| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-19页 |
| 符号说明 | 第19-20页 |
| 第一部分 亮氨酸重复蛋白LRRC33对TLR信号通路的调控 | 第20-60页 |
| 第一章 引言 | 第20-26页 |
| 第一节 TLRs的研究进展 | 第21-24页 |
| ·TLRs的发现 | 第21-22页 |
| ·TLRs的分布和配体特异性 | 第22-23页 |
| ·TLRs的功能 | 第23-24页 |
| 第二节 亮氨酸重复蛋白的研究进展 | 第24页 |
| 第三节 树突细胞的研究进展 | 第24-26页 |
| 第二章 材料和方法 | 第26-40页 |
| 第一节 主要实验仪器 | 第26页 |
| 第二节 细胞系、菌株和质粒 | 第26-27页 |
| ·细胞系 | 第26-27页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·质粒 | 第27页 |
| 第三节 主要实验材料 | 第27-28页 |
| ·培养基和抗生素 | 第27页 |
| ·生物酶 | 第27页 |
| ·分子生物学试剂盒 | 第27页 |
| ·主要生化试剂 | 第27-28页 |
| 第四节 主要溶液配制 | 第28-30页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液 | 第28-29页 |
| ·Western Blot相关溶液 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖电泳相关溶液 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30页 |
| ·缓冲溶液 | 第30页 |
| 第五节 实验方法 | 第30-40页 |
| ·细胞培养 | 第30-31页 |
| ·基因克隆 | 第31-33页 |
| ·检测基因的表达水平 | 第33-36页 |
| ·转染和报告系统检测 | 第36-38页 |
| ·免疫荧光染色分析 | 第38页 |
| ·蛋白质免疫印迹分析 | 第38页 |
| ·酶联免疫吸附检测 | 第38-40页 |
| 第三章 实验结果 | 第40-56页 |
| 第一节 LRRC33的组织分布 | 第40-44页 |
| ·LRRC33在染色体上的分布和蛋白结构 | 第40页 |
| ·LRRC33的组织分布情况 | 第40-42页 |
| ·LRRC33在不同细胞中的表达情况 | 第42-44页 |
| 第二节 LRRC33通过与TLRs相互作用来抑制其介导的NF-κB的激活 | 第44-49页 |
| ·生物信息学分析LRRC33与TLRs的相似性 | 第44-45页 |
| ·LRRC33与介导TLR信号通路的受体和辅助体的相互作用 | 第45-49页 |
| 第三节 LRRC33胞外的LRRs序列介导了与TLRs的相互作用和其抑制活性 | 第49-52页 |
| ·LRRC33的胞外区介导了其抑制作用 | 第49-51页 |
| ·胞外区不同LRRs在LRRC33抑制功能中的影响 | 第51-52页 |
| 第四节 沉默LRRC33的表达可以增强NF-κB和JNK的活性 | 第52-56页 |
| 第四章 讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 结论、创新点和展望 | 第58-60页 |
| 第二部分 泛素连接酶复合体介导Smoothened泛素化的研究 | 第60-114页 |
| 第一章 引言 | 第60-69页 |
| 第一节 Hh信号通路的研究进展 | 第61-64页 |
| ·Hh信号通路的发现 | 第61页 |
| ·Hh信号通路在动物发育过程的作用 | 第61-62页 |
| ·Hh信号通路的传导过程 | 第62-63页 |
| ·信号接收细胞对不同Hh浓度梯度的识别 | 第63页 |
| ·果蝇的翅膀是研究Hh信号通路的一个很好的系统 | 第63-64页 |
| ·Hh通路和Wnt通路的相似性 | 第64页 |
| 第二节 Hh信号通路传导器Smo的调节方式 | 第64-66页 |
| ·Smo的发现 | 第64-65页 |
| ·Smo调节的研究进展 | 第65页 |
