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人NSCLC转移相关microRNAs筛选及功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
缩略语/符号说明第13-16页
前言第16-23页
 研究现状第16-21页
 研究目的和方法第21-23页
一、与NSCLC转移相关microRNAs的筛选和验证第23-51页
   ·材料和方法第23-33页
     ·材料第23-26页
     ·实验方法第26-32页
     ·统计学处理第32-33页
   ·结果第33-48页
     ·NL9980/L9981细胞总RNA的定量及质控第33-35页
     ·NL9980/L9981细胞株差异表达miRNAs第35-38页
     ·肺癌组织和转移淋巴结总RNA定量和完整性分析第38-43页
     ·筛选肺癌细胞系和肺癌组织中共同差异表达的microRNAs第43-44页
     ·差异表达microRNAs的real-time PCR验证第44-48页
   ·讨论第48-50页
     ·MicroRNA芯片筛选与肺癌转移相关的查差异表达miRNAs第48-49页
     ·Real-time PCR对芯片结果的验证第49-50页
   ·小结第50-51页
二、miR-132抑制肺癌细胞侵袭转移的功能研究第51-88页
   ·材料和方法第51-73页
     ·材料第51-55页
     ·实验方法第55-72页
     ·统计学处理第72-73页
   ·结果第73-84页
     ·成功构建miR-132真核表达载体第73-75页
     ·建立稳定过表达miR-132的L9981细胞系第75-78页
     ·荧光原位杂交分析miR-132在肺癌细胞中的分布第78页
     ·miR-132对细胞增殖能力的作用第78-80页
     ·miR-132对细胞迁移能力的影响第80-82页
     ·miR-132对细胞侵袭能力的影响第82-84页
   ·讨论第84-87页
     ·稳定表达成熟miRNA细胞系的建立第84-86页
     ·MiR-132对肺癌细胞的增殖的影响第86页
     ·MiR-132对肺癌细胞L9981的迁移、侵袭能力的影响第86-87页
   ·小结第87-88页
三、miR-132靶基因的预测分析和验证第88-115页
   ·材料和方法第88-101页
     ·材料第88-91页
     ·实验方法第91-100页
     ·统计学处理第100-101页
   ·结果第101-111页
     ·生物信息学预测miR-132的靶基因第101页
     ·成功构建融合MMP16基因3’UTR的pMIR重组质粒第101-104页
     ·成功突变MMP16表达载体3’UTR上种子区靶序列第104页
     ·重组pcDNA3.1(+)-miR-132在HEK293T细胞中过表达miR-132第104-107页
     ·MiR-132抑制融合MMP-16基因3’UTR全长序列的报告基因分析第107-108页
     ·MiR-132能够抑制内源性MMP16的表达第108-111页
   ·讨论第111-114页
     ·靶基因的生物信息学预测第111页
     ·融合靶基因3’UTR荧光素报告载体构建第111-112页
     ·报告基因分析第112-113页
     ·MiR-132对MMP16蛋白内源性调控作用第113-114页
   ·小结第114-115页
全文总结第115-117页
 本研究结果如下第115-116页
 结论第116-117页
参考文献第117-134页
发表论文和参加科研情况说明第134-135页
综述 microRNA与肺癌研究进展第135-152页
 综述参考文献第143-152页
致谢第152页

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