摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
缩略语/符号说明 | 第13-16页 |
前言 | 第16-23页 |
研究现状 | 第16-21页 |
研究目的和方法 | 第21-23页 |
一、与NSCLC转移相关microRNAs的筛选和验证 | 第23-51页 |
·材料和方法 | 第23-33页 |
·材料 | 第23-26页 |
·实验方法 | 第26-32页 |
·统计学处理 | 第32-33页 |
·结果 | 第33-48页 |
·NL9980/L9981细胞总RNA的定量及质控 | 第33-35页 |
·NL9980/L9981细胞株差异表达miRNAs | 第35-38页 |
·肺癌组织和转移淋巴结总RNA定量和完整性分析 | 第38-43页 |
·筛选肺癌细胞系和肺癌组织中共同差异表达的microRNAs | 第43-44页 |
·差异表达microRNAs的real-time PCR验证 | 第44-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
·MicroRNA芯片筛选与肺癌转移相关的查差异表达miRNAs | 第48-49页 |
·Real-time PCR对芯片结果的验证 | 第49-50页 |
·小结 | 第50-51页 |
二、miR-132抑制肺癌细胞侵袭转移的功能研究 | 第51-88页 |
·材料和方法 | 第51-73页 |
·材料 | 第51-55页 |
·实验方法 | 第55-72页 |
·统计学处理 | 第72-73页 |
·结果 | 第73-84页 |
·成功构建miR-132真核表达载体 | 第73-75页 |
·建立稳定过表达miR-132的L9981细胞系 | 第75-78页 |
·荧光原位杂交分析miR-132在肺癌细胞中的分布 | 第78页 |
·miR-132对细胞增殖能力的作用 | 第78-80页 |
·miR-132对细胞迁移能力的影响 | 第80-82页 |
·miR-132对细胞侵袭能力的影响 | 第82-84页 |
·讨论 | 第84-87页 |
·稳定表达成熟miRNA细胞系的建立 | 第84-86页 |
·MiR-132对肺癌细胞的增殖的影响 | 第86页 |
·MiR-132对肺癌细胞L9981的迁移、侵袭能力的影响 | 第86-87页 |
·小结 | 第87-88页 |
三、miR-132靶基因的预测分析和验证 | 第88-115页 |
·材料和方法 | 第88-101页 |
·材料 | 第88-91页 |
·实验方法 | 第91-100页 |
·统计学处理 | 第100-101页 |
·结果 | 第101-111页 |
·生物信息学预测miR-132的靶基因 | 第101页 |
·成功构建融合MMP16基因3’UTR的pMIR重组质粒 | 第101-104页 |
·成功突变MMP16表达载体3’UTR上种子区靶序列 | 第104页 |
·重组pcDNA3.1(+)-miR-132在HEK293T细胞中过表达miR-132 | 第104-107页 |
·MiR-132抑制融合MMP-16基因3’UTR全长序列的报告基因分析 | 第107-108页 |
·MiR-132能够抑制内源性MMP16的表达 | 第108-111页 |
·讨论 | 第111-114页 |
·靶基因的生物信息学预测 | 第111页 |
·融合靶基因3’UTR荧光素报告载体构建 | 第111-112页 |
·报告基因分析 | 第112-113页 |
·MiR-132对MMP16蛋白内源性调控作用 | 第113-114页 |
·小结 | 第114-115页 |
全文总结 | 第115-117页 |
本研究结果如下 | 第115-116页 |
结论 | 第116-117页 |
参考文献 | 第117-134页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第134-135页 |
综述 microRNA与肺癌研究进展 | 第135-152页 |
综述参考文献 | 第143-152页 |
致谢 | 第152页 |