| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 英文缩略语表 | 第15-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-28页 |
| 1 单宁的研究现状 | 第16-18页 |
| 2 单宁与蛋白质作用的研究现状及进展 | 第18-26页 |
| ·单宁与蛋白质作用的理论 | 第20-23页 |
| ·影响单宁-蛋白质结合的因素 | 第20页 |
| ·单宁-蛋白质反应的作用力 | 第20-21页 |
| ·单宁与蛋白质的结合理论 | 第21-23页 |
| ·单宁与蛋白质相互作用的研究进展 | 第23-26页 |
| ·荧光光谱法 | 第24页 |
| ·紫外-可见吸收光谱法 | 第24-25页 |
| ·红外光谱法 | 第25页 |
| ·共振光散射光谱 | 第25-26页 |
| ·圆二色谱法 | 第26页 |
| ·其他研究方法 | 第26页 |
| 3 本论文研究内容及其意义 | 第26-28页 |
| 第二章 柿子单宁与牛血清白蛋白相互作用的研究 | 第28-53页 |
| 1 材料与方法 | 第28-33页 |
| ·实验材料和仪器设备 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-33页 |
| ·柿子单宁与BSA的结合反应 | 第29-32页 |
| ·标准曲线绘制 | 第29-30页 |
| ·不同级分单宁(HMWT、PT40)与BSA结合能力的测定 | 第30-31页 |
| ·BSA浓度对结合反应的影响 | 第31页 |
| ·单宁浓度对结合反应的影响 | 第31页 |
| ·pH对单宁与BSA反应的影响 | 第31页 |
| ·时间对单宁与BSA反应的影响 | 第31页 |
| ·温度对单宁与BSA反应的影响 | 第31-32页 |
| ·PT40对BSA的荧光猝灭作用 | 第32页 |
| ·PT40与BSA作用的紫外吸收光谱分析 | 第32页 |
| ·相互作用对BSA构象的影响 | 第32-33页 |
| ·傅立叶变换衰减全反射红外差谱分析(FT-ATR-IR) | 第32页 |
| ·圆二色谱分析(CD) | 第32-33页 |
| ·PT40与BSA相互作用的共振散射光谱分析 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-52页 |
| ·BSA与不同级分单宁(HMWT、PT40)的结合反应 | 第33-37页 |
| ·BSA浓度对结合反应的影响 | 第33-34页 |
| ·单宁浓度对结合反应的影响 | 第34页 |
| ·pH值对单宁与BSA反应的影响 | 第34-35页 |
| ·时间对单宁与BSA反应的影响 | 第35-36页 |
| ·温度对单宁与BSA反应的影响 | 第36-37页 |
| ·PT40对BSA的荧光猝灭作用 | 第37-44页 |
| ·PT40对BSA荧光光谱的影响 | 第37-38页 |
| ·荧光猝灭机制 | 第38-40页 |
| ·PT40与BSA结合位点数 | 第40-41页 |
| ·PT40与BSA结合的热力学性质 | 第41-43页 |
| ·PT40与BSA作用距离的计算 | 第43-44页 |
| ·PT40与BSA作用的紫外吸收光谱分析 | 第44-45页 |
| ·相互作用对BSA构象的影响 | 第45-49页 |
| ·同步荧光法 | 第45-46页 |
| ·傅立叶变换衰减全反射红外差谱分析(FT-ATR-IR) | 第46-48页 |
| ·CD分析 | 第48-49页 |
| ·PT40与BSA作用的共振光散射光谱 | 第49-52页 |
| 3 结论 | 第52-53页 |
| 第三章 柿子单宁与蛇毒磷脂酶A_2的相互作用的研究 | 第53-80页 |
| 1 材料与方法 | 第54-58页 |
| ·实验材料和仪器设备 | 第54-55页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·仪器设备 | 第54-55页 |
| ·试验方法 | 第55-58页 |
| ·柿子单宁与PLA_2的结合反应 | 第55-56页 |
| ·不同级分单宁(HMWT、PT40)与PLA_2结合能力的测定 | 第55页 |
| ·沉淀中各级分单宁含量的测定 | 第55页 |
| ·PLA_2的浓度对结合反应的影响 | 第55页 |
| ·单宁浓度对结合反应的影响 | 第55-56页 |
| ·时间对单宁与PLA_2反应的影响 | 第56页 |
| ·温度对单宁与PLA_2反应的影响 #4I | 第56页 |
| ·pH值对单宁与PLA_2反应的影响 | 第56页 |
| ·结合反应对PLA_2活力的影响 | 第56-57页 |
| ·PLA_2活性的测定 | 第56-57页 |
| ·不同量PT40对PLA_2酶活力的影响 | 第57页 |
| ·PT40对PLA_2的荧光猝灭作用 | 第57页 |
| ·PT40与PLA_2作用的紫外吸收光谱分析 | 第57页 |
| ·相互作用对PLA_2构象的影响 | 第57-58页 |
| ·傅立叶变换衰减全反射红外差谱分析(FT-ATR-IR) | 第57-58页 |
| ·圆二色谱分析(CD) | 第58页 |
| ·PT40与PLA_2相互作用的共振散射光谱分析 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-78页 |
| ·柿子单宁与PLA_2的结合反应 | 第58-63页 |
