摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
前言 | 第11-14页 |
一、材料和方法 | 第14-25页 |
1. 实验材料 | 第14-19页 |
·实验动物 | 第14页 |
·主要试剂 | 第14-15页 |
·主要工作液配方 | 第15-17页 |
·主要仪器 | 第17-18页 |
·实验器材 | 第18-19页 |
2. 实验方法 | 第19-25页 |
·转基因小鼠的制备 | 第19页 |
·转基因小鼠的繁育 | 第19页 |
·小鼠组织DNA的抽提 | 第19页 |
·转基因小鼠的PCR鉴定 | 第19-21页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
·蛋白表达量的Western-blot检测 | 第21-23页 |
·朊病毒感染小鼠脑匀浆的制备 | 第23-24页 |
·小鼠脑部朊病毒的感染 | 第24-25页 |
二、实验结果 | 第25-50页 |
1. 转基因小鼠的转基因片段 | 第25-26页 |
2. 转基因小鼠的建立 | 第26-30页 |
3. 转基因小鼠脑组织中PrPQaonly及PrPQaFlag表达量的Western-blot检测 | 第30-31页 |
4. PrP敲除纯合子(PrP~(-/-))转基因鼠的获得 | 第31-35页 |
5. 内源PrP敲除的Qaonly或Flag转基因小鼠的获得 | 第35-48页 |
·[On15~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得 | 第35-39页 |
·[On5~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得 | 第39-40页 |
·[On2~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得 | 第40-42页 |
·[Flag6~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得 | 第42-45页 |
·[Flag11~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得 | 第45-46页 |
·[Flag1~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得 | 第46-47页 |
·用引物PrP28646f&Tga20-short3’对筛选到的内源PrP敲除的Qaonly或Flag转基因小鼠进一步验证 | 第47-48页 |
6. 内源PrP敲除的Qaonly或Flag转基因小鼠脑组织中PrPQaonly及PrPQaFlag表达量的Western-blot检测 | 第48-49页 |
7. 转基因小鼠脑部朊病毒感染 | 第49-50页 |
三、讨论 | 第50-53页 |
综述 | 第53-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |