页
     ·启动子第29-30页
     ·增强子第30-31页
     ·真核微藻的遗传转化方法第31-32页
     ·微藻基因工程应用现状及前景第32页
   ·本论文的研究目的与意义第32-34页
第2章 海洋球石藻抗生素抗性分析及选择标记筛选第34-48页
   ·材料与方法第35-37页
     ·实验藻种第35页
     ·实验试剂第35页
     ·实验仪器第35页
     ·海洋球石藻的培养方法第35页
     ·液体培养中海洋球石藻对7种抗生素敏感性的测定第35-36页
     ·固体培养中海洋球石藻对抗生素敏感性的验证第36-37页
   ·实验结果第37-45页
     ·氨苄青霉素对海洋球石藻生长的影响第37-38页
     ·卡那霉素对海洋球石藻生长的影响第38-39页
     ·G418对海洋球石藻生长的影响第39-40页
     ·氯霉素对海洋球石藻生长的影响第40-41页
     ·链霉素对海洋球石藻生长的影响第41-42页
     ·新生霉素对海洋球石藻生长的影响第42-43页
     ·嘌呤霉素对海洋球石藻生长的影响第43-44页
     ·草铵膦对海洋球石藻生长的影响第44-45页
   ·分析与讨论第45-46页
   ·本章小结第46-48页
第3章 海洋球石藻真核表达载体的构建及电击转化方法的建立第48-78页
   ·材料与方法第49-64页
     ·实验藻种第49页
     ·实验主要试剂、菌种和载体第49-50页
     ·实验主要仪器第50-51页
     ·绿色荧光蛋白gfp基因的扩增第51-54页
     ·海洋球石藻fcp基因的扩增第54-55页
     ·抗G418抗性基因neo的扩增第55-57页
     ·海洋球石藻真核表达载体的构建第57-60页
     ·海洋球石藻电转化方法的建立第60-61页
     ·转化细胞的检测第61-64页
   ·实验结果第64-73页
     ·海洋球石藻真核表达载体相关元件基因的克隆第64-66页
     ·海洋球石藻双元真核表达载体的构建第66-69页
     ·电击法共转化球石藻的结果第69-73页
   ·分析与讨论第73-77页
     ·海洋球石藻真核表达载体的综合评价第73-76页
     ·海洋球石藻电击转化效率的影响因素第76-77页
   ·本章小结第77-78页
第4章 海洋球石藻病毒丝氨酸棕榈酰转移酶催化亚基LCB2对宿主细胞神经酰胺合成的影响第78-96页
   ·材料与方法第79-85页
     ·实验藻种、病毒株第79页
     ·实验主要试剂、菌种和载体第79页
     ·实验主要仪器第79-80页
     ·Eh V99B1丝氨酸棕榈酰转移酶催化亚基LCB2基因的克隆第80-81页
     ·重组质粒p UC18-fcp-neo-LCB2的构建第81-82页
     ·含有Eh V99B1-LCB2基因的海洋球石藻基因工程藻株的构建第82-83页
     ·电转化细胞的PCR检测第83页
     ·高效液相色谱法(HPLC)检测海洋球石藻神经酰胺类物质的含量第83-85页
   ·实验结果第85-92页
     ·Eh V99B1-LCB2基因的扩增及克隆第85-86页
     ·重组质粒p UC18-fcp-neo-LCB2的构建及鉴定第86-87页
     ·电转化结果第87-90页
     ·病毒LCB2对球石藻神经酰胺含量的影响第90-92页
   ·分析与讨论第92-95页
   ·本章小结第95-96页
第5章 结论与展望第96-98页
   ·本论文的主要结论第96-97页
   ·本论文的创新点第97页
   ·本论文的研究展望第97-98页
致谢第98-99页
参考文献第99-111页
在学期间发表的学术论文第111页

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