| ·PLA_2浓度对结合反应的影响 | 第58-59页 |
| ·单宁浓度对结合反应的影响 | 第59-60页 |
| ·时间对单宁与PLA_2反应的影响 | 第60-61页 |
| ·温度对单宁与PLA_2反应的影响 | 第61-62页 |
| ·pH值对单宁与PLA_2反应的影响 | 第62-63页 |
| ·结合反应对PLA_2活力的影响 | 第63页 |
| ·PT40对PLA_2的荧光猝灭作用 | 第63-71页 |
| ·PT40对PLA_2荧光光谱的影响 | 第63-65页 |
| ·作用时间对PT40-PLA_2荧光强度的影响 | 第65页 |
| ·荧光猝灭机制 | 第65-67页 |
| ·PT40与PLA_2结合位点数的计算 | 第67-68页 |
| ·PT40与PLA_2结合的热力学性质 | 第68-70页 |
| ·PT40对PLA_2作用距离的计算 | 第70-71页 |
| ·PT40与PLA_2作用的紫外吸收光谱分析 | 第71-72页 |
| ·相互作用对PLA_2构象的影响 | 第72-76页 |
| ·同步荧光法 | 第72-74页 |
| ·傅立叶变换衰减全反射红外差谱分析(FT-ATR-IR) | 第74-75页 |
| ·CD分析 | 第75-76页 |
| ·PT40与PLA_2作用的共振光散射光谱 | 第76-78页 |
| 3 结论 | 第78-80页 |
| 第四章 PLA_2、BSA对柿子单宁竞争结合作用研究 | 第80-91页 |
| 1 材料与方法 | 第80-85页 |
| ·实验材料与设备 | 第80-82页 |
| ·实验材料 | 第80-81页 |
| ·主要试剂 | 第81页 |
| ·仪器及设备 | 第81-82页 |
| ·实验方法 | 第82-85页 |
| ·蓝BSA标记法 | 第82-84页 |
| ·蓝BSA的制备 | 第82页 |
| ·蓝BSA含量测定 | 第82-83页 |
| ·竞争反应 | 第83-84页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第84页 |
| ·竞争反应中PLA_2活力变化 | 第84-85页 |
| ·PLA_2活性的测定 | 第84页 |
| ·向BSA-PT40混合液中加入不同量竞争蛋白PLA_2后上清液中PLA_2活力的变化 | 第84-85页 |
| ·向PLA_2-PT40混合液中加入不同量竞争蛋白BSA后上清液中PLA_2活力的变化 | 第85页 |
| 2 结果与分析 | 第85-90页 |
| ·蓝BSA标记法 | 第85-87页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第87-88页 |
| ·竞争反应中PLA_2活力变化 | 第88-90页 |
| 3 结论 | 第90-91页 |
| 第五章 PLA_2的化学修饰及对其结合单宁能力、活性及毒性的影响 | 第91-106页 |
| 1 材料与方法 | 第92-98页 |
| ·实验材料和仪器设备 | 第92-93页 |
| ·实验材料 | 第92页 |
| ·主要试剂 | 第92-93页 |
| ·仪器设备 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-98页 |
| ·化学修饰 | 第93-94页 |
| ·组氨酸残基的化学修饰 | 第93-94页 |
| ·赖氨酸残基的化学修饰 | 第94页 |
| ·PLA_2修饰率的测定 | 第94-95页 |
| ·化学修饰对PLA_2酶活力的影响 | 第95页 |
| ·化学修饰PLA_2对其单宁结合能力的影响 | 第95页 |
| ·SDS-PAGE和半干分子印迹法分析 | 第95-96页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第95页 |
| ·半干分子印迹法分析 | 第95-96页 |
| ·柿子单宁与PLA_2作用前后及氨基酸残基修饰对PLA_2致死毒性的影响 | 第96-97页 |
| ·PLA_2的急性毒性试验 | 第96页 |
| ·赖氨酸残基化学修饰对PLA_2致死毒性的影响 | 第96页 |
| ·组氨酸残基化学修饰对PLA_2致死毒性的影响 | 第96页 |
| ·与柿子单宁作用后PLA_2的急性毒性试验 | 第96-97页 |
| ·小鼠腹腔注射给药的LD_(50)值测定 | 第97页 |
| ·溶血实验 | 第97页 |
| ·PLA_2诱导水肿反应 | 第97-98页 |
| ·统计学处理 | 第98页 |
| 2 结果与分析 | 第98-105页 |
| ·PLA_2修饰率及酶活力的变化 | 第98-99页 |
| ·化学修饰PLA_2对PT40结合能力的影响 | 第99-100页 |
| ·SDS-PAGE和半干分子印迹法分析 | 第100-101页 |
| ·柿子单宁与PLA_2作用前后及氨基酸残基修饰对PLA_2致死毒性的影响 | 第101-103页 |
| ·PLA_2的急性毒性试验 | 第101-102页 |
| ·化学修饰对PLA_2致死毒性的影响 | 第102页 |
| ·与柿子单宁作用后PLA_2的急性毒性试验 | 第102-103页 |
| ·溶血活性 | 第103-104页 |
| ·炎性反应 | 第104-105页 |
| 3 结论 | 第105-106页 |
| 第六章 结论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 攻读学位期间发表学术论文 | 第116页 |
