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呼吸链复合体Ⅱ和复合体Ⅲ抑制剂的筛选及动力学研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第一章 研究背景介绍第14-58页
   ·琥珀酸-细胞色素c氧化还原酶研究概况第14-17页
     ·线粒体及线粒体呼吸链第14-15页
     ·线粒体呼吸链各组分的功能及相互之间的关系第15-16页
     ·琥珀酸-细胞色素c氧化还原酶是复合体Ⅱ和Ⅲ的复合酶第16-17页
   ·线粒体呼吸链复合体Ⅱ研究进展第17-23页
     ·复合体Ⅱ的组成及生理功能第17-18页
     ·复合体Ⅱ的结构生物学研究第18-22页
     ·复合体Ⅱ中醌的作用机制及结合位点第22-23页
   ·线粒体呼吸链复合体Ⅱ抑制剂研究进展第23-32页
     ·复合体Ⅱ的经典抑制剂及作用第23-24页
     ·复合体Ⅱ杀菌剂第24-32页
   ·线粒体呼吸链复合体Ⅲ研究进展第32-44页
     ·复合体Ⅲ的生理功能及地位第33页
     ·复合体Ⅲ的组成及其Q循环(Q-cycle)机制第33-35页
     ·复合体Ⅲ的结构生物学研究第35-40页
     ·复合体Ⅲ底物和抑制剂的结合位点第40-44页
   ·线粒体复合体Ⅲ抑制剂研究进展第44-54页
     ·复合体Ⅲ抑制剂的作用方式第45-46页
     ·复合体Ⅲ抑制剂的经典类型第46-47页
     ·复合体Ⅲ杀菌剂第47-54页
   ·本课题的研究内容和研究意义第54-58页
第二章 琥珀酸-细胞色素C氧化还原酶的提取、纯化及鉴定第58-75页
   ·引言第58-59页
   ·实验材料第59-62页
     ·主要材料、化学药品及试剂第59-60页
     ·实验仪器第60页
     ·蛋白提纯所需缓冲液及试剂第60-61页
     ·聚丙烯酰胺凝胶的配制及所需电泳缓冲液第61-62页
     ·蛋白结晶试剂第62页
   ·实验方法第62-68页
     ·猪心线粒体的分离及心肌试剂的制备第63-64页
     ·分级分离制备呼吸链组分第64页
     ·纯化琥珀酸-细胞色素c氧化还原酶第64页
     ·蛋白浓度测定第64-65页
     ·蛋白酶光谱表征和纯度测定第65-66页
     ·蛋白酶结晶初试第66-68页
   ·实验结果及讨论第68-74页
     ·纯化蛋白过程中的关键步骤、现象及结果第68-70页
     ·蛋白浓度测定第70-71页
     ·蛋白纯度鉴定第71-72页
     ·蛋白结晶初试结果与讨论第72-74页
   ·本章小结第74-75页
第三章 SCR、SQR及QCR活性测定体系的建立第75-92页
   ·引言第75页
   ·实验材料第75-76页
     ·实验所需药品及试剂第75-76页
     ·实验仪器第76页
   ·实验方法第76-83页
     ·底物准备第76-77页
     ·底物定量第77页
     ·紫外检测法测定SCR、SQR及QCR的活性第77-78页
     ·比活力的计算及动力学参数的拟合第78-79页
     ·pH、EDTA浓度及不同缓冲液对酶活力的影响第79-80页
     ·其他活性测定体系的探索和比较第80-83页
   ·实验结果及讨论第83-91页
     ·紫外检测法测定结果第83-87页
     ·酶标仪检测法第87页
     ·等温微量热检测法——使用新方法进行活性测定的探索第87-91页
   ·本章小结第91-92页
第四章 复合体Ⅱ(SQR)抑制剂的筛选及动力学研究第92-113页
   ·引言第92页
   ·实验材料第92-97页
     ·复合体Ⅱ(SQR)商品化杀菌剂第92-93页
     ·本课题组新合成的复合体Ⅱ抑制剂第93-96页
     ·抑制动力学实验所使用的主要材料、试剂及仪器设备第96-97页
   ·实验方法第97-102页
     ·新型SQR抑制剂设计方法介绍第97页
     ·抑制剂IC_(50)的测定第97-98页
     ·几种常见抑制机制的区分及相关动力学常数的测定第98-101页
     ·部分非竞争抑制剂抑制常数的测定方法第101-102页
   ·实验结果与讨论第102-111页
     ·代表性复合体Ⅱ商品化抑制剂的抑制动力学第102-106页
     ·新合成复合体Ⅱ抑制剂的生物活性第106-111页
   ·本章小结第111-113页
第五章 复合体Ⅲ(QCR)抑制剂的筛选及动力学研究第113-168页
   ·引言第113-114页
   ·实验材料第114-118页
     ·复合体Ⅲ(QCR)商品化杀菌剂第114页
     ·本课题组新合成的复合体Ⅲ抑制剂第114-117页
     ·抑制动力学实验所使用的主要材料、试剂及仪器设备第117-118页
   ·实验方法第118-124页
     ·新型QCR抑制剂设计方法介绍第118-119页
     ·抑制剂IC_(50)的测定第119页
     ·经典类型抑制剂抑制作用类型及抑制常数的测定第119-120页
     ·时间依赖型抑制剂抑制作用类型及抑制常数的测定第120-123页
     ·采用紫外可见光谱分析抑制剂对酶的影响第123-124页
     ·抗疟疾活性实验第124页
   ·实验结果与讨论第124-166页
     ·代表性复合体Ⅲ商品化抑制剂的抑制动力学第124-133页
     ·噁唑烷二酮系列化合物的生测活性及代表性化合物的抑制动力学第133-140页
     ·基于药效团连接碎片虚拟筛选的方法设计的新化合物的抑制动力学第140-143页
     ·含二苯甲酮结构的新型Strobilurins类衍生物的抑制动力学第143-148页
     ·含喹喔啉结构的新型Strobilurins类衍生物的抑制动力学第148-164页
     ·紫外可见光谱分析结果第164-165页
     ·抗疟疾活性实验结果第165-166页
   ·本章小结第166-168页
第六章 全文总结及研究展望第168-173页
参考文献第173-186页
附录 符号说明第186-187页
在学期间的研究成果及发表论文第187页
研究者贡献第187-188页
致谢第188页

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