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缺血心肌微血管内皮细胞(CMECs)血管生成核心microRNA的筛选及益气活血中药干预作用的研究

提要第1-5页
Abstract第5-9页
英汉缩略语名词对照第9-15页
引言第15-17页
第一部分 实验研究第17-79页
 实验一 大鼠缺血心肌微血管内皮细胞(CMECs)的培养和鉴定第17-30页
  1 实验材料第17-18页
   ·实验动物第17页
   ·主要仪器第17-18页
   ·主要试剂第18页
  2 实验方法第18-21页
   ·大鼠心肌缺血模型制作第18-19页
   ·大鼠缺血 CMECs 的培养第19-20页
   ·大鼠缺血 CMECs 的传代培养第20页
   ·缺血 CMECs 的鉴定第20-21页
   ·统计学分析第21页
  3 结果第21-26页
   ·大鼠心肌缺血模型制作结果第21-23页
   ·心肌缺血模型大鼠生长状况第23页
   ·缺血 CMECs 的形态特点及生长特征第23-24页
   ·缺血原代与传代CMECs及正常原代CMECs形态学特征第24页
   ·不同时间点缺血模型细胞生长状况第24-25页
   ·Ⅷ因子、CD31 相关抗原免疫细胞化学染色鉴定第25-26页
  4 讨论第26-30页
 实验二 大鼠缺血心肌微血管内皮细胞(CMECs)血管新生的生物学特征第30-46页
  1 实验材料第30-32页
   ·实验动物第30页
   ·主要仪器第30-31页
   ·主要试剂第31页
   ·主要试剂的配制第31-32页
  2 实验方法第32-36页
   ·大鼠心肌缺血模型制作第32页
   ·大鼠 CMECs 的培养第32页
   ·实验分组第32页
   ·CMECs 生物学特征第32-33页
   ·real-time PCR检测ERK和p53 mRNA的表达第33-36页
   ·统计学分析第36页
  3 结果第36-42页
   ·CMECs 生长曲线及增殖情况第36-37页
   ·CMECs 迁移及迁移率情况第37-39页
   ·CMECs 管腔样结构形成及成管率情况第39-41页
   ·p53 和 ERK mRNA 的表达情况第41-42页
  4 讨论第42-46页
 实验三 大鼠缺血心肌微血管内皮细胞(CMECs)microRNA 组学研究第46-79页
  1 实验材料第46-50页
   ·实验动物第46页
   ·主要仪器第46-47页
   ·主要试剂第47-48页
   ·主要试剂的配制第48-50页
  2 实验方法第50-60页
   ·大鼠心肌缺血模型制作第50页
   ·大鼠 CMECs 的培养第50页
   ·实验分组第50页
   ·microRNA 芯片检测第50-54页
     ·样本总 RNA 提取第50-51页
     ·microRNA 标记第51-52页
     ·浓缩标记样品第52-53页
     ·microRNA 芯片杂交第53-54页
     ·图像扫描分析第54页
   ·核心 microRNA 的筛选第54页
   ·real-time PCR 验证核心 microRNA第54-55页
   ·生物信息学方法预测 microRNA 靶基因第55页
   ·real-time PCR 检测靶基因及其信号通路的基因第55-57页
   ·Western-blot 检测靶基因及其信号通路上基因的蛋白表达第57-59页
     ·细胞总蛋白提取第57页
     ·BCA 法测定蛋白浓度第57-58页
     ·Western-blot 检测第58-59页
   ·统计学分析第59-60页
  3 结果第60-73页
   ·microRNAs 在缺血 CMECs 血管生成过程中的差异表达第60-67页
     ·总 RNA 质量检测结果第60-61页
     ·microRNA 芯片扫描结果第61-63页
     ·microRNA 在 CMECs 血管生成中的差异表达第63-65页
     ·real-time PCR 验证核心 microRNA 结果第65-67页
   ·mir-223-3p 靶基因预测及验证结果第67-71页
     ·mir-223-3p 靶基因的预测第67页
     ·mir-223-3p 靶基因的分析结果第67-70页
     ·靶基因 Rps6kb1 的验证结果第70-71页
   ·Rps6kb1/HIF-1 信号通路上基因和蛋白的表达结果第71-73页
  4 讨论第73-79页
第二部分 临床研究 益气活血中药对急性心肌梗死(AMI)患者血浆 mir-223-3p 的影响第79-93页
 1 资料与方法第79-82页
   ·受试者选择第79-81页
     ·病例来源第79页
     ·诊断标准第79-80页
     ·纳入标准第80页
     ·排除标准第80-81页
   ·随机对照方法第81页
   ·治疗药物第81页
     ·对照组第81页
     ·治疗组第81页
   ·观察指标第81-82页
     ·一般资料第81页
     ·血浆 mir-223-3p 表达第81-82页
   ·统计学分析第82页
 2 结果第82-88页
   ·一般资料分析第82-86页
   ·治疗前后 mir-223-3p 表达比较第86页
   ·治疗后两组 mir-223-3p 表达比较第86-88页
 3 讨论第88-93页
结语第93-94页
参考文献第94-104页
综述第104-115页
 参考文献第110-115页
发表论文第115-116页
参加课题第116-117页
致谢第117-119页
附录第119-127页
详细摘要第127-134页

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