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朊蛋白的细胞膜定位与其构象转变关系的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
前言第11-14页
一、材料和方法第14-25页
 1. 实验材料第14-19页
   ·实验动物第14页
   ·主要试剂第14-15页
   ·主要工作液配方第15-17页
   ·主要仪器第17-18页
   ·实验器材第18-19页
 2. 实验方法第19-25页
   ·转基因小鼠的制备第19页
   ·转基因小鼠的繁育第19页
   ·小鼠组织DNA的抽提第19页
   ·转基因小鼠的PCR鉴定第19-21页
   ·琼脂糖凝胶电泳第21页
   ·蛋白表达量的Western-blot检测第21-23页
   ·朊病毒感染小鼠脑匀浆的制备第23-24页
   ·小鼠脑部朊病毒的感染第24-25页
二、实验结果第25-50页
 1. 转基因小鼠的转基因片段第25-26页
 2. 转基因小鼠的建立第26-30页
 3. 转基因小鼠脑组织中PrPQaonly及PrPQaFlag表达量的Western-blot检测第30-31页
 4. PrP敲除纯合子(PrP~(-/-))转基因鼠的获得第31-35页
 5. 内源PrP敲除的Qaonly或Flag转基因小鼠的获得第35-48页
   ·[On15~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得第35-39页
   ·[On5~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得第39-40页
   ·[On2~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得第40-42页
   ·[Flag6~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得第42-45页
   ·[Flag11~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得第45-46页
   ·[Flag1~(+/-),PrP~(-/-)]基因型小鼠的获得第46-47页
   ·用引物PrP28646f&Tga20-short3’对筛选到的内源PrP敲除的Qaonly或Flag转基因小鼠进一步验证第47-48页
 6. 内源PrP敲除的Qaonly或Flag转基因小鼠脑组织中PrPQaonly及PrPQaFlag表达量的Western-blot检测第48-49页
 7. 转基因小鼠脑部朊病毒感染第49-50页
三、讨论第50-53页
综述第53-57页
参考文献第57-63页
致谢第63-64页

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