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RNAi介导抗RBSDV和SRBSDV转基因水稻的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
图目录第13-14页
英文缩略表第14-15页
第一章 引言第15-26页
   ·水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)第15-19页
     ·RBSDV 寄主范围、症状第15-16页
     ·RBSDV 分类地位及粒子形态第16页
     ·RBSDV 粒子在宿主植物或飞虱体内分布第16-17页
     ·RBSDV 检测第17页
     ·RBSDV 基因组结构及其功能第17-19页
   ·南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)第19-22页
     ·SRBSDV 的发生及危害第19-20页
     ·SRBSDV 的寄主范围、传播介体及传播方式第20-21页
     ·SRBSDV 的病症第21页
     ·SRBSDV 的防治策略第21-22页
     ·SRBSDV 基因组结构及其功能第22页
   ·RNAi 技术在植物抗病毒基因工程中的应用研究第22-25页
     ·RNAi 现象的发现第22-23页
     ·RNAi 的特点第23-24页
     ·RNAi 的作用机制第24页
     ·RNAi 技术在植物抗病毒中的应用第24-25页
   ·转基因植物研究进展第25页
   ·研究目的意义第25-26页
第二章 RNAi 靶序列的设计第26-32页
   ·生物信息学分析软件及方法第26页
   ·结果分析第26-31页
     ·S1 RNAi 片段的选取第26-28页
     ·S2 RNAi 片段的选取第28页
     ·S3 RNAi 片段的选取第28-29页
     ·S4 RNAi 片段的选取第29页
     ·S5 RNAi 片段的选取第29页
     ·S6 RNAi 片段的选取第29页
     ·S7 RNAi 片段的选取第29页
     ·S8 RNAi 片段的选取第29-30页
     ·S9 RNAi 片段的选取第30页
     ·S10 RNAi 片段的选取第30页
     ·RNAi 靶序列的多价组合第30-31页
   ·本章小结与讨论第31-32页
第三章 RNAi 载体的构建第32-41页
   ·实验材料第32页
     ·实验所用质粒第32页
     ·生化试剂第32页
     ·试剂配制第32页
   ·实验方法第32-36页
     ·RNAi 靶序列的获得及入门载体的构建第32-33页
     ·RNAi tENTRA 入门载体的验证第33页
     ·RNAi tENTRA 入门载体和 pBDL03 目的载体浓度和纯度的检测第33-34页
     ·RNAi tENTRA 入门载体和 pBDL03 目的载体的 LR 反应第34页
     ·LR 反应液的转化第34页
     ·阳性克隆的筛选第34-35页
     ·测序引物设计及序列验证第35-36页
   ·实验结果与分析第36-39页
     ·RNAi 靶序列的获得与验证第36-37页
     ·单克隆菌液 PCR 检测第37-38页
     ·阳性克隆质粒提取及酶切鉴定第38-39页
     ·测序验证第39页
   ·实验小结与讨论第39-41页
第四章 转基因植株的获得第41-43页
   ·实验材料第41页
     ·实验植株第41页
   ·实验方法第41页
     ·农杆菌转化及转基因水稻的获得第41页
   ·实验结果与分析第41-43页
     ·转基因植株的获得与 TaqMan 检测结果第41-43页
第五章 转基因植株的分子检测及抗病性研究第43-64页
   ·实验材料第43-44页
     ·传毒介体第43页
     ·生化试剂第43页
     ·试剂配制第43-44页
   ·实验方法第44-51页
     ·转基因水稻的 PCR 检测第44-45页
     ·转基因水稻的荧光检测第45页
     ·转基因水稻的 Southern blot 检测第45-47页
     ·转基因水稻抗 RBSDV 检测第47-49页
     ·白背飞虱带毒率的检测第49-50页
     ·转基因水稻抗 SRBSDV 检测第50-51页
   ·实验结果第51-63页
     ·转基因水稻的 PCR 检测第51页
     ·转基因水稻的荧光检测第51-52页
     ·转基因水稻的 Southern blot 检测第52-53页
     ·转基因水稻抗 RBSDV 的检测第53-62页
     ·白背飞虱带毒率的检测第62页
     ·转基因水稻抗 SRBSDV 的检测第62-63页
   ·实验小结与讨论第63-64页
第六章 全文结论第64-65页
参考文献第65-71页
附录第71-77页
致谢第77-78页
作者简历第78页

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