| ·通过Smo将Hh信号传播到胞内 | 第65-66页 |
| 第三节 泛素化 | 第66-69页 |
| ·泛素化 | 第66-67页 |
| ·去泛素化 | 第67-68页 |
| ·泛素连接酶 | 第68-69页 |
| 第二章 方法和材料 | 第69-86页 |
| 第一节 主要实验仪器 | 第69页 |
| 第二节 细胞系、菌株和质粒 | 第69页 |
| ·细胞系 | 第69页 |
| ·菌株 | 第69页 |
| ·质粒 | 第69页 |
| 第三节 主要实验材料 | 第69-71页 |
| ·培养基 | 第69页 |
| ·生物酶 | 第69-70页 |
| ·分子生物学试剂盒 | 第70页 |
| ·主要生化试剂 | 第70-71页 |
| 第四节 主要溶液配制 | 第71-72页 |
| ·蛋白裂解液的配方 | 第71页 |
| ·矾酸钠的配方 | 第71页 |
| ·各种缓冲液的配方 | 第71-72页 |
| 第五节 实验方法 | 第72-86页 |
| ·基因克隆 | 第72-76页 |
| ·细胞培养和转染 | 第76-77页 |
| ·合成dsRNA(双链RNA)的步骤和用dsRNA处理S2细胞的方法 | 第77-79页 |
| ·免疫沉淀 | 第79页 |
| ·蛋白质免疫印迹 | 第79-80页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第80页 |
| ·GST-pull down | 第80-83页 |
| ·果蝇显微注射技术 | 第83-85页 |
| ·免疫荧光染色技术 | 第85-86页 |
| 第三章 实验结果 | 第86-112页 |
| 第一节 Smo在果蝇细胞中的定位 | 第86-87页 |
| 第二节 RNAi干扰技术筛选Smo的泛素连接酶 | 第87-90页 |
| ·在果蝇体内筛选Smo的E3泛素连接酶和E2泛素结合酶 | 第87-88页 |
| ·通过基因修饰方法发现CG9153调节Hh信号通路的活性 | 第88页 |
| ·通过体内泛素化实验发现Eff和CG9153调节Smo的泛素化水平 | 第88-90页 |
| 第三节 Uba1、Eff和CG9153调节Smo的泛素化 | 第90-95页 |
| ·Uba1、Eff、CG9153调节Smo的泛素化过程 | 第90-91页 |
| ·Uba1、Eff、CG9153下调Smo的活性 | 第91-93页 |
| ·沉默Uba1、Eff、CG9153抑制USP8C>S对Smo泛素化的影响 | 第93-94页 |
| ·Smo泛素化依赖于Uba1、Eff和CG9153的共同作用 | 第94-95页 |
| 第四节 CG9153通过与Smo相互作用调节其泛素化 | 第95-97页 |
| ·CG9153与Smo之间的相互作用 | 第95-96页 |
| ·Smo的各个区域与CG9153之间的相互作用 | 第96-97页 |
| 第五节 CG9153的泛素化 | 第97-101页 |
| ·CG9153可以被泛素化 | 第97-98页 |
| ·Hh和USP8调节Smo的泛素化 | 第98-99页 |
| ·CG9153的降解途径 | 第99-101页 |
| 第六节 CG9153调节Smo在细胞内的稳定性 | 第101-104页 |
| ·CG9153通过蛋白酶体和溶酶体途径降解泛素化的Smo | 第101-102页 |
| ·CG9153通过多个位点单泛素化Smo | 第102-103页 |
| ·CG9153对Smo多赖氨酸残基泛素化的调节 | 第103-104页 |
| 第七节 HRS与Smo泛素化的关系 | 第104-106页 |
| 第八节 支架蛋白Cul4参与调节Smo的泛素化 | 第106-112页 |
| ·Cul4协同CG9153参与调节Smo的泛素化过程 | 第106-108页 |
| ·Cul4是CG9153调节Smo泛素化所必须的 | 第108-109页 |
| ·Smo的各个片段与Cul4之间的相互作用 | 第109-110页 |
| ·Cul4与Smo磷酸化作用之间的相互关系 | 第110-112页 |
| 第四章 讨论 | 第112-113页 |
| 第五章 结论、创新点和展望 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 个人简历 | 第120页 |
| 在学期间发表论文 | 第120页 |
