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梅花鹿生茸区骨膜干细胞Galectin-1基因RNAi重组慢病毒载体的构建

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
目录第10-14页
英文缩略表第14-16页
第1章 绪论第16-23页
   ·引言第16页
   ·研究背景第16-22页
     ·鹿茸的发生第16-17页
     ·鹿茸的再生第17-19页
     ·Galectin-1 的生物学特性与功能第19-21页
     ·鹿茸干细胞中的 Galectin-1第21-22页
   ·研究的目的及意义第22页
   ·研究内容第22-23页
第2章 GAL-1 基因重组慢病毒载体的构建及鉴定第23-42页
   ·实验材料第23-27页
     ·实验试剂第23页
     ·主要试剂配制第23-24页
     ·实验主要仪器第24页
     ·慢病毒系统第24-27页
   ·实验方法第27-35页
     ·东北梅花鹿 Gal-1 基因 RNAi 靶位点的筛选第27-30页
     ·shRNA 寡核苷酸链第30页
     ·shRNA 退火第30-31页
     ·感受态细胞的制备第31页
     ·载体质粒的转化、小摇第31-32页
     ·载体质粒 DNA 的小量提取第32页
     ·载体质粒的酶切第32-33页
     ·载体质粒 DNA 片段的胶回收第33-34页
     ·重组片段的连接、转化及小量提取第34页
     ·重组载体质粒的鉴定第34-35页
   ·实验结果第35-40页
     ·shRNA 寡核苷酸链退火结果第35-36页
     ·载体质粒的酶切结果第36-37页
     ·重组 pLVTHM 的 PCR 鉴定结果第37-38页
     ·重组质粒测序结果第38-40页
   ·讨论第40-41页
   ·本章小结第41-42页
第3章 重组慢病毒的获得第42-50页
   ·实验材料第42-43页
     ·实验试剂第42页
     ·主要试剂配制第42-43页
   ·实验仪器第43页
   ·实验方法第43-46页
     ·psPAX2 的酶切鉴定第43-44页
     ·慢病毒三质粒的无内毒素大量提取第44-45页
     ·复苏 293t 细胞第45页
     ·293t 细胞的传代培养第45页
     ·重组慢病毒的包装第45-46页
     ·病毒的收集、浓缩第46页
   ·实验结果第46-48页
     ·psPAX2 酶切鉴定结果第46-47页
     ·病毒包装结果第47-48页
   ·讨论第48页
   ·本章小结第48-50页
第4章 生茸区骨膜干细胞原代培养及重组慢病毒的感染第50-58页
   ·实验耗材第50页
   ·实验仪器第50页
   ·实验步骤第50-54页
     ·生茸区骨膜干细胞原代培养第50-51页
     ·生茸区骨膜干细胞的传代及冻存第51页
     ·病毒感染生茸区骨膜干细胞第51-52页
     ·提取细胞总 RNA第52页
     ·RT-PCR 反应第52-54页
   ·实验结果第54-56页
     ·原代培养结果第54页
     ·感染结果第54-55页
     ·RT-PCR 检测结果第55-56页
   ·讨论第56-57页
   ·本章小结第57-58页
第5章 结论第58-59页
参考文献第59-63页
附录第63-65页
攻读学位期间发表的学术论文第65-66页
致谢第66页

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