摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
目录 | 第10-14页 |
英文缩略表 | 第14-16页 |
第1章 绪论 | 第16-23页 |
·引言 | 第16页 |
·研究背景 | 第16-22页 |
·鹿茸的发生 | 第16-17页 |
·鹿茸的再生 | 第17-19页 |
·Galectin-1 的生物学特性与功能 | 第19-21页 |
·鹿茸干细胞中的 Galectin-1 | 第21-22页 |
·研究的目的及意义 | 第22页 |
·研究内容 | 第22-23页 |
第2章 GAL-1 基因重组慢病毒载体的构建及鉴定 | 第23-42页 |
·实验材料 | 第23-27页 |
·实验试剂 | 第23页 |
·主要试剂配制 | 第23-24页 |
·实验主要仪器 | 第24页 |
·慢病毒系统 | 第24-27页 |
·实验方法 | 第27-35页 |
·东北梅花鹿 Gal-1 基因 RNAi 靶位点的筛选 | 第27-30页 |
·shRNA 寡核苷酸链 | 第30页 |
·shRNA 退火 | 第30-31页 |
·感受态细胞的制备 | 第31页 |
·载体质粒的转化、小摇 | 第31-32页 |
·载体质粒 DNA 的小量提取 | 第32页 |
·载体质粒的酶切 | 第32-33页 |
·载体质粒 DNA 片段的胶回收 | 第33-34页 |
·重组片段的连接、转化及小量提取 | 第34页 |
·重组载体质粒的鉴定 | 第34-35页 |
·实验结果 | 第35-40页 |
·shRNA 寡核苷酸链退火结果 | 第35-36页 |
·载体质粒的酶切结果 | 第36-37页 |
·重组 pLVTHM 的 PCR 鉴定结果 | 第37-38页 |
·重组质粒测序结果 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·本章小结 | 第41-42页 |
第3章 重组慢病毒的获得 | 第42-50页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·实验试剂 | 第42页 |
·主要试剂配制 | 第42-43页 |
·实验仪器 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-46页 |
·psPAX2 的酶切鉴定 | 第43-44页 |
·慢病毒三质粒的无内毒素大量提取 | 第44-45页 |
·复苏 293t 细胞 | 第45页 |
·293t 细胞的传代培养 | 第45页 |
·重组慢病毒的包装 | 第45-46页 |
·病毒的收集、浓缩 | 第46页 |
·实验结果 | 第46-48页 |
·psPAX2 酶切鉴定结果 | 第46-47页 |
·病毒包装结果 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48页 |
·本章小结 | 第48-50页 |
第4章 生茸区骨膜干细胞原代培养及重组慢病毒的感染 | 第50-58页 |
·实验耗材 | 第50页 |
·实验仪器 | 第50页 |
·实验步骤 | 第50-54页 |
·生茸区骨膜干细胞原代培养 | 第50-51页 |
·生茸区骨膜干细胞的传代及冻存 | 第51页 |
·病毒感染生茸区骨膜干细胞 | 第51-52页 |
·提取细胞总 RNA | 第52页 |
·RT-PCR 反应 | 第52-54页 |
·实验结果 | 第54-56页 |
·原代培养结果 | 第54页 |
·感染结果 | 第54-55页 |
·RT-PCR 检测结果 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-57页 |
·本章小结 | 第57-58页 |
第5章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
附录 | 第63-65页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |