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沙蚕活性成分分离纯化与抗肿瘤活性评价

中文摘要第1-4页
Abstract第4-9页
主要符号表第9-10页
第一章 引言第10-27页
   ·沙蚕第10-12页
     ·沙蚕简介第10-11页
     ·沙蚕研究现状第11-12页
   ·海洋生物抗肿瘤活性物质第12-21页
     ·研究进展第13-17页
     ·海洋天然抗癌化合物种类第17-19页
     ·常用分离纯化方法及活性筛选技术第19-21页
   ·癌细胞的凋亡与分化第21-25页
     ·癌细胞凋亡过程与机理第21-22页
       ·线粒体途径第21-22页
       ·死亡受体途径第22页
     ·药物诱导恶性黑色素瘤细胞凋亡机理研究第22-23页
     ·药物对肿瘤细胞的诱导分化作用第23-25页
   ·本课题的主要研究内容与创新点第25-27页
     ·本课题的研究背景及立论依据第25-26页
     ·本课题的主要研究内容第26页
     ·本课题的主要创新点第26-27页
第二章 沙蚕活性物质的提取及其抗肿瘤活性评价第27-38页
   ·实验材料与仪器第27-29页
     ·实验材料与试剂第27页
     ·主要仪器设备第27-28页
     ·常用溶剂配制第28-29页
   ·实验方法第29-32页
     ·沙蚕萃取物的制备第29页
       ·沙蚕的冷冻干燥第29页
       ·沙蚕的有机溶剂萃取物的制备第29页
     ·细胞培养第29-31页
       ·细胞的换液与传代第30页
       ·细胞的保种和复苏第30页
       ·细胞计数第30-31页
     ·沙蚕萃取物的抗肿瘤活性评价第31页
       ·2种沙蚕萃取物的母液制备第31页
       ·MTT法检测沙蚕萃取物对不同肿瘤细胞的生长抑制作用第31页
     ·统计学分析第31-32页
   ·结果与讨论第32-36页
     ·沙蚕萃取物的制备第32页
     ·两种沙蚕乙醇浸膏萃取物的抗肿瘤活性评价第32-36页
       ·两种沙蚕萃取物对不同肿瘤细胞增殖的抑制作用第32-34页
       ·细胞形态学观察第34-36页
   ·小结第36-38页
第三章 沙蚕萃取物A_2的分离纯化及抗肿瘤活性评价第38-48页
   ·实验材料与仪器第38页
     ·实验材料与试剂第38页
     ·主要仪器设备第38页
     ·常用溶剂配制第38页
   ·实验方法第38-41页
     ·组分A_2的硅胶柱分离第38-39页
       ·硅胶柱装柱(湿法装柱)第38-39页
       ·硅胶柱层析洗脱过程第39页
       ·A_2各分离组分的体外抗肿瘤活性评价第39页
     ·制备型HPLC分离第39-40页
       ·制备型HPLC分离过程第39-40页
       ·制备型HPLC分离各组分的体外抗肿瘤活性评价第40页
     ·制备型HPLC分离组分的HPLC-MS分析第40页
     ·统计学分析第40-41页
   ·结果与讨论第41-47页
     ·沙蚕萃取物A_2的硅胶柱层析第41-42页
     ·萃取物A_2硅胶柱各分离组分的抗肿瘤活性评价第42-44页
     ·组分B4的制备型HPLC分离第44-45页
     ·B_4经制备型HPCL分离各组分的抗肿瘤活性评价第45-46页
     ·组分C_(44)的HPLC-MS分析第46-47页
   ·小结第47-48页
第四章 组分C_(44)对人黑色素瘤细胞A375作用机制探讨第48-62页
   ·实验材料与仪器第48页
     ·实验材料与试剂第48页
     ·主要仪器设备第48页
     ·常用溶剂配制第48页
   ·实验方法第48-51页
     ·MTT法检测组分C_(44)对A375细胞增殖的抑制作用第48-49页
     ·AO/EB染色第49页
     ·PI染色检测细胞周期分布第49页
     ·Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡第49-50页
     ·Caspase 3酶活性检测第50-51页
     ·黑色素含量测定与相对酪氨酸酶活力检测第51页
   ·结果与讨论第51-61页
     ·组分C_(44)对A375细胞增殖的抑制作用第51-52页
     ·AO/EB染色观察第52-54页
     ·PI染色检测细胞周期分布第54-56页
     ·Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡第56-58页
     ·Caspase 3酶活性检测第58-59页
     ·黑色素含量与相对酪氨酸酶活性检测第59-61页
   ·小结第61-62页
第五章 沙蚕提取物的其他药效实验研究第62-72页
   ·实验材料与仪器第62-63页
     ·实验材料与试剂第62页
     ·实验仪器第62-63页
   ·实验方法第63-66页
     ·样品制备第63页
       ·沙蚕的冷冻干燥第63页
       ·沙蚕提取物的制备第63页
     ·剂量设计与样品溶液配制第63页
     ·抗疲劳试验第63-64页
       ·对小鼠转棒试验的影响第63-64页
       ·对小鼠游泳耐力的影响第64页
     ·免疫调节作用第64-65页
       ·二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型变态反应(DTH)第64页
       ·小鼠碳廓清试验和免疫器官/体重比值测定第64-65页
       ·血清溶血素的测定第65页
       ·ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验第65页
     ·抗炎作用第65-66页
     ·抗哮喘作用(离体试验)第66页
   ·数据处理第66页
   ·结果与讨论第66-71页
     ·小鼠抗疲劳实验第66-67页
       ·小鼠转棒试验第66-67页
       ·小鼠负重游泳试验第67页
     ·免疫调节作用第67-69页
       ·小鼠迟发型变态反应(只有2种样品)第67-68页
       ·小鼠碳廓清试验和免疫器官/体重比值测定第68页
       ·血清溶血素的测定第68-69页
       ·小鼠脾淋巴细胞转化试验第69页
     ·抗炎作用第69-70页
     ·抗哮喘作用第70-71页
   ·小结第71-72页
结论第72-73页
建议第73-74页
参考文献第74-81页
致谢第81-82页
个人简历第82页

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